越來(lái)越多的證據(jù)表明**相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)和外泌體在轉(zhuǎn)移前niche(生態(tài)位)形成中發(fā)揮重要作用。TAMs是轉(zhuǎn)移前生態(tài)位形成和結(jié)直腸*肝轉(zhuǎn)移(CRLM)的基礎(chǔ)。然而,**來(lái)源的外泌體miRNAs與TAMs相互作用的分子機(jī)制仍然很大程度上未知。本研究發(fā)現(xiàn)**來(lái)源外泌體miR-934可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞M2極化,進(jìn)而促進(jìn)CRC的肝轉(zhuǎn)移。該文于2020年11月發(fā)表在《Journal of Hematology and Oncology》IF:11.059期刊上。
1、miR-934表達(dá)升高與CRLM進(jìn)展及預(yù)后不良呈正相關(guān)
為了揭示參與CRLM的miRNA,作者基于TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)比較了CRC的1期**和4期**的miRNA表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn)miR-934是在4期**中高表達(dá)差異表達(dá)*****的miRNA(Fig.1a,b)。此外,作者將110個(gè)CRC組織按有無(wú)肝轉(zhuǎn)移分為兩組,發(fā)現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移組與未轉(zhuǎn)移組相比,組織和血清miR-934表達(dá)上調(diào)(Fig.1c,d)。接下來(lái),為了研究miR-934在CRLM進(jìn)展中的作用,使用ISH比較了miR-934在包含308個(gè)CRC樣本的組織芯片(TMA)中的表達(dá),與正常粘膜組織相比,CRC組織中miR-934的表達(dá)明顯上調(diào);miR-934表達(dá)增加與T分期、M分期、晚期A(yíng)JCC分期和**復(fù)發(fā)呈正相關(guān),尤其是在肝轉(zhuǎn)移的病例中(Fig.1e)。
Pex衍生的CD44v6/C1QBP復(fù)合物介導(dǎo)了Pex對(duì)肝纖維化和PDAC肝轉(zhuǎn)移的積極作用。甘肅課題動(dòng)物模型構(gòu)建
1)SsD在A(yíng)ML中表現(xiàn)出抗增殖活性
為了闡明SsD在白血病中的藥理作用,我們?cè)?0個(gè)人白血病細(xì)胞系中探討了一系列SsD濃度的影響。我們發(fā)現(xiàn)SsD在大多數(shù)白血病細(xì)胞系中以劑量依賴(lài)的方式抑制細(xì)胞活力(圖1A)。為了進(jìn)一步研究SsD對(duì)白血病的抑制作用,我們?cè)?種白血病細(xì)胞系NB4、kas1、MV4-11和U937(SsD敏感性排名前4位的細(xì)胞)進(jìn)行了集落實(shí)驗(yàn)。與細(xì)胞活力結(jié)果相似,SsD***抑制了所測(cè)細(xì)胞系的集落數(shù)量和大小(圖1B-E)。有趣的是,SsD對(duì)細(xì)胞增殖和活力的抑制可能是由于細(xì)胞周期阻滯在G1期和NB4細(xì)胞凋亡增加(圖1F-G)。 山西課題細(xì)胞實(shí)驗(yàn)將 CTD 暴露與 CTD 解剖學(xué)相結(jié)合使環(huán)境健康科學(xué)家能夠調(diào)查暴露研究和組織和系統(tǒng)暴露化學(xué)應(yīng)激誘導(dǎo)表型的細(xì)節(jié)。
2021年5月,在Elife 雜志上發(fā)表了文章“Traumatic injury compromises nucleocytoplasmic transport and leads to TDP-43 pathology.”。此報(bào)道在體內(nèi),反復(fù)的創(chuàng)傷會(huì)上調(diào)核孔蛋白,改變核孔蛋白的穩(wěn)定性,改變NCT蛋白,改變Ran***1和核孔蛋白的分布,改變NCT。此外,核輸出的藥理抑制可以防止tbi介導(dǎo)的致命性和NCT缺陷。有趣的是,在體內(nèi)和體外,核孔蛋白的上調(diào)導(dǎo)致TDP-43定位錯(cuò)誤、聚集、磷酸化和溶解性改變,并降低運(yùn)動(dòng)功能和壽命。對(duì)NUP62病理和CTE患者腦組織中NUP62濃度升高的研究結(jié)果表明NCT缺陷與創(chuàng)傷損傷有關(guān),這可能介導(dǎo)了TDP-43的病理變化。
WTAP介導(dǎo)的HK2調(diào)控依賴(lài)于其m6A甲基化酶活性
m6A閱讀器IGF2BP2識(shí)別WTAP轉(zhuǎn)錄本中的m6A位點(diǎn),以促進(jìn)其穩(wěn)定性。qPCR結(jié)果顯示,IGF2BP2缺陷細(xì)胞中HK2的轉(zhuǎn)錄水平***降低(圖6A),mRNA穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)顯示HK2在IGF2BP2缺陷細(xì)胞中趨于不穩(wěn)定(圖6B)。pGL3-HK2-WT載體的熒光素酶活性通過(guò)抑制IGF2BP2而降低,而pGL3-HK2-MUT載體的熒光素酶活性則消失(圖6C)。因此,IGF2BP2與WTAP共同作用,影響DLBCL細(xì)胞中HK2mRNA的穩(wěn)定性和表達(dá)。此外,考慮到piRNA-30473在**發(fā)生和疾病進(jìn)展中的功能重要性,利用選擇性抑制劑靶向piRNA-30473/WTAP/HK2軸可能是***DLBCL的一種有前景的***策略(圖6D)。
結(jié)論:作者證明了piRNA-30473通過(guò)調(diào)節(jié)m6ARNA甲基化,從而觸發(fā)下游信號(hào)級(jí)聯(lián)而促進(jìn)DLBCL的**發(fā)生和不良預(yù)后。該研究強(qiáng)調(diào)了m6A修飾機(jī)制在DLBCL中的功能重要性,并通過(guò)揭示一個(gè)之前未被發(fā)現(xiàn)的DLBCL基因調(diào)控機(jī)制,為**發(fā)生的表觀(guān)遺傳機(jī)制提供了深刻的見(jiàn)解。 提供整體課題外包實(shí)驗(yàn)構(gòu)思。
2、MAO-A直接調(diào)節(jié)TAM極化并影響TAM相關(guān)的T細(xì)胞抗**活性
為了確定MAO-A是否直接調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞,進(jìn)行一個(gè)骨髓(BM)轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),從MaoaWT或KO小鼠中獲得的BM細(xì)胞被連續(xù)轉(zhuǎn)移到BoyJ(CD45.1)WT受體小鼠中,然后該小鼠接受B16-OVA黑色素瘤細(xì)胞接種(圖2a)。在本實(shí)驗(yàn)中,MAO-A缺乏的比較***于免疫細(xì)胞。結(jié)果顯示免疫細(xì)胞中MAO-A缺陷導(dǎo)致**生長(zhǎng)抑制(圖2b-c),改變TAM極化(圖2d-f),增強(qiáng)**浸潤(rùn)C(jī)D8+T細(xì)胞***,表明MAO-A直接調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞抗**活性,特別是TAM極化和T細(xì)胞抗**反應(yīng)。 按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)路線(xiàn)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行文章的構(gòu)思與潤(rùn)色。福建課題服務(wù)兩年
阻斷atm依賴(lài)的磷酸化會(huì)損害DNA損傷后PTEN的亞細(xì)胞再分配甘肅課題動(dòng)物模型構(gòu)建
circACTN4 增加遷移和侵襲并調(diào)節(jié) BC 細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程
為了進(jìn)一步評(píng)估 circACTN4在BC進(jìn)展中的作用,在 circACTN4 過(guò)表達(dá)或敲低后研究了 BC 細(xì)胞的遷移、侵襲和細(xì)胞周期。劃痕和transwell試驗(yàn)表明,BC細(xì)胞的侵襲和遷移能力因 circACTN4 的上調(diào)而顯著增加,但被 circACTN4 的下調(diào)顯著抑制。WB結(jié)果發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)或敲低BC細(xì)胞中MMP9和MMP2蛋白水平明顯升高或降低,nm23-H1表達(dá)明顯降低或升高。式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期分析,結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,circACTN4的敲低導(dǎo)致S期BC細(xì)胞比例較低,G1期BC細(xì)胞比例較高,這表明circACTN4沉默導(dǎo)致G1期阻滯BC 細(xì)胞。此外,WB顯示BC 細(xì)胞中敲低 circACTN4 后,CDK4、CCNE1 和 CCND1 蛋白水平顯著下調(diào),這可能阻止了 BC 細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程。 甘肅課題動(dòng)物模型構(gòu)建
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ),利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段,通過(guò)英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái),提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫(xiě)SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開(kāi)發(fā)區(qū)浦江園區(qū),實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開(kāi)放參觀(guān),客戶(hù)可隨時(shí)參觀(guān)實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度,保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù):RNA甲基化研究專(zhuān)題,外泌體研究專(zhuān)題,wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究,設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性,為您的標(biāo)書(shū)奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書(shū)申請(qǐng):提供標(biāo)書(shū)課題設(shè)計(jì)、撰寫(xiě),標(biāo)書(shū)部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展,設(shè)計(jì)的標(biāo)書(shū)均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn),中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持,探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究:trfRNA,DNA/RNA甲基化,外泌體,自噬,WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序:轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片:信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀(guān)遺傳實(shí)驗(yàn):DNA甲基化實(shí)驗(yàn)(BSP,MSP,焦磷酸測(cè)序),RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR(mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA),WB,RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證,過(guò)表達(dá),干擾),基因突變及SNP檢測(cè),F(xiàn)ISH,RNA-PULLdown,rip,chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖,凋亡,流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)