在基礎(chǔ)條件下，F(xiàn)th-KO小鼠皮層中鐵穩(wěn)態(tài)輕度受損
使用蛋白質(zhì)印跡分析，實時PCR和Fth免疫熒光證實了在基礎(chǔ)條件下神經(jīng)元Fth表達(dá)的喪失。Fth-KO小鼠的FTHmRNA和蛋白表達(dá)較低。我們還通過免疫熒光觀察了Fth的神經(jīng)元水平。從他莫昔芬處理的皮層神經(jīng)元Fth-KO小鼠具有減少的免疫原性FTH的。重要的是，在神經(jīng)元中觀察到幾乎罕見FTH陽性細(xì)胞Fth-KO小鼠。有趣的是，神經(jīng)元中Fth的喪失并未導(dǎo)致Ftl表達(dá)的代償性增加。接下來，檢查了神經(jīng)元Fth在鐵代謝和氧化還原穩(wěn)態(tài)中的假定作用。Fth-KO組與對照組相比，皮質(zhì)Fe2+，F(xiàn)e3+，總鐵水平***增加。Perls的藍(lán)色染色顯示在生理條件下，在Fth-KO中觀察到的鐵陽性細(xì)胞相對較少。這些結(jié)果表明，F(xiàn)th-KO小鼠具有活力和繁殖力，但鐵代謝發(fā)生了改變，這提供了神經(jīng)元鐵蛋白的鐵存儲功能在維持皮質(zhì)鐵穩(wěn)態(tài)基礎(chǔ)條件中起重要作用的證據(jù)。 Pex衍生的CD44v6/C1QBP復(fù)合物介導(dǎo)了Pex對肝纖維化和PDAC肝轉(zhuǎn)移的積極作用。標(biāo)書課題CRO
8.過表達(dá)Caspase-11加重MCD誘導(dǎo)的小鼠肝脂肪變性
由于缺乏Caspase-11減弱MCD誘導(dǎo)的肝脂肪變性，我們檢測肝臟中Caspase-11過表達(dá)對MCD誘導(dǎo)的肝脂肪變性的影響。我們在Alb-Cre小鼠肝細(xì)胞中過表達(dá)Caspase-11(圖8A)。正常情況下，對照組和過表達(dá)Caspase11的小鼠肝臟組織學(xué)形態(tài)正常。MCD處理導(dǎo)致對照和過表達(dá)Caspase11的小鼠肝臟出現(xiàn)明顯的脂質(zhì)積聚(空泡)。此外，過表達(dá)caspase-11的小鼠肝臟中的空泡比對照小鼠肝臟中的大且多(圖8B)。相應(yīng)的，與MCD處理的對照組相比，過表達(dá)Caspase-11的小鼠脂肪變性評分(圖8C)和膨脹評分(圖8D)***升高。類似地，與對照組小鼠相比，MCD處理的caspase-11過表達(dá)的的小鼠血清中ALT(圖8E)、AST(圖8F)和肝臟甘油三酯(圖8G)升高。 鐵死亡課題整體服務(wù)Pex調(diào)節(jié)HSC的ECM分泌。
5）Pex衍生的CD44v6/C1QBP復(fù)合物介導(dǎo)了Pex對肝纖維化和PDAC肝轉(zhuǎn)移的積極作用
此前，我們發(fā)現(xiàn)IGF-1可以通過誘導(dǎo)補體C1q結(jié)合蛋白(C1QBP)從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)位到膜上，驅(qū)動CD44v6/C1QBP復(fù)合物的形成，從而***IGF-1下游通路。因此，我們很想知道C1QBP是否通過CD44v6相互作用參與Pex誘導(dǎo)的HSC活化。我們的結(jié)果表明C1QBP在Pex中的表達(dá)明顯高于Npex(圖6A)。如圖6B所示，C1QBP在Pex孵育的HSCs中表達(dá)高于Npex組。同時，與Pex處理的細(xì)胞相比，C1QBP-kdPex處理HSCs后C1QBP蛋白水平***降低(圖6B)。與Pex轉(zhuǎn)移的CD44v6在HSCs中的位置一致，膜中也檢測到C1QBP，并與Pan-cadherin共定位(圖6C)。這些數(shù)據(jù)表明，C1QBP可以通過Pex傳遞到HSCs膜。免疫電鏡顯示CD44v6和C1QBP在Pex***表達(dá)(圖6D)。同時過表達(dá)CD44v6和C1QBP后，Co-IP檢測顯示CD44v6和C1QBP在Pex中相互作用(圖6E)。此外，通過近距離連接(圖6F)和免疫熒光分析(圖6G)，我們發(fā)現(xiàn)了CD44v6和C1QBP在Pex孵化的HSCs膜上的結(jié)合。這些發(fā)現(xiàn)表明，CD44v6在傳遞外泌體CD44v6/C1QBP復(fù)合物中起重要作用。
3.YTHDC2抑制LUAD的胱氨酸攝取和下游抗氧化程序
為了研究YTHDC2對代謝物的影響，作者對YTHDC2低表達(dá)和高表達(dá)的LUAD標(biāo)本(分別稱為YTHDC2low和YTHDC2high)進(jìn)行代謝組學(xué)分析(n=20/組)。如圖3A顯示，GSH代謝在KEGG通路中排名前20。在***改變的代謝產(chǎn)物中，與YTHDC2high的**相比，YTHDC2low的**中胱氨酸含量增加了3.975倍(圖3B)。此外，在cohort#1(n=100)中，YTHDC2和胞內(nèi)胱氨酸呈負(fù)相關(guān)(圖3C)。這些數(shù)據(jù)表明YTHDC2減少了細(xì)胞內(nèi)的胱氨酸。 致力于醫(yī)學(xué)相關(guān)領(lǐng)域的實驗技術(shù)服務(wù)和相關(guān)生物醫(yī)學(xué)課題的研究。
miR-144在鼻咽*組織和細(xì)胞中上調(diào)
先前的文獻(xiàn)強調(diào)了miR-144在NPC發(fā)展過程中的促*作用。我們首先確定miR-144在NPC中的表達(dá)模式。采用qRT-PCR方法分析95例鼻咽*活檢標(biāo)本和95例慢性鼻咽炎鼻咽活檢標(biāo)本中miR-144的表達(dá)。結(jié)果表明，miR-144在鼻咽*組織中的表達(dá)水平高于在非*性鼻咽組織中的表達(dá)水平(圖1A)，并通過原位雜交(ISH)進(jìn)一步驗證(圖1B)。如圖1C所示，相對于非*性鼻咽組織，鼻咽*組織中CD31的免疫組化染色增強。在鼻咽*組織中，CD31的表達(dá)與miR-144的表達(dá)呈正相關(guān)(圖1D)。隨后，我們通過qRT-PCR比較了人鼻咽*細(xì)胞系(C666-1和SUNE1)和鼻咽上皮細(xì)胞系NP69之間miR-144的表達(dá)水平。與預(yù)期的一樣，C666-1和SUNE1細(xì)胞表現(xiàn)出相對于NP69更高水平的miR-144表達(dá)(圖1E)。以上結(jié)果提示，miR144在鼻咽*組織和細(xì)胞中呈高表達(dá)，與CD31表達(dá)呈正相關(guān)，表明miR144與**血管生成具有潛在的相關(guān)性。 高通量分子實驗的后續(xù)標(biāo)書申請指導(dǎo)服務(wù)。CRO課題實驗檢測服務(wù)
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FOXP4是miR-101-3p和miR-423-5p的靶點
為了進(jìn)一步了解miR-101-3p和miR-423-5p如何影響**進(jìn)展，我們使用TargetScan和RNA22預(yù)測工具確定了它們的潛在靶點。我們選擇了6個在兩個數(shù)據(jù)庫中均被miRNA調(diào)控的基因作為潛在靶點進(jìn)行評估，分別是FOXP4、PLCB1、ANKRD52、ANGPTL2、DL***3、a和DCUN1D3(圖4A)。由于FOXP4已知在胚胎發(fā)育和**發(fā)生中有作用，因此選擇該基因進(jìn)行進(jìn)一步研究。經(jīng)westernblotting檢測，轉(zhuǎn)染miR-101-3p或miR-423-5p的Daoy細(xì)胞顯示內(nèi)源性FOXP4蛋白表達(dá)降低。此外，HEK293T細(xì)胞中的熒光素酶報告基因檢測顯示，這兩種miRNA的過表達(dá)均***抑制FOXP4-3'UTR驅(qū)動的熒光素酶活性。然而，miR-101-3p或miR-423-5p與FOXP43'UTR共轉(zhuǎn)染后，熒光素酶活性未見***變化。這表明FOXP4可能是MB中miR-101-3p和miR423-5p的直接和功能靶點。 標(biāo)書課題CRO
公司特色是以各式高通量二代測序為基礎(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實驗平臺，提供課題整體設(shè)計外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實驗平臺落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實驗平臺開放參觀，客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進(jìn)度，保證您的實驗是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計的課題均具有后續(xù)實驗課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
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4.二代測序：轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片：信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗：DNA甲基化實驗（BSP,MSP，焦磷酸測序），RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗證實驗(靶基因驗證，過表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實驗以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實驗