此外，為進(jìn)一步驗(yàn)證ELNAT1與hnRNPA1相互作用區(qū)域，使用ELNAT1不同序列缺失進(jìn)行RNA-pull down分析，以評(píng)估ELNAT1和hnRNPA1結(jié)合所需的區(qū)域。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ELNAT1序列中600-750 nt位置是其與hnRNPA1交互作用區(qū)域（Figure 4 G, H）。并通過(guò)POSTAR2預(yù)測(cè)ELNAT1在610-680 nt區(qū)域的莖環(huán)結(jié)構(gòu)可能被hnRNPA1識(shí)別（Figure 4 I），而當(dāng)這一區(qū)域缺失時(shí)，hnRNPA1減弱對(duì)ELNAT1的富集（Figure 4 J）。因此，這表明這些特定的序列（610-680 nt）對(duì)ELNAT1 hnRNPA1的相互作用至關(guān)重要。
糖尿病腎病(DN)已成為終末期腎病的主要病因之一，自噬障礙與DN的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)維生素D (VD)和VDR(維生素D受體)通過(guò)抑制炎癥和纖維化發(fā)揮腎保護(hù)作用。然而，VD-VDR是否調(diào)節(jié)DN患者的自噬障礙尚不清楚。在本研究中，我們建立了鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的VDR敲除(VDR-KO)小鼠和VDR特異性過(guò)表達(dá)(VDR-OE)小鼠的糖尿病模型。結(jié)果表明，paricalcitol(一種***的維生素D類似物)或VDR-OE均能減輕STZ誘導(dǎo)的白蛋白排泄、腎小管損傷和炎癥，而VDR-KO小鼠的這些癥狀均加重。轉(zhuǎn)錄組科研國(guó)家自然科學(xué)基金文章使用FMT(糞微生態(tài)移植)來(lái)確定大黃酸改變的腸道菌群是否對(duì)結(jié)腸炎有療效。
APCmRNA上的METTL3依賴性m6A上調(diào)抑制APC表達(dá)
為了確定METTL3依賴的m6A調(diào)控對(duì)APC表達(dá)的影響，構(gòu)建了一個(gè)熒光素酶報(bào)告基因，熒光素酶分析顯示，METTL3缺失**增加了WTAPC的熒光素酶活性，而突變的APC提高了熒光素酶活性并使該活性抵抗METTL3缺失的調(diào)節(jié)。相反，METTL3過(guò)表達(dá)抑制了WT-APC的熒光素酶活性，但沒(méi)有突變的APC。這些結(jié)果表明METTL3介導(dǎo)的m6A水平的APCmRNA上調(diào)抑制了APC的表達(dá)。
與這一發(fā)現(xiàn)一致，METTL3缺失增加了APCmRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)（，并且這些增加被KYSE450細(xì)胞中rMETTL3的重組表達(dá)所消除。此外，METTL3的過(guò)表達(dá)降低了KYSE450細(xì)胞中APC的表達(dá)，四環(huán)素劑量依賴性增加的METTL3表達(dá)水平與APC水平呈負(fù)相關(guān)。相反，METTL3非活性突變體與WT對(duì)應(yīng)物不同，未能調(diào)節(jié)APC表達(dá)。值得注意的是，ESCC細(xì)胞中的METTL14缺失消除了METTL3的過(guò)度表達(dá)降低了APC的表達(dá)。這些結(jié)果表明，在ESCC細(xì)胞中，METTL3與METTL14共同介導(dǎo)的APCmRNAm6A上調(diào)抑制了APCmRNA和蛋白的表達(dá)。
5）過(guò)表達(dá)miR-337-3p和miR-137抑制子宮內(nèi)膜*細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為
為了研究miR-337-3p和miR-137在子宮內(nèi)膜*生物學(xué)行為中的可能作用，我們分別用agomir-337-3p/137和antagomir-3373p/137轉(zhuǎn)染Ishikawa和HEC-1A細(xì)胞。使用CCK-8和EdU檢測(cè)細(xì)胞增殖(圖5A和5B)。傷口愈合和Transwell檢測(cè)分別用于評(píng)估細(xì)胞遷移和侵襲。過(guò)表達(dá)miR-33373p和miR-137降低了Ishikawa和HEC-1A細(xì)胞的遷移和侵襲能力(圖5C和5D)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)并分析細(xì)胞周期分布(圖5E)。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，與miR-NC組相比，miR-337-3p和miR-137過(guò)表達(dá)***抑制了細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移。 評(píng)估了成對(duì)*組織和鄰近組織樣本中**重要的m6A調(diào)節(jié)因子（METTL3、METTL14和WTAP）的表達(dá)。
Il4ra缺陷小鼠的M2 樣巨噬細(xì)胞減少和再生失調(diào)
為了探索再生過(guò)程中胰腺巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)機(jī)制，我們進(jìn)行了基因集富集分析 (GSEA) 以比較第 3 天和第 1 天巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組譜。巨噬細(xì)胞的 M2 ***和 IL4 刺激特征從第 3 天開始富含巨噬細(xì)胞。我們發(fā)現(xiàn)，表達(dá)IL-4和IL-13分別提高在第1天，和表達(dá)Il4ra自第1天升高，達(dá)到峰值在第3天。為了進(jìn)一步確定受體和配體的細(xì)胞來(lái)源，在 AP 損傷后***從胰腺中分離并比較了 CD45.2 +和 CD45.2 -細(xì)胞，有趣的是，Il4ra1被顯性免疫細(xì)胞上表達(dá)（CD45.2 +），而IL4和IL13中主要表達(dá)于實(shí)質(zhì)細(xì)胞（CD45.2 - ）。此外，通過(guò)使用Il4ra 缺陷小鼠，我們證明了 IL4Rα 信號(hào)在 AP 損傷后胰腺修復(fù)/再生過(guò)程中介導(dǎo)了 M2 巨噬細(xì)胞的極化。值得注意的是，與它們的對(duì)應(yīng)物相比，來(lái)自Il4ra -/-小鼠的胰腺在第 3 天和第 5 天具有更多的 ADM 結(jié)構(gòu)?？偟膩?lái)說(shuō)，這些發(fā)現(xiàn)表明 IL4/IL4Rα 軸是 AP 恢復(fù)過(guò)程中胰腺巨噬細(xì)胞 M2 極化所必需的，發(fā)揮***功能來(lái)控制 ADM 形成的程度。 英拜潤(rùn)色的標(biāo)書的中標(biāo)率**提高。成都人星形膠質(zhì)細(xì)胞科研
這些數(shù)據(jù)表明大黃酸***可以消除尿酸引起的腸道通透性增強(qiáng)。細(xì)胞發(fā)育與分化科研整體服務(wù)
ChIP分析結(jié)果表明，高濃度si-circ#2轉(zhuǎn)染后FIR和FUSE的結(jié)合水平高于低濃度si-circ#2轉(zhuǎn)染后FIR和FUSE的結(jié)合水平。此外，沉默 FIR 顯著增強(qiáng)了 MYC 的表達(dá)，而過(guò)表達(dá) FIR 通過(guò) qRT-PCR 和 BC 細(xì)胞中的蛋白質(zhì)印跡降低了 MYC 的水平。OE-FIR 或 sh-FIR 與 circACTN4 或 si-circ#2 共轉(zhuǎn)染后，我們發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá) FIR 可以逆轉(zhuǎn) circACTN4 對(duì) MYC 表達(dá)的增強(qiáng)作用，而 FIR 敲低可以抵消下調(diào)的抑制作用qRT-PCR 在 MYC 水平上檢測(cè)到 circACTN4?？傊?，這些結(jié)果表明circACTN4可以抑制FIR和FUBP1的結(jié)合以減輕FIR的抑制作用，從而促進(jìn)MYC轉(zhuǎn)錄。細(xì)胞發(fā)育與分化科研整體服務(wù)
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過(guò)英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開放參觀，客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書申請(qǐng)：提供標(biāo)書課題設(shè)計(jì)、撰寫，標(biāo)書部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測(cè)序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過(guò)表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測(cè)，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)