原理:結(jié)合重亞確酸鹽的測序法是-種靈敏的能直接檢測分析基因組DNA甲基化模式的方法。重亞硫酸鹽處理后.用針對改變后的DNA序列設(shè)計特異性引物井進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)。PCR產(chǎn)物中原先非甲基化的胞嘧啶位點被胸腺嘧啶所替代.而甲基化的胞嘧啶位點保持不變。PCR產(chǎn)物克隆后進(jìn)行測序。通過這個方法能得到特定位點在各個基因組DNA分子中的甲基化狀態(tài)。該方法特點是:1.特異性高,它能夠提供特異性很高的分析結(jié)果,這是所有其他研究甲基化的分析方法所不能比擬的;2.靈敏度高,可以用于分析少于100個細(xì)胞的檢測樣品。用微量的基因組DNA進(jìn)行分析就能得到各個DNA分子精確的甲基化位點分布圖。子實驗平臺包含的實驗有:抗體芯片WB/FISH/RIP/CHIP/RNApulldown/雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?載體構(gòu)建。新疆實驗服務(wù)實驗可參觀
子實驗平臺包含的實驗有:高通量測序(轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、miRNA測序、IncRNA測序、circRNA測序、tRF測序、甲基化測序)熒光定量PCR(mRNA/IncRNA/circRNA/miRNA/tRF)PCR芯片、抗體芯片WB/FISH/RIP/CHIP/RNApulldown/雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?載體構(gòu)建。
細(xì)胞實驗平臺包含的實驗有:細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染(瞬轉(zhuǎn)、穩(wěn)轉(zhuǎn))慢病毒***熒光拍照細(xì)胞侵襲、遷移、增殖、凋亡、周期、克隆、劃痕。
英拜公司以高通量二代測序為基礎(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的生物實驗平臺，為您的科研添磚加瓦 吉林實驗服務(wù)服務(wù)價格白血病PCR芯片可用于研究與白血病的發(fā)生、分類和反應(yīng)有關(guān)的84個關(guān)鍵基因的表達(dá)。
技術(shù)優(yōu)勢:多種變異檢測:單核苷酸多態(tài)行(SNP).插入缺失(InDel)和結(jié)構(gòu)變異(SV);與芯片方法比較，可以檢測到新的變異序列;與人類全基因組從頭測序相比，耗時更短、成本更低。研究內(nèi)容:一、數(shù)據(jù)產(chǎn)出統(tǒng)計基因組單堿基深度分布及覆蓋度分析二、一致性序列組裝根據(jù)與參考基因組序列的比對結(jié)果,利用貝葉斯統(tǒng)計模型檢測出測序個體基因組中每個堿基位點比較大可能性的基因型,并組裝出該個體基因組的一致序列。三、SNP檢測及在基因組的分布在全基因組一致性序列的基礎(chǔ)上,從中提取全基因組中所有的潛在多態(tài)性位點,再根據(jù)質(zhì)量值、深度、重復(fù)性等因素做進(jìn)一步的過濾篩選，**終得到高可信度的SNP數(shù)據(jù)集。根據(jù)已有的基因集對檢測到得變異進(jìn)行注釋。四、InDel檢測及在基因組的分布使用測序個體的短序列與參考基因組進(jìn)行Paired-End比對,將比對結(jié)果進(jìn)行聚類分析,并結(jié)合Paired-End關(guān)系檢測可信的shortInDel。在檢測過程中,gap的長度為1~3個堿基。對于每個InDel的檢測，至少需要3個雙末端序列的支持。
RNA甲基化修飾約占所有RNA修飾的60%以上，而N6甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是高等生物mRNA和IncRNAs.上**為普遍的修飾。目前發(fā)現(xiàn)microRNA,circRNA,lncRNA,rRNA,tRNA和snoRNA上都有發(fā)生m6A修飾。m6A修飾主要發(fā)生在RRACH序列中的腺嘌呤上，其功能由“編碼器(Writer)”、“消碼器(Eraser)”和“讀碼器(Reader)"7決定?！熬幋a器(Writer)”即甲基轉(zhuǎn)移酶，目前已知這個復(fù)合物的成分有METL3,METTIL14,WTAP和KIAA1429;而ALKBHS和FTO作為去甲基酶(消碼器)可逆轉(zhuǎn)甲基化;m6A由m6A結(jié)合蛋白識別，目前發(fā)現(xiàn)m6A結(jié)合蛋白(讀碼器)有YTH結(jié)構(gòu)域蛋白(包括YTHDF1,YTHDF2.YTHDF3，YTHDC1和YTHDC2)和核不均一蛋白HNRNP家族(HNRNPA2B1和HNRNPC)。在基因表達(dá)、蛋白翻譯和RNA剪切等正常生物過程中具有重要作用。近來有研究顯示m6ARNA甲基化在乳腺*、惡性血液病、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、宮頸*等多種**的發(fā)***展中具有重要作用。使用這一芯片試劑盒及配套試劑檢測RNA實驗標(biāo)本,研究者可以簡單準(zhǔn)確的檢測和分析蛋白糖基化相關(guān)的基因表達(dá)。
circRNA是通過特殊的選擇性剪切產(chǎn)生封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)的非編碼RNA。circRNA不受RNA外切酶的影響。比線性RNA表達(dá)更穩(wěn)定。研究表明,某些特殊的circRNA分子富含miRNA結(jié)合位點,在細(xì)胞中起到miRNAsponges的作用,進(jìn)而解除miRNA對其靶基因的抑制作用。ciRS-7(CDR1a)包含63個保守的miR-7結(jié)合位點,該circRNA在細(xì)胞中能夠有效吸附miR-7。而miR-7作為關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子***參與**途徑,如抑制在乳腺*、膠質(zhì)瘤等**中表達(dá)***上調(diào)的Pak1的表達(dá);miR-7也能通過結(jié)合a-synuclein抑制其表達(dá)。這些研究暗示ciRS-7通過ceRNA機制調(diào)節(jié)miR-7的功能,是神經(jīng)系統(tǒng)疾病和*****的潛在靶點。CpG甲基化焦磷酸測序檢測法通過將鏈合成過程中釋放出的焦磷酸(PPi)轉(zhuǎn)化成光信號來監(jiān)測鏈的合成過程。湖南實驗服務(wù)中標(biāo)率高
本公司依靠完整的實驗平臺,可根據(jù)客戶研究方向選定研究課題,設(shè)計研究內(nèi)容及研究路線，并提供相關(guān)實驗服務(wù)。新疆實驗服務(wù)實驗可參觀
課題外包服務(wù)：本公司依靠完整的實驗平臺,經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員及實戰(zhàn)能力豐富的翻譯專家,可以根據(jù)客戶研究方向選定研究課題,設(shè)計研究內(nèi)容及研究路線，并提供相關(guān)實驗服務(wù)。后期還可為客戶提供論文修改服務(wù)。1)基金標(biāo)書的寫作與基金申請指導(dǎo):提供基金標(biāo)書的修改,潤色.專業(yè)內(nèi)容的提點。2)課題免費設(shè)計:文獻(xiàn)搜索、查閱,分析實驗思路的合理性,結(jié)合您的實驗要求分析課題中所需要的技術(shù)方法和檢測指標(biāo),幫助您設(shè)計出經(jīng)濟合理的實驗方案。3)課題外包服務(wù):承接課題全部外包服務(wù),包含分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、免疫學(xué)、。。。。。4)部分課題提供SCI成文服務(wù),-次收費，服務(wù)到底周期:--年，費用與IF以及接受時間有關(guān)新疆實驗服務(wù)實驗可參觀
公司特色是以各式高通量二代測序為基礎(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實驗平臺，提供課題整體設(shè)計外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實驗平臺落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實驗平臺開放參觀，客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進(jìn)度，保證您的實驗是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計的課題均具有后續(xù)實驗課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書申請：提供標(biāo)書課題設(shè)計、撰寫，標(biāo)書部分基礎(chǔ)實驗的開展，設(shè)計的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測序：轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片：信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗：DNA甲基化實驗（BSP,MSP，焦磷酸測序），RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗證實驗(靶基因驗證，過表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實驗以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實驗