Human Cancer LncRNA PCR 芯片
簡介英拜CancerLncRNAPCR芯片可檢測180個(gè)已報(bào)道的與人多種**相關(guān)的金標(biāo)準(zhǔn)lncRNA，為研究人員探索**中LncRNA的功能、生物標(biāo)志物及***靶點(diǎn)潛力提供了一個(gè)信息豐富、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、操作簡單的解決方案。
HumanCancerLncRNAPCRArrayYB-001-1192-well/plate包含180個(gè)與人多種**緊密關(guān)聯(lián)的已知功能lncRNA轉(zhuǎn)錄本
?***收集已知的與**明確相關(guān)的明星LncRNA分子。?lncRNA都經(jīng)過詳細(xì)分類、注釋。?收錄了經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的lncRNA的生物學(xué)功能和調(diào)控機(jī)制。?所有引物均經(jīng)過多種樣品類型的驗(yàn)證，充分滿足生物標(biāo)記物鑒定的需要。?轉(zhuǎn)錄本特異性PCR引物可以明確且準(zhǔn)確地檢測每個(gè)LncRNA異構(gòu)體。 細(xì)胞轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備將含目的microRNA靶基因的報(bào)告基因載體、內(nèi)參質(zhì)粒和microRNAmimics或|共轉(zhuǎn)染293T或Hela細(xì)胞。常規(guī)技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)外包
人原代細(xì)胞分離技術(shù)：
成纖維細(xì)胞是來源于中胚層的一種間充質(zhì)細(xì)胞。它被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和分子的研究。這主要是因?yàn)橐驗(yàn)樗且环N較容易培養(yǎng)的，耐受性較好的細(xì)胞,因具有些特性,成纖維細(xì)胞可應(yīng)用于從基因轉(zhuǎn)染到顯微注射等多種操作。血管動(dòng)脈外膜的成纖維細(xì)胞，位于血管**外層的結(jié)締組織,在血管損傷修復(fù)中起重要作用。它們具有瞬時(shí)的形態(tài)變化和增殖能力,并促進(jìn)動(dòng)脈外膜中細(xì)胞外基質(zhì)的聚集。這種變化在病理狀態(tài)下血管壁重塑中起著重要作用,這也預(yù)示著通過血管外膜成纖維細(xì)胞來進(jìn)行特定位置的血管壁基因***以調(diào)節(jié)血管緊張度方面有巨大潛力。HBVAF分離自人大腦組織，原代凍存,冰凍運(yùn)輸。每管細(xì)胞密度超過5x105/ml。細(xì)胞呈紡錘型,經(jīng)Fibronectin免疫熒光鑒定。本細(xì)胞經(jīng)檢測不含HIV-1、HBV.HCV.支原體、細(xì)菌、酵母螢和***。如采用ScienCell實(shí)驗(yàn)室特制的培養(yǎng)基,可保證此細(xì)胞達(dá)到15次或以上的倍增。 常規(guī)技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)外包b。用甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳。檢測RNA純度和完整性。
專業(yè)提供分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù):高通量測序：人全基因組重測序、外顯子測序、宏基因組測序、RNA-seq、miRNA-seq、lncRNA-seq、單細(xì)胞測序、CHIP-seq；DNA水平：SNP檢測、甲基化檢測、CHIP；RNA水平：、功能分類PCR芯片、表達(dá)譜基因芯片、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、原位雜交；蛋白水平：WB、抗體芯片、免疫組化、免疫熒光；報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染、干擾及過表達(dá)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲；生物信息學(xué)：芯片數(shù)據(jù)分析、高通量測序分析、個(gè)化分析方案；SCI協(xié)同服務(wù)：限量實(shí)驗(yàn)整體外包服務(wù)（IF1-10）,SCI評估、潤色、翻譯、調(diào)整等服務(wù)。
英拜生物microRNA報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)流程：
靶點(diǎn)的預(yù)測利用Targetscan,miRanda,PicTar軟件得到目的microRNA的預(yù)測靶點(diǎn)序列。
2.獲得microRNA靶點(diǎn)序列根據(jù)提供的靶序列，合成兩條互補(bǔ)的單鏈DNA模板?；蛘?，設(shè)計(jì)引物PCR擴(kuò)增microRNA靶基因序列(lncRNA,circRNA全長序列或靶標(biāo)序列)。
靶序列克隆將合成的兩條單鏈退火成雙鏈（具有粘性末端），或?qū)CR產(chǎn)物雙酶切，后連入經(jīng)過同樣雙酶切的Psicheck-2載體中，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α。
4.陽性克隆鑒定。挑選轉(zhuǎn)化的菌落，PCR篩選含有插入片段的陽性克隆，測序驗(yàn)證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.細(xì)胞轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備將psicheck-2報(bào)告基因載體、microRNAmimics或microRNAnegativecontrol共轉(zhuǎn)染293T或Hela細(xì)胞。
6.熒光素酶檢測報(bào)告基因載體與microRNAmimics或microRNAnegativecontrol共轉(zhuǎn)染293T或Hela細(xì)胞24-72h后，進(jìn)行雙熒光素酶檢測，確定目的microRNA的靶基因。
7.整理分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論。提供有microRNA靶序列的報(bào)告基因質(zhì)粒、甘油保存菌株各一支。附實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括載體構(gòu)建過程，鑒定記錄，測序報(bào)告，細(xì)胞轉(zhuǎn)染，熒光檢測。 免疫組化技術(shù)服務(wù)利用了抗原與抗體特異性結(jié)合的原理。
英拜生物microRNA實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)服務(wù)流程如下：
引物設(shè)計(jì)、合成設(shè)計(jì)并合成目的microRNA的莖環(huán)RT引物、PCR引物。
樣品RNA抽提a．組織樣品：取適量（50～100mg）新鮮組織或正確保存的組織樣品，勻漿后抽提RNA。b．細(xì)胞樣品：取1×106～1×107細(xì)胞，吸去培養(yǎng)液后用TRIZOL試劑抽提RNA。
RNA質(zhì)量檢測a．紫外吸收測定法測定RNA在波長260nm和280nm的吸收值，獲得RNA的濃度并通過A260/280及A260/230的吸收比值判斷RNA的純度。b．用甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳，檢測RNA純度和完整性。
注：用于microRNA實(shí)時(shí)定量PCR檢測的RNA樣品，必須高純度、完整，沒有RNase污染（降解的樣品不能用于實(shí)時(shí)定量PCR檢測），同時(shí)提取方法必須保證所得樣品包含完整的小RNA部分。逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA利用莖環(huán)引物逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA***鏈。實(shí)時(shí)定量PCR以合成的cDNA作為模板進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增（同時(shí)測定每個(gè)樣品中U6snRNA含量作為內(nèi)參以校正上樣誤差）。分析結(jié)果、提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告分析實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量樣品中的目的microRNA。提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法，實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和圖表。 英拜生物microRNA實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)服務(wù)流程:引物設(shè)計(jì)、合成設(shè)計(jì)并合成目的microRNA的莖環(huán)RT引物、PCR引物。安徽技術(shù)服務(wù)動(dòng)物模型構(gòu)建
另外,還提供短片段的測 序服務(wù)( 50-100bp)。 適用于細(xì)菌和病毒分型等研究領(lǐng)域。常規(guī)技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)外包
2.1標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)流程1)客戶溝通,確認(rèn)實(shí)驗(yàn)位點(diǎn),并進(jìn)行相關(guān)分析,提示實(shí)驗(yàn)可行性。2)建立實(shí)驗(yàn)方案,并在此過程中和客戶保持密切溝通。3)大規(guī)模實(shí)驗(yàn),有嚴(yán)格的指控流程保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。4)補(bǔ)數(shù)據(jù),盡可能提高樣本的使用率。2.2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)質(zhì)量控制流程1)所有分型信號(hào)要求信號(hào)清晰***,排除不確定信號(hào)干擾。2)每板數(shù)據(jù)中都有陰性對照,質(zhì)控PCR和LDR污染數(shù)據(jù)。3)整個(gè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程有15%的雙盲重復(fù)對照,保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。4)利用HWE原理進(jìn)行數(shù)據(jù)評估。常規(guī)技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)外包
公司特色是以各式高通量二代測序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開放參觀，客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書申請：提供標(biāo)書課題設(shè)計(jì)、撰寫，標(biāo)書部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測序：轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)