江蘇細(xì)胞發(fā)育與分化科研

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-12

相反,miR-199a-5p抑制劑處理可提高WT小鼠脾CD4+T細(xì)胞中Sirt1的表達(dá)(圖5E),并降低衰老標(biāo)志物p21,p16和乙酰p53水平(圖5F)。***,與MRL/lpr相比,hUC-MSCs可增加miR-199a-5p的產(chǎn)生,表明hUC-MSCs是miR-199a-5p來源的關(guān)鍵調(diào)控因子(圖5G)。在transwell系統(tǒng)中,hUC-MSCs與MRL/lpr脾CD4+T細(xì)胞共培養(yǎng)48h后,細(xì)胞內(nèi)miR-199a-5p升高,Sirt1基因表達(dá)降低,CD4+T細(xì)胞中衰老標(biāo)志物的表達(dá)水平恢復(fù),而miR-199a-5p抑制劑處理后仍處于抑制狀態(tài)(圖5G-I)。總的來說,這些數(shù)據(jù)表明hUC-MSCs通過miR-199a-5p介導(dǎo)的Sirt1下調(diào)和隨后p53去乙酰化的減少,增加了脾臟CD4+T細(xì)胞的衰老。上海英拜生物提供可視化實(shí)驗(yàn)過程參觀。江蘇細(xì)胞發(fā)育與分化科研

CRC中circPLCE1的特征及臨床意義

為了識(shí)別CRC中差異表達(dá)的circRNA,我們使用正常的人類腸道上皮細(xì)胞系和CRC細(xì)胞系進(jìn)行了總RNA測序。我們確定研究對象為circPLCE1(hsa_circ_0019223,命名為circPLCE1)。我們分析了85對CRC樣本中的circPLCE1表達(dá),證實(shí)了88.2%(75/85)的CRC患者中circPLCE1表達(dá)下調(diào)。進(jìn)一步分析顯示,circPLCE1在晚期臨床期或T期患者中表達(dá)下調(diào)。使用qRT-PCR分析circPLCE1在正常人腸上皮細(xì)胞株和CRC細(xì)胞株中的表達(dá)水平差異,得到了相似的結(jié)果。circPLCE1由PLCE1外顯子2反向剪接而成。通過Sanger測序證實(shí)了circPLCE1的反向拼接連接。PLCE1的環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本只能通過擴(kuò)增引物在cDNA中擴(kuò)增。circPLCE1還能抵抗RNaseR酶切。半衰期試驗(yàn)進(jìn)一步表明,circPLCE1比circPLCE1線性mRNA更穩(wěn)定。通過核質(zhì)量分離試驗(yàn)和熒光原位雜交(FISH)檢測了circPLCE1的定位,結(jié)果顯示circPLCE1在CRC細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中富集。此外,circPLCE1在臨床晚期或T期患者中表達(dá)較低。KaplanMeier曲線結(jié)果顯示,CRC患者circPLCE1表達(dá)較低與較差的生存率相關(guān)。這些數(shù)據(jù)驗(yàn)證了circPLCE1的特征和臨床意義。 滲透性應(yīng)激科研實(shí)驗(yàn)外包英拜的員工福利待遇很好。

除了APP和Mme,多巴胺受體D1 (Drd1)、蛋白磷酸酶1、調(diào)節(jié)抑制劑亞單位1b (Ppp1r1b)、神經(jīng)營養(yǎng)酪氨酸激酶受體1型(Ntrk1)和Lhx8這些已報(bào)道的參與了AD的病理過程的基因表達(dá)都發(fā)生改變。除了與RNA分子相互作用外,Pur-α還可以與RNA分子結(jié)合并參與許多細(xì)胞基因的轉(zhuǎn)錄控制,為了檢驗(yàn)CircCwc27是否通過介導(dǎo)Pur-α與其啟動(dòng)子結(jié)合來調(diào)控基因表達(dá),作者進(jìn)行了ChIP-qPCR實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證了Pur-α直接結(jié)合到由CircCwc27控制的AD患者中異?;虻膯?dòng)子上。接下來,對CircCwc27進(jìn)行敲低處理發(fā)現(xiàn)對Pur-α在其靶點(diǎn)啟動(dòng)子上富集確實(shí)受到影響。ChIP-qPCR實(shí)驗(yàn)表明,CircCwc27敲低可逆轉(zhuǎn)Pur-α與這些基因啟動(dòng)子結(jié)合減少的現(xiàn)象。因此,該研究表明,CircCwc27通過與Pur-α結(jié)合,減少了Pur-α對AD相關(guān)基因啟動(dòng)子的招募。

6)SsD抑制患者原代細(xì)胞

我們從吉林大學(xué)***醫(yī)院**組織/生物標(biāo)本庫獲取AML患者外周血,進(jìn)一步評估SsD對白血病進(jìn)展的影響。SsD***抑制了白血病細(xì)胞增殖(圖6A)、集落形成能力(圖6B)、誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯(圖6C)。在機(jī)制上,這是由FTO介導(dǎo)的m6ARNA甲基化及其在SsD處理的原代細(xì)胞中的靶點(diǎn)調(diào)控的(圖6D-G)。當(dāng)我們使用“人-鼠”異種移植白血病模型來評估SsD在體內(nèi)對白血病進(jìn)展的影響時(shí)(圖6H),與上述類似,使用SsD******抑制AML進(jìn)展,包括降低WBC,減少BM中的白血病母細(xì)胞,減少脾腫大,抑制肺轉(zhuǎn)移,延長AML原代細(xì)胞異種移植小鼠的存活時(shí)間(圖6I-N)。因此,這些體內(nèi)研究結(jié)果表明SsD具有***FTO介導(dǎo)的AML的潛力。 上海英拜生物提供可靠可信可參觀的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。

為了進(jìn)一步探究miR-101-3p作用于**細(xì)胞生長和凋亡的作用是否是通過調(diào)節(jié)TBLR1的表達(dá),作者進(jìn)行了回復(fù)實(shí)驗(yàn)。如圖4所示,單獨(dú)轉(zhuǎn)染TBRL1過表達(dá)載體,會(huì)***上調(diào)TBLR1的蛋白表達(dá),減少**細(xì)胞凋亡,促進(jìn)**細(xì)胞的增殖和Bcl-2的表達(dá),而同時(shí)供轉(zhuǎn)染TBRL1過表達(dá)載體和miR-101-3p mimics則會(huì)***抵消上述作用。表明miR-101-3p作用于**細(xì)胞生長和凋亡的作用是通過調(diào)節(jié)TBLR1的表達(dá)。

miR-101-3p/TBLR1軸調(diào)節(jié)鐵死亡并可作為*****的潛在靶點(diǎn)

通常,*細(xì)胞的突變會(huì)***阻礙細(xì)胞凋亡的***。因此,探索了miR-101-3p/TBLR1軸***凋亡進(jìn)而抑制增殖的分子機(jī)制。作者此前的研究表明TBLR1會(huì)***抑制NF-kB通路的活性。據(jù)報(bào)道,NF-kB通路可以通過GPX4或PTGS2調(diào)節(jié)**細(xì)胞的鐵死亡。因此,作者探究了miR-101-3p/TBLR1軸對鐵死亡的影響。共聚焦顯微鏡顯示miR-101-3p過表達(dá)后細(xì)胞中總體ROS水平***增加,GPX4的表達(dá)***下降,PTGS2的表達(dá)***增高,脂質(zhì)ROS水平也***增加,而GSH水平則***下降。而抑制miR-101-3p則上述結(jié)果相反。因此,這些結(jié)果表明miR-101-3p可調(diào)節(jié)**細(xì)胞鐵死亡。 發(fā)現(xiàn)乳酸菌上清液降低了尿酸濃度??肆_恩病科研國家自然科學(xué)基金

N6甲基腺苷(m6A)是一種常見的真核細(xì)胞mRNA修飾。江蘇細(xì)胞發(fā)育與分化科研

METTL3促進(jìn)小鼠ESCC細(xì)胞增殖和**生長為了確定METTL3在細(xì)胞增殖中的作用,通過轉(zhuǎn)染METTL3 shRNAs來去除ESCC細(xì)胞中的METTL3。發(fā)現(xiàn)METTL3缺失減少了這些細(xì)胞的增殖和集落數(shù)。通過在KYSE180和KYSE450中重組表達(dá)METTL3,這些抑制作用被消除。

接下來在KYSE450細(xì)胞中建立四環(huán)素誘導(dǎo)的METTL3表達(dá)。四環(huán)素***以劑量依賴的方式增加METTL3的表達(dá),相應(yīng)地引起細(xì)胞增殖水平的增加和集落形成水平的增加。與野生型(WT)METTL3的過表達(dá)相比,在ESCC細(xì)胞中METTL3非活性突變體的過表達(dá)未能促進(jìn)細(xì)胞生長和增殖。這些結(jié)果有力地表明,METTL3促進(jìn)**細(xì)胞增殖依賴于其表達(dá)水平和完整的活性。為了確定METTL3在小鼠**生長中的作用,將KYSE180或KYSE450細(xì)胞皮下注射到裸鼠體內(nèi),發(fā)現(xiàn)METTL3缺失降低了**大小、體積和重量。與表達(dá)METTL3非活性突變體引起的有限效應(yīng)相比,WTMETTL3過表達(dá)極大地促進(jìn)了**生長。這些結(jié)果表明METTL3的表達(dá)有助于小鼠**的生長。METTL3介導(dǎo)APCmRNA上的m6A上調(diào) 江蘇細(xì)胞發(fā)育與分化科研

公司特色是以各式高通量二代測序?yàn)榛A(chǔ),利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段,通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái),提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū),實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開放參觀,客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度,保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。

1.整體課題外包服務(wù):RNA甲基化研究專題,外泌體研究專題,wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究,設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性,為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)

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4.二代測序:轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序

5.芯片:信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片

6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn):DNA甲基化實(shí)驗(yàn)(BSP,MSP,焦磷酸測序),RNA甲基化實(shí)驗(yàn)

7.實(shí)時(shí)定量PCR(mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA),WB,RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證,過表達(dá),干擾),基因突變及SNP檢測,F(xiàn)ISH,RNA-PULLdown,rip,chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖,凋亡,流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)