6）MAPK1-109aa通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合MEK1來(lái)抑制MAPK1的磷酸化
為了研究MAPK1-109aa抑制GC的分子機(jī)制，我們將標(biāo)記的MAPK1-109aa質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞。在flag標(biāo)記的MAPK1-109aa免疫沉淀復(fù)合物中，潛在的相互作用蛋白被拉下(圖7a)。采用蛋白MS分析對(duì)差異表達(dá)蛋白進(jìn)行鑒定。在被識(shí)別的蛋白質(zhì)列表中，豐度比較高的蛋白質(zhì)是MEK1，表明MEK1是MAPK1-109aa潛在的相互作用蛋白(圖7b，c)。此外，flag標(biāo)記的MAPK1-109aa可以與MEK1相互作用，證實(shí)了MAPK1-109aa與MEK1之間的直接相互作用(圖7d)。免疫熒光染色顯示MAPK1-109aa與MEK1共定位(圖7e)。此外，我們采用MEK1抗體免疫共沉淀，探討MAPK1-109aa對(duì)MAPK1通路的潛在調(diào)控作用。我們發(fā)現(xiàn)，在circMAPK1穩(wěn)定下調(diào)的SGC7901和MGC803細(xì)胞中，與對(duì)照組相比，MAPK1-109aa與MEK1的結(jié)合明顯減少，而MAPK1與MEK1的結(jié)合增加(圖7f)。 課題CRO服務(wù)找上海英拜。海南課題
3）USP35過(guò)表達(dá)阻斷erastin/RSL3介導(dǎo)的**抑制作用細(xì)胞也用慢病毒載體***以在體外過(guò)表達(dá)USP35，并通過(guò)PCR驗(yàn)證其效率(圖3A)。然而，在基礎(chǔ)條件下，USP35過(guò)表達(dá)不影響H460和H1299細(xì)胞的細(xì)胞死亡和集落形成(圖3B，C)。裸鼠的**體積和重量也不受USP35過(guò)表達(dá)的影響(圖3D，E)。我們進(jìn)一步研究了USP35操作是否對(duì)鐵刺激引起的細(xì)胞死亡有影響。不出所料，erastin或RSL3處理***降低了H460和H1299細(xì)胞的細(xì)胞活力或集落形成，而這是通過(guò)USP35過(guò)表達(dá)來(lái)阻止的(圖3F，G)。相應(yīng)地，接種CTRL肺*細(xì)胞的裸鼠在erastin或RSL3***后**體積和重量減少；然而，這些**抑制作用被USP35過(guò)表達(dá)阻斷(圖3H，I)?？偟膩?lái)說(shuō)，USP35過(guò)表達(dá)阻斷了erastin/RSL33介導(dǎo)的**抑制作用。海南課題生命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的精細(xì)研究。
**調(diào)節(jié)因子通常作為蛋白質(zhì)復(fù)合物中的亞基存在，并以多種方式參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控，例如通過(guò)調(diào)節(jié)組蛋白修飾和染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。哺乳動(dòng)物BRG1-或brm相關(guān)的染色質(zhì)重塑復(fù)合物(BAF, SWI/SNF)改變了*細(xì)胞染色質(zhì)可及性景觀。該復(fù)合物是細(xì)胞周期和增殖的關(guān)鍵調(diào)控因子，也是前列腺*的驅(qū)動(dòng)因子，具有多種**特異性作用。此外，頻繁發(fā)生的TMPRSS2-ERG融合基因易位可使BAF復(fù)合物重新靶向于染色質(zhì)，促進(jìn)前列腺*的發(fā)生?；コ獾腁TPase亞基BRG1 (SMARCA4)和BRM (SMARCA2)是復(fù)雜功能的關(guān)鍵組件。此外，AR與DNA序列特異性轉(zhuǎn)錄因子(如FOXA1、GATA2、ERG和HOXB13)之間的合作已經(jīng)建立。TF FOXA1可以結(jié)合到封閉的染色質(zhì)區(qū)域，調(diào)節(jié)其染色質(zhì)可及性，從而促進(jìn)AR結(jié)合染色質(zhì)引發(fā)PCa。
結(jié)直腸* (CRC) 在世界范圍內(nèi)普遍存在，其死亡率主要是由于其轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)處的關(guān)鍵***而造成的。外泌體-microRNA（miRNA）分泌已被表征為*細(xì)胞間細(xì)胞間通訊的重要因素。 然而，**分泌的 miRNA 與結(jié)直腸* (CRC) 轉(zhuǎn)移的特異性相關(guān)知之甚少。因此了解 CRC 轉(zhuǎn)移的確切分子機(jī)制對(duì)于確定新的診斷生物標(biāo)志物和制定 CRC 患者的***策略非常重要。目前，有作者對(duì)這一機(jī)制進(jìn)行了研究，該研究于2021年6月發(fā)表在l《Molecular Therapy-Nucleic Acids》，IF：8.886。提供整體課題外包實(shí)驗(yàn)構(gòu)思。
JAK-Stat6信號(hào)通路在介導(dǎo)IL-4/IL-13誘導(dǎo)TME中TAMs免疫抑制極化過(guò)程中起關(guān)鍵作用。IL-4/IL-13刺激后，JAK磷酸化，隨后Stat6磷酸化，磷酸化后的Stat6二聚并遷移至細(xì)胞核，然后與IL-4/IL-13相應(yīng)基因，包括那些參與巨噬細(xì)胞免疫響應(yīng)功能的基因的啟動(dòng)子結(jié)合。據(jù)報(bào)道ROS可以促進(jìn)JAK和Stat6磷酸化。因此，推測(cè)MAO-A可能通過(guò)上調(diào)ROS水平影響巨噬細(xì)胞極化，從而使JAK-Stat6信號(hào)通路敏感。事實(shí)上，直接分析從B16-OVA荷瘤MaoaWT和MaoaKO小鼠中分離的TAMs證實(shí)，與野生型TAMs相比，MAO-A缺陷的TAMs顯示Stat6***降低（圖4k-l）。進(jìn)一步分析IL-4/IL-13誘導(dǎo)的JAK-Stat6信號(hào)通路，與在MaoaWTBMDMs中相比，在MaoaKOBMDMs中JAK-Stat6信號(hào)***下降，補(bǔ)充H2O2可使其JAK-Stat6信號(hào)達(dá)到與WT類似水平（圖4m）。這些數(shù)據(jù)表明MAO-A通過(guò)ROS致敏的JAK-Stat6通路***促進(jìn)巨噬細(xì)胞免疫抑制極化。總之，這些體內(nèi)外數(shù)據(jù)支持MAO-A促進(jìn)TME中免疫抑制極化，通過(guò)上調(diào)TAM細(xì)胞內(nèi)ROS水平，從而提高IL-4/IL-13誘導(dǎo)的JAK-Stat6信號(hào)通路。高通量測(cè)序的后續(xù)成文服務(wù)。新疆課題創(chuàng)新服務(wù)
TIMEOR是***個(gè)基于 Web 的自適應(yīng)時(shí)間序列多組學(xué)管道方法。海南課題
6）上調(diào)UCP1減輕AKI中的脂質(zhì)積累，可***緩解體內(nèi)炎癥和凋亡
以上研究證實(shí)，在體外，上調(diào)UCP1可以通過(guò)抑制炎癥和凋亡來(lái)抑制AKI的進(jìn)展。為了探究其在體內(nèi)的作用，我們?cè)谀I多點(diǎn)注射模型中檢測(cè)了相應(yīng)的指標(biāo)。如圖6A-E所示，炎癥指標(biāo)CD68、IL-1β、IL-6、TNF-α均***降低，UCP1上調(diào)。在凋亡方面，凋亡指標(biāo)Bax和C-caspase3也隨著UCP1的上調(diào)而降低，而B(niǎo)cl-2隨著UCP1的上調(diào)而升高(圖6F)。TUNEL熒光染色也直接證明了UCP1上調(diào)導(dǎo)致的凋亡減少(圖6G-H)。同樣，我們也使用UCP1激動(dòng)劑CL316243在動(dòng)物模型中證實(shí)了同樣的炎癥和凋亡趨勢(shì)(圖6I-P)。 海南課題
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過(guò)英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫(xiě)SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開(kāi)發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開(kāi)放參觀，客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書(shū)奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書(shū)申請(qǐng)：提供標(biāo)書(shū)課題設(shè)計(jì)、撰寫(xiě)，標(biāo)書(shū)部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書(shū)均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測(cè)序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過(guò)表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測(cè)，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)