PGE2 增強 IL4Rα 信號以增強巨噬細胞的 M2 *** 巨噬細胞能夠響應可變的局部微環(huán)境信號從一種功能表型切換到另一種功能表型。除了經(jīng)典的信號級聯(lián)（例如，IL4/IL4Rα），巨噬細胞還可以整合由細胞外刺激觸發(fā)的代謝線索，以***它們的 M2表型。在這里，我們想知道 PGE2 是否也參與了 AP 損傷后胰腺巨噬細胞的 M2 極化。為此，我們首先檢查了 AP 損傷后 PGE2 的動態(tài)表達。COX1 和 COX2 是產(chǎn)生前列腺素的兩種關鍵酶。在這里我們發(fā)現(xiàn)Ptgs2 (COX2)的表達在第 3 天達到峰值，而Ptgs1 (COX1)的表達在第 1 天下降并在第 3 天回到基礎水平...

4、CLF1敲除抑制小鼠HCC的生長和肺部轉移隨后，作者在體內(nèi)進一步驗證CLF1的功能。結果如圖3所以，敲除CFL1后***降低了HCC細胞的**體積和**，并減少了肺轉移結節(jié)數(shù)量。IHC表明CLF1的敲除也導致EMT相關蛋白的抑制?？傊珻LF1敲除抑制小鼠HCC的生長和肺部轉移。 5、CFL1是HIF-1α在HCC細胞中的下游靶基因為了闡明低氧對HCC中CFL1表達的影響，將HCCLM3和Hep3B細胞在低氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。結果發(fā)現(xiàn)低氧誘導導致CFL1的表達升高，但是當HIF-1α敲除后，低氧誘導并不能提高CFL1的表達，并且使用HIF-1α的抑制劑處理HCCLM3和Hep3...

circACTN4的表達與年齡（P ?= 0.036）、T（P ?= 0.001）、N（P ?= 0.001）和TNM分期（P < 0.001）呈正相關，但與分級無關。利用ISH檢測包含240個 BC組織的組織芯片確定circACTN4的表達。Kaplan-Meier生存分析顯示，circACTN4高表達患者的總生存期比circACTN4低表達患者的總生存期短。circACTN4的表達與T分期、N分期和TNM分期呈正相關。Cox 比例風險模型評估 circACTN4 的預后價值。結果顯示circACTN4的過表達是BC患者預后不良的**預測因子（HR = 4.566，P <0.001）。cir...

CircACTN4促進體內(nèi)異種移植**的發(fā)生和轉移 為了評估circACTN4在體內(nèi)的致*作用，通過皮下注射和尾靜脈注射在裸鼠中建立人BC細胞**模型。用過表達 circACTN4 慢病毒或 circACTN4 shRNA 慢病毒及其對照***的 MCF-7 細胞接種雌性裸鼠。結果表明，circACTN4過表達組異種移植**的體積和重量明顯大于對照組，而circACTN4敲低顯著抑制了**生長。與對照組相比，circACTN4的上調(diào)明顯增加了轉移性肺結節(jié)的數(shù)量，而circACTN4沉默顯著抑制了自發(fā)性肺轉移，侵襲性**細胞較少。此外，circACTN4 的過表達可以顯著促進**血管生...

為理解TYRO3在抗PD-1/PD-L1耐藥中的機制作用，從4T1-P、TYRO3-OE、4T1-R和TYRO3–/–細胞中提取RNA進行全轉錄組分析。2種耐藥細胞系Tyro3-OE和4T1-R之間的轉錄組學變化高度相似，變化的重疊百分比較高，表明Tyro3在促進**細胞對抗PD-1/PD-L1***耐藥中的作用。來自TCGA數(shù)據(jù)庫的黑色素瘤患者TYRO3基因的通路分析也顯示TYRO3表達與PD-1/PD-L1**免疫***通路呈正相關，與T細胞介導的抗**反應相關通路（CTL介導的細胞凋亡和死亡受體信號），炎癥反應相關通路（Th1活化、Th2活化、NF-κB信號）呈負相關。HMGB1是一種損...

為了探索 HIF1α促進circMYH9表達的分子機制，測量了 MYH9 前體 mRNA 的表達。SG或Glu饑餓增加了MYH9的前體mRNA 水平，HIF1α敲低降低了缺乏SG或Glu的CRC細胞中的MYH9前體 mRNA 水平。這些結果表明HIF1α在轉錄水平上促進 MYH9 前體 mRNA，這進一步增加了circMYH9。使用 JASPAR 搜索了MYH9啟動子中的HIF1α結合位點和基序。確定了兩個**可能的HIF1α結合位點。ChIP-qPCR 證明 HIF1α與HCT116細胞中MYH9 啟動子的兩個HBS位點結合。為了證實HIF1α通過HBS促進MYH9表達，構建了包含全長MYH...

與CRC細胞共培養(yǎng)可通過ALKBH3增加血細胞5’-tRF-GlyGCC 與所有檢測的CRC細胞共培養(yǎng)可***提高PENG-EBV細胞中的5’-tRF-GlyGCC水平。與CRC細胞共培養(yǎng)可***提高THP-1細胞中5’-tRF-GlyGCC水平。與所有CRC細胞共培養(yǎng)時，PENG-EBV細胞中ALKBH3mRNA的表達也明顯增加。westernblot分析證實，與CRC細胞共培養(yǎng)提高了PENG-EBV細胞中ALKBH3蛋白的表達。作者進一步研究了ALKBH3是否參與CRC誘導的血細胞5’-tRF-GlyGCC。ALKBH3在PENG-EBV細胞中的表達被下調(diào)。結果表明，缺失ALKB...

此外，GFP-INPP4B的表達在基礎和wnt刺激條件下降低了GSK3β蛋白水平，與GSK3β的增強破壞一致(圖6d)。通過HrsshRNA消耗抑制晚期核內(nèi)體形成后，降低的GSK3β蛋白水平得以恢復(圖6f,g)。GFP-INPP4B而不是gfp載體細胞表現(xiàn)出明顯的GSK3β蛋白酶保護，這與GSK3β向晚期核內(nèi)體轉運的增強相一致(圖6h)。免疫熒光證實了這一點，在GFP-INPP4B中觀察到RFP-GSK3與LysoTracker共定位，這是一種積累在晚期核內(nèi)體/溶酶體中的染料，而不是gfp載體細胞(圖6i)。英拜提供可靠的技術咨詢。河北科研服務兩年 綜上所述，這些發(fā)現(xiàn)表明TYRO3抑制**...

A.29名兒童在進行異體造血干細胞移植前、移植時、移植后即刻以及后期隨訪時均進行了監(jiān)測。監(jiān)測患者的基線特征、臨床結果、免疫細胞計數(shù)以及炎癥和***標志物。表S1(附加文件1)詳細描述了患者特征。宿主免疫系統(tǒng)參數(shù)與腸道、口腔和鼻腔微生物群的縱向動力學相關，這些微生物群在指定的時間點進行了評估。 B.每個身體部位HSCT前、移植時和移植后的細菌α多樣性以log10變換后的y軸顯示。星號表示時間點間的中值逆Simpson指數(shù)存在***差異。C.相對于HSCT的時間點LDA分析。對于糞便樣本，HSCT后立即采集的樣本LDA評分為陽性。對于口腔和鼻腔樣本，在HSCT前和后期隨訪時間點樣本的LD...

如圖4所示，與LS相比，慢性OS降低了KLF2和KLF4的表達，同時誘導了EndMT標記物(SNAI1和TAGLN)。重要的是，慢性OS誘導了兩個巨噬細胞標記基因(C1QC和C5AR1)的表達，直接證明了OS可以在體外誘導EndICLT。此外，我們利用小鼠PCL模型進行了一項en - face共免疫染色研究，以確定體內(nèi)CDH5+ ECs中是否表達巨噬細胞標記蛋白。如圖4A-4D所示，C1QA和LYZ在LCA ECs中明顯被誘導，而在rca中沒有，這為血流誘導的eniclt提供了更有力的證據(jù)。我們分析了由基因本體結果確定的d-flow條件***的致***通路(圖2E)。英拜在全國各省會城市均有自...

英拜生物立足于生命科學實驗技術服務的公司，服務平臺有細胞生物學研究平臺、分子生物學研究平臺、病理學研究平臺、免疫學研究平臺、蛋白質(zhì)與多肽研究平臺、測序和芯片研究平臺，高通量/高內(nèi)涵篩選平臺、分子表觀遺傳學研究平臺，提供專業(yè)檢測服務、技術合作和轉化服務指導。英拜生物服務項目分子生物學檢測蛋白質(zhì)與免疫學動物實驗實時熒光定量PCR，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術Western-blot實驗服務，雙熒光素酶報告基因檢測，染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP），pullDown，過表達/干擾腺病毒包裝純化細胞整體實驗外包動物整體實驗外包腺相關病毒包裝純化肺炎大鼠模型肝炎-肝硬化-肝cancer模型蛋白芯...

4）SsD通過直接抑制FTOm6A去甲基化活性來誘導m6A修飾 為了檢測m6A在RNA上的變化，我們在SsD處理的白血病細胞中進行了m6A點印跡實驗。如圖4A所示，SsD***增加了m6A在轉錄組中的豐度。此外，HPLC-MS/MS定量證實了SsD處理的NB4和Kas-1細胞mRNA中細胞m6A的增加(圖4B)。接下來，我們檢測了FTO的兩個直接靶點MYC和RARA在SsD處理的細胞中的表達。SsD在mRNA和蛋白水平***下調(diào)了NB4和Kas-1細胞的MYC，而上調(diào)了RARA(圖4C-D)。有趣的是，SsD依賴的MYC和RARA的減少是由于FTO過表達細胞中mRNA和蛋白穩(wěn)定性的降...

***，分析了MAOA基因表達水平與幾種**病人臨床預后的關系，結果顯示瘤內(nèi)MAOA基因與卵巢*，淋巴*和乳腺*患者的臨床總生存率呈現(xiàn)負相關關系（圖6o-q）。此外，黑色素瘤患者**內(nèi)高水平的MAOA表達很大程度上抵消了PD-1***提供的生存好處，提示MAO-A阻斷***與PD-1/PD-L1阻斷***聯(lián)合可能通過調(diào)節(jié)TAM極化，從而改變免疫抑制TME，提高抗**免疫能力，提供協(xié)同***好處（圖6r）。綜上所述，人類TAM和臨床相關性研究證實了MAO-A作為人類TAM中一個有前途的藥物靶點，并支持了MAO-A通過靶向TAM重編程阻斷**免疫***的翻譯潛力。巨噬細胞表型協(xié)調(diào)急性胰腺炎損傷后的...

二、染色質(zhì)的可及性明確了細胞的類型 我們使用R包Signac來研究不同細胞類型間染色質(zhì)可及性的差異。細胞類型可以根據(jù)差異開放區(qū)域（DARs）是開放的還是封閉的來區(qū)分(Fig.2a）。約20%(平均比例=0.2030.04)的DAR與各自細胞類型中的差異表達基因密切相關(補充表4)。例如，LRP2是一個表達在近端小管的譜系特異性基因，該區(qū)域的覆蓋圖顯示其啟動子和基因體內(nèi)ATAC峰的數(shù)量和幅度增加(圖2a)。事實上，大部分DAR都位于距離**近的轉錄起始位點3kb內(nèi)的啟動子區(qū)域(圖2b，補充圖7)。第二個**常見的位置是內(nèi)含子，DAR在不同細胞類型中的分布相對保守(圖2c)。 英拜專注高...

人類的炎癥反應和自身免疫甲基化PCR芯片用于研究已報道參與炎癥反應的22個關鍵基因的啟動子甲基化狀態(tài)。利用該芯片分析細胞或新鮮組織DNA樣本可能有助于研究CpG島甲基化狀態(tài)與促炎或***反應的關系。結果也可能助于洞察炎性疾病背后的分子機制和生物學通路。利用這個芯片,通過簡單的限制性內(nèi)切酶消化和實時定量PCR,就可以研究分析22個不同炎癥反應與自身:免疫基因的啟動子甲基化狀態(tài)。芯片：信號通路pcr芯片 蛋白芯片。標書申請：提供標書撰寫，標書部分基礎實驗的展開，設計的標書均符合科研前沿熱點，中標率很高。英拜潤色的標書的中標率**提高。重慶腸道運輸科研 C.為了評估這種差異對每種方法獲得的數(shù)據(jù)的...

分化通常與T細胞接收的免疫信號有關:共刺激或細胞因子信號支持一種或另一種命運。然而，環(huán)境的代謝組成、檢測該環(huán)境的營養(yǎng)傳感器以及T細胞固有的代謝狀態(tài)也對決定分化的**終結果至關重要。代謝信號是理解的關鍵，因為T細胞的***和分化發(fā)生在各種代謝不同的組織環(huán)境。在**中，**細胞代謝的升高可以***改變T細胞所經(jīng)歷的營養(yǎng)環(huán)境。我們之前的研究表明，T細胞浸潤**時存在嚴重的代謝缺陷:葡萄糖攝取能力受到抑制，功能性線粒體質(zhì)量喪失，伴隨衰竭的發(fā)展。我們和其他人也表明，糾正這種錯誤的代謝狀態(tài)(通過各種方法)可以增強免疫功能，實現(xiàn)免疫***效果。上海英拜生物有經(jīng)驗豐富的科研團隊。血清科研整體服務為了進一步研究...

2)在體內(nèi)和體外，DRD2的表達抑制BrCa細胞的**發(fā)生 構建過表達DRD2的MDA-MB231和BT549細胞，通過RT-PCR(Figure2A)和WB(Figure2B)驗證。CCK8實驗證明，DRD2異位表達抑制**細胞生長(圖2C)。在單層集落形成實驗(圖2D)和軟瓊脂形成實驗(圖2E)中，DRD2也損害了存活能力。并進行細胞凋亡和細胞周期分布分析。DRD2的表達***促進了BrCa細胞凋亡(圖2F)，并阻斷了MDA-MB231和BT549在G2/M期的凋亡(圖2G)。此外，過表達DRD2促進了BrCa細胞對PTX的敏感性(圖2H)。在傷口愈合實驗中，異位表達的DRD2比...

肝miRNA發(fā)現(xiàn)者miRNAPCR芯片用于研究肝組織豐富表達或特異性表達的84個miRNA。已注釋的miRNA的數(shù)量不斷擴大,重點關注那些特異表達某種細胞系或組織的miRNA變得尤為重要,并非所有的miRNA在每一個組織中都表達。因此，我們通過實驗在人類肝臟樣本池通過miRBaseV18分析已鑒定的miRNA的表達,并將結果與相關文獻進行比較。每一種miRNA可以調(diào)節(jié)一個或多個信使RNA轉錄，反之一個給定的信使RNA可以由-個或多個miRNA調(diào)節(jié)。因此,盡管他們很有特點，每個miRNA的復雜作用尚未完全定義。這個芯片比較大化發(fā)現(xiàn)與肝組織或肝細胞系生物學表型相關的miRNA。每張芯片含一個對照組...

WNT信號通路qBiomarker拷貝數(shù)PCR芯片用于研究WNT信號傳導通路上已報道發(fā)生頻繁突變的23個基因的拷貝數(shù)。芯片上基因的選擇包括WNT通路組件、與WNT通路交互作用的分子或通路以及WNT通路效應器。這些基因編碼細胞粘附分子、受體、轉錄因子和調(diào)節(jié)細胞周期遷移,**和細胞分化、發(fā)育障礙等過程的其它信號蛋白。多種痙癥已報道WNT相關基因DNA拷貝數(shù)發(fā)生變異。基于文獻和公共數(shù)據(jù)庫,該芯片選擇**頻繁擴增或缺失的WNT信號通路相關基因。這個芯片可做為幫助分類樣本的基因型并驗證表型生物標記的有效工具來。這個芯片可以使每個基因在每個樣本中有四個重復,同時包含一個穩(wěn)定的多拷貝參考實驗,通過適當?shù)腄N...

另外，相對于對照組，在生理條件下，單獨使用siFth不能顯著增加ROS的產(chǎn)生。對鐵死亡的抗性與抑制BODIRY-C11氧化有關。與上述ROS結果一致。測量了鐵死亡的幾種推定生物標志物，包括xCT，Cox2和4HNE表達。如預期的那樣，與對照組+刮擦損傷組相比，在siFth轉染的HT-22細胞中，刮擦損傷的xCT表達顯著下降，而Cox-2和4HNE的表達顯著增加。重要的是，與未經(jīng)***的siFth組相比，用褪黑素處理siFth轉染的HT-22細胞在刮傷后未能顯著改變xCT，Cox2和4HNE的表達。另外，在生理條件下，單獨的siFth與對照組之間上述蛋白質(zhì)的表達沒有顯著差異。這些結果表明，用si...

3）IGF-1信號在Pex誘導的HSC活化和肝纖維化中至關重要 為了進一步探索Pex調(diào)控HSC行為的機制，我們比較了Pex和Npex組間的HSC的RNA測序基因表達譜(圖3A)。在差異表達基因中，我們觀察到41個重疊的上調(diào)基因在Pan02exo組與Npex組和KPCexo組與Npex組之間存在部分交集(圖3B)。主要涉及的基因參與細胞外空間、細胞外區(qū)域和ECM(圖3C)，表明Pex調(diào)節(jié)HSC的ECM分泌。此外，GO和KEGG通路分析顯示，IGF-1及其下游PI3K/AKT是受Pex影響的排名比較高的信號通路(圖3D，E)。westernblot分析支持了Pex***增加HSC中IGF...

該研究是基于生殖系拷貝數(shù)變異(CNV)的全基因組關聯(lián)分析（GWAS），通過對比1583例乙型肝炎病毒（HBV）相關的肝*患者與1540例乙型肝炎病毒（HBV）相關的非肝*患者，發(fā)現(xiàn)了一個低頻重復染色體15q13.3與乙型肝炎病毒相關的肝*患病風險密切相關（P=3.17×10–8;odds ratio, 12.02)。15q13.3的拷貝數(shù)與SNORA18L5在肝組織中的表達相關。過表達SNORA18L5的增加了小鼠肝*細胞的增殖和移植瘤的生長;干擾SNORA18L5降低了肝*的增殖和**的生長。SNORA18L5在HepG2和SMMC-7721細胞中的過表達可抑制p53依賴性細胞周期阻滯和凋亡...

circACTN4增加遷移和侵襲并調(diào)節(jié)BC細胞的細胞周期進程 為了進一步評估circACTN4在BC進展中的作用，在circACTN4過表達或敲低后研究了BC細胞的遷移、侵襲和細胞周期。劃痕和transwell試驗表明，BC細胞的侵襲和遷移能力因circACTN4的上調(diào)而顯著增加，但被circACTN4的下調(diào)顯著抑制。WB結果發(fā)現(xiàn)過表達或敲低BC細胞中MMP9和MMP2蛋白水平明顯升高或降低，nm23-H1表達明顯降低或升高。式細胞術測定細胞周期分析，結果顯示與對照組相比，circACTN4的敲低導致S期BC細胞比例較低，G1期BC細胞比例較高，這表明circACTN4沉默導致G1期...

7）MIR210HG通過miR-337-3p和miR-137促進**進展 為了確定MIR210HG下調(diào)對Ishikawa和HEC-1A細胞系惡性行為的抑制作用是否通過miR-337-3p/137介導，我們進行了功能挽救實驗。結果證實MIR210HG沉默對Ishikawa和HEC-1A細胞遷移和侵襲的惡性抑制作用被miR-337-3p/137敲低***逆轉(圖7A-7E)。這表明MIR210HG通過miR-337-3p/137調(diào)控Ishikawa和HEC-1A細胞的惡性生物學行為。 8）抑制MIR210HG和miR-337-3p/137過表達抑制**生長 我們測定了MIR2...

一、LC3陽性囊泡在質(zhì)膜損傷后在修復部位積聚 用激光照射*細胞MCF7，致使細胞膜上形成小孔。使用膜不可滲透的FM1-43染料測量膜完整性，發(fā)現(xiàn)在Ca2+存在下，細胞能夠在20到30s內(nèi)修復它們的質(zhì)膜(Fig.1,AandB,left)；在缺乏Ca2+的培養(yǎng)基中受損的細胞無法修復并繼續(xù)吸收細胞不可滲透的染料(Fig.1B,right)。使用穩(wěn)定表達融合蛋白增強型綠色熒光蛋白(eGFP)-LC3的MCF7細胞研究激光照射后自噬是否參與該過程，結果顯示，LC3陽性點在損傷后大約8-10min開始在修復部位形成（Fig.1C）；在未損傷區(qū)域中LC3陽性點未增加（Fig.1D）；LC3依賴于...

HoxBlinc的過表達通過提高HSPC+中增強子/啟動子染色質(zhì)的可及性***NPM1c+標記基因 為了進一步確定HOXBLINC是否是NPM1c+的下游介質(zhì)，以維持HSPC中NPM1c+標記基因的***，對8周齡小鼠的WT和HoxBlincTgLSK細胞進行了RNA-seq，總計鑒定到1281個差異表達基因（圖4a）。其中，上調(diào)的有718個，下調(diào)的有563個。值得注意的是，在NPM1c/+vs.WTLSK細胞中，27.3%的上調(diào)基因和21%的下調(diào)基因基因重疊（圖4b）。GSEA分析HoxBlincTgvs.WTLSK細胞差異表達基因揭示了與NPM1c/+與WTLSK細胞相似的轉錄特...

為了檢測補充NAD + 是否可以糾正IFNα刺激的下游效應，用1 mM β-煙酰胺單核苷酸(NMN)培養(yǎng)CD8 + T細胞以恢復NAD +/NADH比值（圖6e）。然后，評估了用抗CD3/CD28再刺激后的氧化反應和細胞活力。補充NMN的NAD + 增加了OCR（圖6f），但未增加ECAR，表明線粒體能力增加。重要的是，通過NMN處理恢復NAD + 的可用性改善了IFNα延長和TCR刺激后的細胞活力（圖6 g），表明NAD途徑調(diào)節(jié)這些活化的人CD8 + T細胞中的線粒體適應性和細胞存活率。總之，這些數(shù)據(jù)表明，在人TCR刺激的CD8 + T細胞中，延長IFNα暴露增加了NAD + 的消耗，并降低...

CircMYH9通過hnRNPA2B1調(diào)節(jié)p53前體mRNA的穩(wěn)定性 為了解釋circMYH9調(diào)節(jié)p53表達的機制，進行了qRT-PCR和FISH以確定circMYH9在HCT116和LoVo細胞中的亞細胞位置。結果表明，circMYH9主要定位于細胞核中。由于circMYH9敲低不影響p53啟動子活性。有趣的是，在用放線菌素D阻斷新的RNA合成后，發(fā)現(xiàn)沉默circMYH9并沒有在12小時內(nèi)改變p53mRNA的穩(wěn)定性，但在24小時內(nèi)顯著增強了p53mRNA的穩(wěn)定性，表明circMYH9可能間接抑制p53的mRNA降解。事實上，circMYH9siRNA處理后p53前體mRNA表達增加...

此外，核輸出基因Emb (Exportin)的mRNA水平在tbi后***增加(圖1M)，而與對照組相比，微管相關蛋白Futsch的mRNA水平?jīng)]有變化(圖1圖Supplement 1H)，這與蛋白質(zhì)組學分析一致。Western blotting進一步證實了tbi依賴性的果蠅幼蟲腦內(nèi)Nup214蛋白水平的升高(圖1N和O)。Western blot分析了損傷后幼蟲(0、2、4和6小時)和成蟲(0、2、4、24和72小時)的時間過程，以評估Nup214蛋白的水平。在檢測的時間點上，不管是幼蟲還是成人的大腦中，Nup214蛋白的水平都是上調(diào)的(圖1P,Q,R,S)，這表明創(chuàng)傷可能會破壞Nup214...

雄***和雄***受體(AR)是******轉錄因子(TF)，是驅動前列腺*(PCa)發(fā)***展的關鍵因素。因此AR是晚期PCa******的主要分子靶點。雄***剝奪療法，特別是第二代抗雄***和雄***合成抑制劑**初是有效的。然而，由于患者仍然可以從晚期PCa進展到致命性去勢抗性前列腺*(CRPC)，需要新的***靶點和生物標志物。靶蛋白的一個來源可能是ar相關的染色質(zhì)蛋白。 大多數(shù)目前已知的核受體(NR)相互作用蛋白，包括那些AR，已經(jīng)通過遺傳篩選，如雙雜交系統(tǒng)，免疫共沉淀和基于肽段的體外方法。盡管親和純化-質(zhì)譜耦合(MS)已經(jīng)啟發(fā)了NRs的輔助調(diào)節(jié)器，但它很少在**NRs自...