YTHDC2可促進(jìn)靶基因的翻譯效率,并降低其mRNA的豐度,在精子發(fā)生過程中起關(guān)鍵作用。當(dāng)減數(shù)分裂開始時YTHDC2表達(dá)上調(diào),YTHDC2敲除小鼠的生殖細(xì)胞沒有經(jīng)過偶線期的發(fā)育導(dǎo)致小鼠不育[20]。在DNA損傷反應(yīng)中,METTL3可促進(jìn)DNA聚合酶κ(Pol κ)與核酸剪切修復(fù)途徑快速定位到UV引起的DNA損傷位點,當(dāng)缺失METTL3時,細(xì)胞無法迅速修復(fù)UV照射引起的突變,并且對UV照射更加敏感[25]。在淋巴細(xì)胞性小鼠過繼轉(zhuǎn)移模型中, Mettl3缺陷通過影響mRNA m6A修飾,降低SOCS家族mRNA衰減,增加mRNA和蛋白表達(dá)水平,從而抑制IL-7介導(dǎo)的 STAT5活性和T細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)增殖和分化,進(jìn)而抑制腸炎的發(fā)生[21]。在肝*中,METTL14 通過調(diào)控pri-miRNA的m6A修飾,影響MiR-126的生成加工,從而抑制肝*的轉(zhuǎn)移[22]。在乳腺*細(xì)胞中,低氧刺激能促進(jìn)依賴低氧誘導(dǎo)因子HIF的ALKBH5的表達(dá),而ALKBH5過表達(dá)降低了NANOG mRNA的m6A修飾,從而穩(wěn)定mRNA提高NANOG的表達(dá)水平,**終增加乳腺*干細(xì)胞所占的比例[23]。我們接下來研究了Pex對HSCs生物學(xué)行為的影響。鐵死亡課題基礎(chǔ)實驗外包
4)APP/PS1小鼠大腦皮質(zhì)區(qū)受損星形膠質(zhì)細(xì)胞中氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化水平升高
我們研究了NOX4來源的氧化應(yīng)激在APP/PS1小鼠受損星形膠質(zhì)細(xì)胞中的作用。我們用免疫熒光染色法測定了APP/PS1小鼠和野生型(WT)小鼠大腦皮層GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞中4-HNE的蛋白水平(圖4A)。免疫熒光染色顯示,與WT小鼠相比,APP/PS1小鼠皮質(zhì)區(qū)GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞中4-HNE陽性染色強度增加(圖4A、C)。APP/PS1小鼠皮質(zhì)區(qū)受損的GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞中4-HNE陽性染色強度升高。此外,與WT小鼠相比,APP/PS1小鼠中4-HNE和GFAP亞細(xì)胞共定位呈陽性的受損星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量***增加(圖4D)。與WT小鼠相比,APP/PS1小鼠皮質(zhì)區(qū)GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞(圖4B和E)和MDA與GFAP亞細(xì)胞共定位陽性的受損星形膠質(zhì)細(xì)胞(圖4F)數(shù)量增加。4-HNE在APP/PS1小鼠NOX4陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞***定位(圖4G)。此外,APP/PS1小鼠NOX4和4-HNE陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量***增加(圖4H)。這些結(jié)果提示APP/PS1受損小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞中氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化水平升高。 鐵死亡課題基礎(chǔ)實驗外包高表達(dá)的外泌體CD44v6和C1QBP是預(yù)測PDAC患者預(yù)后和肝轉(zhuǎn)移的很有前途的生物標(biāo)志物。
乳腺*是世界上女性發(fā)病率比較高的惡性**。2018年全球新診斷乳腺*約210萬例,約占所有女性惡性zhonglui**病例的25%。環(huán)狀RNA(circRNA)是近年來在各種物種中***發(fā)現(xiàn)的一類新RNA。由于共價環(huán)結(jié)構(gòu),circRNA 對 RNA 核酸外切酶具有抗性,并且比線性 RNA 更穩(wěn)定。***我們講一篇關(guān)于circRNA與乳腺*的文章,題名為:The circACTN4 interacts with FUBP1 to promote tumorigenesis and progression of breast cancer by regulating the expression of proto-oncogene MYC。該文章發(fā)表在Molecular Cancer期刊上,IF=27.401。
在MAD1與未連接的動點結(jié)合后,MAD2從開放的構(gòu)象狀態(tài)(O-MAD2)轉(zhuǎn)化為封閉的構(gòu)象狀態(tài)(C-MAD2),SAC信號被緊密調(diào)控和放大。MAD2的構(gòu)象變化啟動了它與CDC20的結(jié)合。為了直接測試RIT1是否抑制了MAD2與CDC20或MAD1的關(guān)聯(lián),進(jìn)行了競爭性pull-down實驗來測試RIT1-MAD2和MAD2-CDC20/MAD1結(jié)合之間的互斥性(圖4A和4B)。MAD2結(jié)合肽1(MBP1)是一種模擬CDC20和MAD1相互作用基序(MIM)的高親和合成肽,它取消了MAD2-rit1的結(jié)合。評估了RIT1與O-或c-狀態(tài)穩(wěn)定的MAD2突變體的結(jié)合(圖4C)。用過量的RIT1c端尾肽孵育MAD2蛋白,并用凝膠過濾分離(圖4D)。RIT1M90I***降低了MAD2-CDC20和BubR1-CDC20的相互作用(圖4E和4F);表明致病RIT1蛋白水平阻礙MCC的完整性,符合RIT1從CDC20中隔離MAD2并促進(jìn)MCC拆卸的模型。用重組RIT1補充這些提取物增加了CyclinB1和Securin的泛素化和降解,表明APC/C活性增加,可能是由于MCC抑制緩解(圖4G)。RIT1缺失細(xì)胞顯示CyclinB1降解延遲(圖4H)。此外,RIT1M90I的表達(dá)加速了正常細(xì)胞生長下CyclinB1的降解(圖4I);然而,其對CyclinB1降解的影響在藥理學(xué)誘導(dǎo)的有絲分裂阻滯下被消除(圖S4M),這表明致病性水平的RIT1不能抑制過度活躍的SAC反應(yīng)。課題CRO服務(wù)找上海英拜。
自4個不同腺泡性LUAD患者的PDX模型被給予XC-系統(tǒng)抑制劑erastin(PKE)和多激酶抑制劑索拉非尼(sorafenib)。與DMSO***的對照組相比,PKE和sorafenib給藥時觀察到***的**消退(圖7G-J)。此外,PKE和sorafenib給藥小鼠也導(dǎo)致**中MDA和4-HNE的***增加(圖7K和L),提示誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化可能是抑制腺泡LUADs**發(fā)生的結(jié)果。圖7M顯示,與*旁組織相比,**組織中MDA和YTHDC2表達(dá)量都降低,而SLC7A11mRNA和蛋白水平都升高,證明在LUAD中抑制YTHDC2可通過SLC7A11表達(dá)上調(diào)阻止脂質(zhì)過氧化。同樣地,MDA和YTHDC2與**期數(shù)呈負(fù)相關(guān),而SLC7A11與分期呈正相關(guān)(圖7N),說明SLC7A11的升高可能是抑制YTHDC2促進(jìn)LUAD進(jìn)展的關(guān)鍵。
結(jié)論:本研究強調(diào)了m6A閱讀器YTHDC2在LUAD中的重要性。XC?系統(tǒng)活性可能通過抑制YTHDC2來誘導(dǎo)促進(jìn)**發(fā)生。此外,基于YTHDC2表達(dá)的分子模型可能有助于預(yù)測LUAD的預(yù)后。抑制劑靶向XC?系統(tǒng)可能有助于***預(yù)后不良的LUAD患者。因此,本研究對LUAD的**發(fā)生、分子分型和藥物敏感性提供了有價值的見解。 動物建模模型實驗的整體服務(wù)。二代測序課題CRO
TRF測序課題整體服務(wù)。鐵死亡課題基礎(chǔ)實驗外包
食道*是世界上第六大**常見的**,據(jù)報道患者5年生存率只有12-20%。N6-甲基腺苷(m6A)修飾是真核生物mRNA中**豐富的RNA修飾,主要由m6A調(diào)節(jié)劑介導(dǎo)。m6A修飾調(diào)節(jié)RNA穩(wěn)定性和翻譯效率、染色質(zhì)狀態(tài)、替代聚腺苷酸化和前體mRNA剪接。***我們來講一篇刊登在NatureCommunications(IF=14.91)上的一篇文章,題名為METTL3promotestumourdevelopmentbydecreasingAPCexpressionmediatedbyAPCmRNAN6-methyladenosine-dependentYTHDFbinding。
上調(diào)METTL3與ESCC患者的不良生存相關(guān)為探討食管*中中METTL3的表達(dá)譜,分析了**基因組圖譜(TCGA)數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)與11個相鄰的正常食管上皮組織相比,95個食管*標(biāo)本中METTL3的表達(dá)***上調(diào)。對包含81對ESCC標(biāo)本和鄰近正常食管上皮組織的組織芯片進(jìn)行IHC染色顯示,ESCC組織中的METTL3表達(dá)水平***高于配對鄰近正常組織。Kaplan-Meier分析顯示,高表達(dá)METTL3的患者總生存時間比低表達(dá)METTL3的患者短。9種不同ESCC細(xì)胞系中METTL3mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平高于Het-1a永生化正常食管上皮細(xì)胞。這些結(jié)果表明,METTL3在食管鱗*中表達(dá)上調(diào),并與食管鱗*患者生存時間呈負(fù)相關(guān)。 鐵死亡課題基礎(chǔ)實驗外包
公司特色是以各式高通量二代測序為基礎(chǔ),利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段,通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實驗平臺,提供課題整體設(shè)計外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實驗平臺落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū),實驗平臺開放參觀,客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進(jìn)度,保證您的實驗是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù):RNA甲基化研究專題,外泌體研究專題,wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究,設(shè)計的課題均具有后續(xù)實驗課題的延展性,為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
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4.二代測序:轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片:信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗:DNA甲基化實驗(BSP,MSP,焦磷酸測序),RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR(mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA),WB,RNA功能驗證實驗(靶基因驗證,過表達(dá),干擾),基因突變及SNP檢測,F(xiàn)ISH,RNA-PULLdown,rip,chip實驗以及細(xì)胞增殖,凋亡,流式等細(xì)胞功能學(xué)實驗