分化通常與T細(xì)胞接收的免疫信號(hào)有關(guān):共刺激或細(xì)胞因子信號(hào)支持一種或另一種命運(yùn)。然而，環(huán)境的代謝組成、檢測(cè)該環(huán)境的營(yíng)養(yǎng)傳感器以及T細(xì)胞固有的代謝狀態(tài)也對(duì)決定分化的**終結(jié)果至關(guān)重要。代謝信號(hào)是理解的關(guān)鍵，因?yàn)門細(xì)胞的***和分化發(fā)生在各種代謝不同的組織環(huán)境。在**中，**細(xì)胞代謝的升高可以***改變T細(xì)胞所經(jīng)歷的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境。我們之前的研究表明，T細(xì)胞浸潤(rùn)**時(shí)存在嚴(yán)重的代謝缺陷:葡萄糖攝取能力受到抑制，功能性線粒體質(zhì)量喪失，伴隨衰竭的發(fā)展。我們和其他人也表明，糾正這種錯(cuò)誤的代謝狀態(tài)(通過(guò)各種方法)可以增強(qiáng)免疫功能，實(shí)現(xiàn)免疫***效果。上海英拜生物有經(jīng)驗(yàn)豐富的科研團(tuán)隊(duì)。血清科研整體服務(wù)
為了進(jìn)一步研究MAO-A是否作為巨噬細(xì)胞自主因子直接調(diào)控TAM極化從而影響抗**免疫，進(jìn)行了巨噬細(xì)胞過(guò)繼轉(zhuǎn)移**實(shí)驗(yàn)。從Maoa WT和KO小鼠中獲取BM細(xì)胞，然后培養(yǎng)成骨髓源性巨噬細(xì)胞(bone marrow macrophages, BMDMs)。然后將這些Maoa WT或KO BMDMs與B16-OVA黑色素瘤細(xì)胞混合，皮下注射到BoyJ WT受體小鼠中建立實(shí)體**（圖2g）。在本實(shí)驗(yàn)中，MAO-A缺乏的比較***于TAM細(xì)胞。在接受Maoa KO BMDMs小鼠中觀察到**生長(zhǎng)抑制（圖2h-i），TAM免疫抑制markers下調(diào)（圖2j），免疫刺激markers上調(diào)（圖2k-l），以及增強(qiáng)**浸潤(rùn)C(jī)D8+T細(xì)胞***（圖2m）。綜上所述，這些體內(nèi)研究表明MAO-A作為一種直接調(diào)節(jié)TAM極化的自主因子，從而影響T細(xì)胞抗**反應(yīng)性和影響**生長(zhǎng)。
PTEN包含一個(gè)n端磷酸酶結(jié)構(gòu)域，它可以使脂質(zhì)細(xì)胞膜的一種成分——磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PI(3,4,5)P3或PIP3)去磷酸化。PTEN通過(guò)去磷酸化PIP3的D3位，拮抗磷脂酰肌苷3-激酶(PI3K)通路。PI3K通路調(diào)節(jié)多種細(xì)胞過(guò)程，包括細(xì)胞代謝、存活、增殖、凋亡、生長(zhǎng)和遷移。這些基本的細(xì)胞過(guò)程，當(dāng)解除控制時(shí)，可以促進(jìn)或驅(qū)動(dòng)惡性表型。
PTEN功能突變的體細(xì)胞丟失在多種人類**中被發(fā)現(xiàn)，包括乳腺*、子宮內(nèi)膜*、多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、皮膚*和前列腺*。PTEN缺失是乳腺*中常見(jiàn)的事件，與加速進(jìn)展和不良預(yù)后密切相關(guān)。特別是PTEN的表達(dá)已經(jīng)被提出在人表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER2)過(guò)表達(dá)乳腺*中發(fā)揮重要作用。HER2是表皮生長(zhǎng)因子受體家族的一員，具有酪氨酸激酶活性。它的過(guò)表達(dá)，在大約15-20%的乳腺*病例中觀察到，與侵襲性臨床行為和不良預(yù)后相關(guān)。曲妥珠單抗是一種與HER2胞外結(jié)構(gòu)域具有高親和力的單克隆抗體，是一種有效的***HER2陽(yáng)性乳腺*患者的方法。PTEN表達(dá)檢測(cè)的總有效率約為70%，而PTEN表達(dá)陰性患者的總有效率*為20%。
YTHDC2調(diào)節(jié)SLC7A11 mRNA的穩(wěn)定性(圖5A-D)，而控制RNA衰減是m6A甲基化的重要功能之一。作者先驗(yàn)證METTL3刺激m6A的能力(圖5E、F)。在H1975細(xì)胞中敲降METTL3延長(zhǎng)了SLC7A11 mRNA的半衰期，而在H1299細(xì)胞中過(guò)表達(dá)METTL3則加速了SLC7A11 mRNA的降解(圖5G)。此外，H1299細(xì)胞中降低METTL3表達(dá)阻斷了YTHDC2，從而減緩SLC7A11 mRNA的衰減，刺激胱氨酸攝取并減弱脂質(zhì)活性氧(ROS)的生成(圖5H-J)，這表明YTHDC2在LUAD細(xì)胞中的作用是依賴m6A。
6.YTHDC2傾向于相互作用并使m6A甲基化的SLC7A11mRNA不穩(wěn)定
為了揭示SLC7A11mRNA中潛在的m6A甲基化位點(diǎn)，在H1975細(xì)胞中METTL3敲除前后分別進(jìn)行了MeRIP-seq研究。在H1975細(xì)胞中，無(wú)論是否敲除METTL3,GGACmotif都高度富集于m6A位點(diǎn)(圖6A)。m6A峰在mRNA停止密碼子附近的3’非翻譯區(qū)(3’UTR)尤為豐富(圖6B)。為了進(jìn)一步證實(shí)SLC7A11mRNA的m6A依賴性修飾，我們進(jìn)行MeRIP-qPCR。在H1975細(xì)胞中，敲除METTL3后，SLC7A11mRNA中的m6A修飾明顯減少，特別是在假定的m6A位點(diǎn)周圍。相反，當(dāng)METTL3在H1299細(xì)胞中過(guò)表達(dá)時(shí)，觀察到相反的結(jié)果(圖6C)。 英拜是您身邊的科研小助手。
英拜生物立足于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)的公司，服務(wù)平臺(tái)有細(xì)胞生物學(xué)研究平臺(tái)、分子生物學(xué)研究平臺(tái)、病理學(xué)研究平臺(tái)、免疫學(xué)研究平臺(tái)、蛋白質(zhì)與多肽研究平臺(tái)、測(cè)序和芯片研究平臺(tái)，高通量/高內(nèi)涵篩選平臺(tái)、分子表觀遺傳學(xué)研究平臺(tái)，提供專業(yè)檢測(cè)服務(wù)、技術(shù)合作和轉(zhuǎn)化服務(wù)指導(dǎo)。英拜生物服務(wù)項(xiàng)目分子生物學(xué)檢測(cè)蛋白質(zhì)與免疫學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)時(shí)熒光定量PCR，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù)Western-blot實(shí)驗(yàn)服務(wù)，雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)，染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP），pullDown，過(guò)表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包腺相關(guān)病毒包裝純化肺炎大鼠模型肝炎-肝硬化-肝cancer模型蛋白芯片原代細(xì)胞培養(yǎng)肝纖維化模型細(xì)胞因子芯片骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)膽結(jié)石模型脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)急性胰腺炎模型生長(zhǎng)因子芯片心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)急性腎衰竭模型炎癥因子芯片軟骨細(xì)胞培養(yǎng)體內(nèi)血栓模型血管生成因子芯片血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)關(guān)節(jié)炎模型凋亡因子芯片神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)趨化因子芯片內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng)裸鼠成瘤動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù)細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)高通量測(cè)序代謝組學(xué)細(xì)胞原代培養(yǎng)mRNA測(cè)序LncRNA測(cè)序細(xì)胞凋亡檢測(cè)全基因組測(cè)序核磁共震NMR細(xì)胞周期檢測(cè)RNA-Seq測(cè)序細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)外顯子測(cè)序Trans。尿酸升高直接引起腸道屏障損傷。焦亡生物相關(guān)科研免費(fèi)設(shè)計(jì)
英拜的實(shí)驗(yàn)室坐落在上海漕河涇園區(qū)浦江園區(qū)。血清科研整體服務(wù)
2、HMH-exo增強(qiáng)低轉(zhuǎn)移性HCC細(xì)胞系的轉(zhuǎn)移潛力
為了探究HCC轉(zhuǎn)移時(shí)外泌體在細(xì)胞與細(xì)胞串?dāng)_中的可能作用，作者實(shí)驗(yàn)HMH-exo預(yù)處理低轉(zhuǎn)移性的HCC細(xì)胞系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與LMH-exo或者PBS預(yù)處理組相比，HMH-exo***增強(qiáng)了低轉(zhuǎn)移性HCC細(xì)胞系的轉(zhuǎn)移能力；隨后作者使用低轉(zhuǎn)移性HCC細(xì)胞系構(gòu)建了體內(nèi)原位異種移植瘤模型，成瘤后使用外泌體***6周，***檢測(cè)肝臟**和肺轉(zhuǎn)移，結(jié)果顯示與其它組相比，HMH-exo組的肝臟**更大，肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)更多。（圖2）。這些結(jié)果表明HMH-exo可以在體內(nèi)外增強(qiáng)低轉(zhuǎn)移性HCC細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。 血清科研整體服務(wù)
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過(guò)英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開放參觀，客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書申請(qǐng)：提供標(biāo)書課題設(shè)計(jì)、撰寫，標(biāo)書部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測(cè)序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過(guò)表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測(cè)，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)