雄***和雄***受體(AR)是******轉(zhuǎn)錄因子(TF)，是驅(qū)動(dòng)前列腺*(PCa)發(fā)***展的關(guān)鍵因素。因此AR是晚期PCa******的主要分子靶點(diǎn)。雄***剝奪療法，特別是第二代抗雄***和雄***合成抑制劑**初是有效的。然而，由于患者仍然可以從晚期PCa進(jìn)展到致命性去勢(shì)抗性前列腺*(CRPC)，需要新的***靶點(diǎn)和生物標(biāo)志物。靶蛋白的一個(gè)來源可能是ar相關(guān)的染色質(zhì)蛋白。大多數(shù)目前已知的核受體(NR)相互作用蛋白，包括那些AR，已經(jīng)通過遺傳篩選，如雙雜交系統(tǒng)，免疫共沉淀和基于肽段的體外方法。盡管親和純化-質(zhì)譜耦合(MS)已經(jīng)啟發(fā)了NRs的輔助調(diào)節(jié)器，但它很少在**NRs自然環(huán)境的條件下進(jìn)行。然而，通過利用RIME(內(nèi)源性蛋白快速免疫沉淀MS)，Paltoglou等人和Stelloo等人已經(jīng)從PCa細(xì)胞交聯(lián)染色質(zhì)中鑒定了幾種內(nèi)源性AR相關(guān)蛋白。英拜的高通量測(cè)序服務(wù)質(zhì)量。焦亡科研實(shí)驗(yàn)外包
2）在體內(nèi)和體外，DRD2的表達(dá)抑制BrCa細(xì)胞的**發(fā)生
構(gòu)建過表達(dá)DRD2的MDA-MB231和BT549細(xì)胞，通過RT-PCR(Figure2A)和WB(Figure2B)驗(yàn)證。CCK8實(shí)驗(yàn)證明，DRD2異位表達(dá)抑制**細(xì)胞生長(zhǎng)(圖2C)。在單層集落形成實(shí)驗(yàn)(圖2D)和軟瓊脂形成實(shí)驗(yàn)(圖2E)中，DRD2也損害了存活能力。并進(jìn)行細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期分布分析。DRD2的表達(dá)***促進(jìn)了BrCa細(xì)胞凋亡(圖2F)，并阻斷了MDA-MB231和BT549在G2/M期的凋亡(圖2G)。此外，過表達(dá)DRD2促進(jìn)了BrCa細(xì)胞對(duì)PTX的敏感性(圖2H)。在傷口愈合實(shí)驗(yàn)中，異位表達(dá)的DRD2比對(duì)照組表現(xiàn)出更少的閉合人工傷口的能力(圖2I)。與此相一致的是，DRD2的過表達(dá)***降低了BrCa的遷移和侵襲(圖2J)。在體內(nèi)進(jìn)一步測(cè)定了DRD2的抑瘤作用。皮下**模型顯示過表達(dá)DRD2模型的**體積和重量均減小(圖2K)。 醫(yī)學(xué)科研服務(wù)科研國家自然科學(xué)基金發(fā)現(xiàn)乳酸菌上清液降低了尿酸濃度。
此外，ChIP分析顯示，過表達(dá)ELNAT1增加了hnRNPA1和組蛋白甲基化（H3K4me3）在UBC9啟動(dòng)子上的富集，而通過刪除hnRNPA1的ELNAT1結(jié)合位點(diǎn)則抑制了富集（Figure 5 K, L）。同時(shí)，ELNAT1沉默***降低了UM-UC-3和T24細(xì)胞UBC9啟動(dòng)子的hnRNPA1占用率和H3K4me3甲基化（Figure 5 M, N），這證明了hnRNPA1通過調(diào)節(jié)UBC9啟動(dòng)子上的組蛋白甲基化，促進(jìn)ELNAT1誘導(dǎo)UBC9的轉(zhuǎn)錄***。以上結(jié)果說明，ELNAT1與UBC9啟動(dòng)子形成DNA-RNA三聯(lián)體，通過招募hnRNPA1增強(qiáng)H3K4me3修飾。
作者進(jìn)一步研究YTHDC2是否是存在人類LUAD細(xì)胞中的一種**抑制因子。IB檢測(cè)證實(shí)了YTHDC2的過表達(dá)和敲除效率(圖2G和S2A)。然而在H1299細(xì)胞中過表達(dá)YTHDC2WT后，**3D球體的數(shù)量和大小以及異種移植瘤的生長(zhǎng)下降，但在過表達(dá)YTHDC2ΔYTH時(shí)沒有觀察到這些現(xiàn)象(圖2 H-K)。相比之下，敲除H1975細(xì)胞中的YTHDC2增加了小鼠的球體形成和異種移植瘤的生長(zhǎng)(圖S2B-E)。值得注意的是，當(dāng)使用YTHDC2sg2?resistant (res)重組YTHDC2表達(dá)時(shí)，YTHDC2sg2在**發(fā)生中的陽性作用得到了恢復(fù)(圖S2B-E)。因此，YTHDC2通過其m6A閱讀域在LUAD中發(fā)揮**抑制功能。
2、hUC-MSCs增加MRL/lpr小鼠脾CD4+T細(xì)胞的衰老通過Sirt1/p53信號(hào)
作者推測(cè)hUC-MSCs***MRL/lpr小鼠的潛在機(jī)制可能是通過增強(qiáng)CD4+T細(xì)胞的衰老來抑制其積累。為了驗(yàn)證這一點(diǎn)，作者從脾細(xì)胞懸液中分離出單核細(xì)胞，然后純化CD4+T細(xì)胞用于RNA和蛋白質(zhì)制備。測(cè)量了p21和p16水平作為早衰的標(biāo)記物。結(jié)果顯示與WT對(duì)照組相比，p21和p16的mRNA和蛋白質(zhì)水平在MRL/lpr小鼠中***降低，與此同時(shí)，與接受PBS處理的MRL/lpr小鼠相比，p21和p16的mRNA和蛋白表達(dá)在hUC-MSCs***組中***增加(圖2A-C)。研究還發(fā)現(xiàn)，與WT小鼠相比，MRL/lpr脾臟CD4+T細(xì)胞的Sirt1表達(dá)水平升高，在Lys-379位點(diǎn)的p53乙?；浇档?，而hUC-MSCs***可以通過降低Sirt1水平、增加p53水平和p53乙?；絹砟孓D(zhuǎn)這一變化(圖2C-E)?？傊鲜鼋Y(jié)果提示，MRL/lpr小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞的衰老可能是有缺陷的由于Sirt1/p53的信號(hào)改變導(dǎo)致，這可能導(dǎo)致CD4+T細(xì)胞的過度增殖。因此，hUC-MSCs的臨床作用可能與脾CD4+T細(xì)胞衰老通路的恢復(fù)有關(guān)。 增加乳酸桿菌水平導(dǎo)致尿酸水平下降。北京SCI科研
上海英拜生物的動(dòng)物建模實(shí)驗(yàn)。焦亡科研實(shí)驗(yàn)外包
5）M1-Exos通過傳遞miR-155加重了EndoMT
為了研究外泌體miR-155在SCI后M1-Exos介導(dǎo)的BSCB破壞惡化中的作用，構(gòu)建miR-155過表達(dá)(miR-155OE)和敲低(miR-155KD)BMDMs，然后分離外泌體并處理bEnd.3細(xì)胞。如圖5A和B所示，miR-155OE-Exos組TEER值***降低，通透性***增加，而miR-155KD-Exos組則相反。加入miR-155OE-Exos后，ZO-1和Occludin的熒光強(qiáng)度明顯降低，而miR-155KD-Exos處理后，ZO-1和Occludin的表達(dá)***增強(qiáng)(圖5C和D)。此外，westernblot檢測(cè)TJs蛋白的表達(dá)，結(jié)果與上述討論的結(jié)果相似(圖5E)。miR-155OE-Exos可促進(jìn)細(xì)胞形態(tài)轉(zhuǎn)化，其分支更少，體細(xì)胞更長(zhǎng)。miR-155KD-Exos處理后的結(jié)果則相反(圖5F)。miR-155OE-Exos暴露后，I型膠原蛋白、III型膠原蛋白和α-SMA蛋白水平上調(diào)，CD31蛋白水平下調(diào)，而miR-155KD-Exos作用相反(圖5G)。以上結(jié)果表明，外泌體miR-155在促進(jìn)bEnd.3細(xì)胞的EndoMT中起著至關(guān)重要的作用。 焦亡科研實(shí)驗(yàn)外包
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開放參觀，客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
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