circ_0072083 與 miR-1252-5p 相互作用以調(diào)節(jié) TMZ 抗性
神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的 ALKBH5/NANOG 軸和 TMZ 抗性為了分析circ_0072083如何調(diào)節(jié)ALKBH5/NANOG軸,探索了潛在的 miRNA作為串?dāng)_?;贑ircinteractome和starBase的數(shù)據(jù)庫,維恩圖顯示只有一種miRNA(miR-1252-5p)可以與circ_0072083、ALKBH5和NANOG結(jié)合。 miR-1252-5p 表達(dá)在 TMZ 抗性組織和細(xì)胞中顯著降低。為了驗(yàn)證它們的相互作用,構(gòu)建了野生型和突變型熒光素酶報(bào)告載體。miR-1252-5p 過表達(dá)明顯降低了野生型組(WT-circ_0072083、WT-NANOG 3'UTR 和 WT-ALKBH5 3'UTR)的熒光素酶活性,而沒有改變突變組(MUT -circ_0072083,MUT-NANOG 3'UTR 和 MUT-ALKBH5 3'UTR)。 提供***科研設(shè)計(jì)咨詢及輔助實(shí)驗(yàn)。發(fā)育可塑性
2、白樺素下調(diào)SREBP靶基因,降低細(xì)胞脂質(zhì)水平
由于SREBP-2是其自身的直接靶標(biāo),因此白樺素將其表達(dá)下調(diào)40%(圖3A)。與SREBP-2是膽固醇生物合成的主要轉(zhuǎn)錄因子這一觀點(diǎn)一致,膽固醇合成途徑中的10個(gè)被測基因,例如HMGCR,HMG-CoA合酶(HMGCS)和角鯊烯環(huán)氧酶(SE),都被白樺素處理抑制了(圖3A)。類似地,與脂肪酸和甘油三酸酯合成有關(guān)的所有9個(gè)基因,例如SREBP-1c,脂肪酸合酶(FAS)和乙酰輔酶A羧化酶α(ACC),都被白樺素顯著下調(diào)(圖3B)。與早期觀察結(jié)果一致(圖1A),包括ABCG5和ABCG8在內(nèi)的LXR靶基因不受白樺素的影響(圖3C)。 肺纖維化小鼠模型解決了對確定因果調(diào)節(jié)機(jī)制網(wǎng)絡(luò)的方法的關(guān)鍵需求。
同時(shí),circNDUFB2顯著增加了p-P65,p-IRF3,p-STAT1和p-STAT2。circNDUFB2還促進(jìn)了IRF3和P65進(jìn)入核內(nèi)的易位。免疫熒光分析證實(shí)circNDUFB2促進(jìn)了IRF3的磷酸化,并隨后觸發(fā)其轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中。更重要的是,RIG-1的敲除顯著消除了這些基因的蛋白質(zhì)水平或磷酸化水平的上調(diào)以及由circNDUFB2誘導(dǎo)的A549細(xì)胞中IRF3和P65的核易位。ELISAs測量細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的細(xì)胞因子水平,發(fā)現(xiàn)RIG-1敲低顯著消除了對CXCL10,CXCL11,CCL5和IFNβ的誘導(dǎo)。上述結(jié)果表明RIG-1在介導(dǎo)NSCLC細(xì)胞中circNDUFB2的免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用,而circNDUFB2引發(fā)的免疫應(yīng)答不依賴于circNDUFB2中m6A的修飾。
與HuR的RRM3結(jié)合,中斷HuR-β-actinmRNA相互作用,抑制β-actin表達(dá),抑制OPC遷移
為闡明lnc-PMIF如何與HuR相互作用調(diào)節(jié)β-actin表達(dá)和OPC遷移,首先通過生物信息學(xué)分析預(yù)測了lnc-PMIF的二級結(jié)構(gòu),并合成生物素化的全長lnc-PMIF(WT)和截短的lnc-PMIF突變體,分別為突變體A1(無5’莖環(huán)的正義)、突變體A2(有中心莖環(huán)和3’莖環(huán)的正義)和突變體A3(*有3’莖環(huán)的正義1100-1455bp),轉(zhuǎn)染MC3T3-E1細(xì)胞,并進(jìn)行標(biāo)記RNA鏈霉親和素下拉試驗(yàn)。蛋白免疫印跡分析顯示,HuR存在于轉(zhuǎn)染W(wǎng)Tlnc-PMIF、截短lnc-PMIF突變體A1或截短lnc-PMIF突變體A2的細(xì)胞的下拉部分中,但在轉(zhuǎn)染截短lnc-PMIF突變體A3的細(xì)胞的下拉部分中不存在。這些數(shù)據(jù)表明,lnc-PMIF的中心莖環(huán)足以實(shí)現(xiàn)lnc-PMIF和HuR之間的相互作用。 高通量測序后續(xù)的機(jī)制實(shí)驗(yàn)。
一、上傳數(shù)據(jù)
可以上傳原始的fast文件,也可以上傳時(shí)序count表達(dá)文件。按照數(shù)據(jù)情況填寫以下6個(gè)問題,然后點(diǎn)擊“Run”開始進(jìn)行質(zhì)控
二、初級分析
數(shù)據(jù)質(zhì)控合格后,進(jìn)行初級分析,包括:差異表達(dá)量計(jì)算、基因簇分析。差異計(jì)算方法包括ImpulseDE2、NextmaSigPro、DESeq2,可以根據(jù)實(shí)際情況自由選擇。
三、次級分析
次級分析用于評估豐富度、因子結(jié)合和時(shí)間關(guān)系。我們可以選擇不同類型的分析來分析初級分析中獲得的基因簇,即Enrichment,用于識(shí)別基因簇中高表達(dá)的基因;FactorBinding,使用motif和CHIP-seq預(yù)測影響基因簇表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子;TemporalRelations,識(shí)別轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)(GRN)。 提供生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的課題思路設(shè)計(jì)。pcr芯片
產(chǎn)生關(guān)于環(huán)境影響疾病的病因和分子機(jī)制的可測試的假設(shè)。發(fā)育可塑性
女性生殖系統(tǒng)的疾病即為婦科疾病,包括外陰疾病、陰道疾病、子宮疾病、輸卵管疾病、卵巢疾病等。婦科疾病是女性常見病、多發(fā)病。但由于許多人對婦科疾病缺乏應(yīng)有的認(rèn)識(shí),缺乏對身體的保健,加之各種不良生活習(xí)慣等,使生理健康每況愈下,導(dǎo)致一些女性疾病纏身,且久治不愈,給正常的生活、工作帶來極大的不便。
英拜生物推出的婦科疾病風(fēng)險(xiǎn)評估檢測通過風(fēng)險(xiǎn)評估模型來評估個(gè)體疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),其意義在于趨利避害,用于進(jìn)行個(gè)性化健康管理:個(gè)性化保健、個(gè)性化用藥、個(gè)性化預(yù)防、個(gè)性化體檢及采取個(gè)性化的行為生活方式等,**終達(dá)到遠(yuǎn)離婦科疾病的目的。 發(fā)育可塑性
公司特色是以各式高通量二代測序?yàn)榛A(chǔ),利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段,通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái),提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū),實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開放參觀,客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度,保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù):RNA甲基化研究專題,外泌體研究專題,wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究,設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性,為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書申請:提供標(biāo)書課題設(shè)計(jì)、撰寫,標(biāo)書部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開展,設(shè)計(jì)的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn),中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持,探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究:trfRNA,DNA/RNA甲基化,外泌體,自噬,WNT等相關(guān)研究
4.二代測序:轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片:信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn):DNA甲基化實(shí)驗(yàn)(BSP,MSP,焦磷酸測序),RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR(mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA),WB,RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證,過表達(dá),干擾),基因突變及SNP檢測,F(xiàn)ISH,RNA-PULLdown,rip,chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖,凋亡,流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)