6）上調UCP1減輕AKI中的脂質積累，可***緩解體內炎癥和凋亡
以上研究證實，在體外，上調UCP1可以通過抑制炎癥和凋亡來抑制AKI的進展。為了探究其在體內的作用，我們在腎多點注射模型中檢測了相應的指標。如圖6A-E所示，炎癥指標CD68、IL-1β、IL-6、TNF-α均***降低，UCP1上調。在凋亡方面，凋亡指標Bax和C-caspase3也隨著UCP1的上調而降低，而Bcl-2隨著UCP1的上調而升高(圖6F)。TUNEL熒光染色也直接證明了UCP1上調導致的凋亡減少(圖6G-H)。同樣，我們也使用UCP1激動劑CL316243在動物模型中證實了同樣的炎癥和凋亡趨勢(圖6I-P)。 課題外包服務找英拜放心安心。課題整包課題設計實驗
Nup62表達引起的Tbph的錯位和聚集也讓我們檢測了Nup62表達是否影響Tbph的溶解度。Nup62 OE或對照果蠅大腦的可溶性-不可溶性分選顯示，與對照相比，Nup62在運動神經(jīng)元中表達的上調***增加了不溶性，從而改變了Tbph的可溶性(圖4F和G)，表明Nup62水平是Tbph溶解度的重要決定因素。qPCR證實了Nup62的過表達(圖4H)。NUP62與內源性TDP-43共聚合(圖4I)。與單獨mRuby相比，NUP62在HEK293T細胞中的表達導致TDP-43的溶解性***改變(圖4J和K）。檢測了nup62介導的TDP-43聚集物在HEK293T細胞中是否被磷酸化。內源性與NUP62-mRuby共定位的TDP-43聚集體被磷酸化(圖4L)。HE染色課題課題設計上海英拜提供課題外包服務。
4）M1-BMDMs來源的外泌體在體內阻礙脊髓損傷后的運動功能恢復和破壞BSCB
為了進一步研究巨噬細胞在SCI微環(huán)境中的作用及其對血管內皮細胞的潛在影響，我們提取并鑒定了來自M1-BMDMs(M1-Exos)的外泌體。脊髓損傷后立即注射外泌體，在指定時間進行一系列行為評估(圖4A)。BMS行為分析表明，M1-Exos注射可導致脊髓損傷后后肢運動功能評分降低(圖4B)。足跡分析、電生理測試和游泳測試顯示了類似的結果，M1-Exos處理導致更短的步幅(圖4C)，更低的MEPs振幅(圖4D)，更傾斜的身體角度，更下垂的尾巴(圖4E)。EB外滲實驗顯示，M1-Exos處理組有更多EB染料滲漏到間隙中(圖4F)，TEM下血管TJs的電子密度遠低于PBS組，兩內皮細胞之間的間隙也更明顯(圖4G)。此外，注射M1-Exos后，脊髓病變中血管ZO-1的熒光強度***減弱(圖4H)；TJs蛋白表達水平也明顯下調(圖4I)。我們還發(fā)現(xiàn)，M1-Exos給藥后，病變區(qū)域更多的α-SMA與CD31共存(圖4J)；I型膠原、III型膠原和α-SMA蛋白水平上調，CD31表達降低(圖4K)。以上結果表明，M1-Exos可能誘發(fā)EndoMT加重脊髓損傷后BSCB的損傷，阻礙運動功能恢復。
EZH2在MB**組織中上調，是miR-101-3p的功能靶點，在MB**進展中作為*基因
**組織中EZH2mRNA相對表達量明顯高于*旁正常組織。我們還利用TargetScan數(shù)據(jù)庫研究了miR-101-3p在EZH23'UTR中是否存在匹配位點，并采用雙熒光素酶報告基因檢測證實了miR-101-3p與EZH2表達水平的相關性。轉染miR-101-3pmimic降低了由野生型EZH23’UTR驅動的熒光素酶活性，而轉染突變型后未見***變化。瞬時轉染miR-101-3p也降低了在Daoy細胞中EZH2的mRNA和蛋白水平。接下來，為了研究EZH2在MB中的功能，我們使用siRNA下調其在Daoy細胞中的表達。功能檢測顯示，EZH2的下調抑制MB細胞活力、遷移和侵襲，同時促進MB細胞凋亡。綜上所述，這些結果表明miR-101-3p可以直接靶向EZH2和FOXP4抑制MB。 Pex衍生的CD44v6/C1QBP復合物介導了Pex對肝纖維化和PDAC肝轉移的積極作用。
其次，采用UPGMA、PCoA和NMDS評估不同群體的腸道菌群β-多樣性。UPGMA聚類方法將對照組和PCOS大鼠樣本分為兩組，表明PCOS大鼠和對照組的腸道微生物分布不同。雖然DHEA + tempol組不能完全與DHEA + PBS組分離，但與DHEA + PBS組有所不同，說明給藥tempol影響了PCOS大鼠的腸道微生物分布(圖4G)。PCoA和NMDS分析進一步顯示，三組大鼠腸道總體微生物組成不同(圖4H-I)，而Permanova/ Anosim分析表明，三組間差異***(圖4J)。上述結果表明，DHEA和tempol處理可影響腸道微生物的β-多樣性。我們接下來研究了Pex對HSCs生物學行為的影響。星形膠質細胞課題基礎實驗外包
根據(jù)自身需要檢索相關基因或者化學品。課題整包課題設計實驗
此蛋白酶體抑制劑MG132的作用減弱了circPLCE1-411對RPS3蛋白水平的影響。circPLCE1過表達的細胞中RPS3泛素化水平升高。相反，circPLCE1敲低后，RPS3的泛素化水平降低。接下來，我們用相同濃度的HA-HSP90α、HisRPS3和Myc-HSP70質粒轉染HEK293T細胞，但增加Flag-circPLCE1質粒的濃度用于后續(xù)的免疫沉淀實驗。結果表明，隨著circPLCE1-411表達量的增加，RPS3與HSP90α的互作性降低，而與HSP70的互作性增加。為了鑒定HSP90α與RPS3和circPLCE1-411相互作用的結構域，我們生成了HSP90α截斷突變體，發(fā)現(xiàn)RPS3和circPLCE1-411的相互作用依賴于HSP90α的N端。課題整包課題設計實驗
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