作者進(jìn)行了PAR-CLIP實(shí)驗(yàn)，以評(píng)估SLC7A11 mRNA-YTHDC2相互作用是否依賴于m6A甲基化。結(jié)果表明，在H1299細(xì)胞中，通過過表達(dá)METTL3來提高m6A的甲基化水平，促進(jìn)YTHDC2與SLC7A11 mRNA的結(jié)合(圖6D)。無論METTL3是否過表達(dá)，YTH結(jié)構(gòu)域的缺失都阻斷了SLC7A11 mRNA-YTHDC2的相互作用(圖6D)。作者通過SLC7A11 3’-UTR探針進(jìn)行RNA-pull down實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)YTHDC2WT，優(yōu)先結(jié)合于含有m6A的SLC7A11 mRNA的3'UTR，而不是含有未甲基化腺苷的mRNA(圖6E)。此外，YTHDC2傾向于結(jié)合m6A共識(shí)基元GGAC (圖6E)。通過在H1299和H1975細(xì)胞中進(jìn)行METTL3的功能增加和丟失實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)SLC7A11 mRNA-YTHDC2的相互作用是由m6A水平?jīng)Q定的(圖6F和G)。這些數(shù)據(jù)表明YTHDC2優(yōu)先與m6A甲基化的SLC7A11 mRNA結(jié)合。為了闡明胰腺*中m6A水平升高的分子機(jī)制。深圳細(xì)胞骨架調(diào)控因子科研
由于RPS3是NF-κB的重要調(diào)控因子，我們進(jìn)一步分析了circPLCE1對(duì)NF-κB信號(hào)通路的影響。Western blot結(jié)果顯示，過表達(dá)circPLCE1-411導(dǎo)致全細(xì)胞提取物中p-P65表達(dá)降低，細(xì)胞核中P65表達(dá)下調(diào)。正如預(yù)期的那樣，核P65的DNA結(jié)合活性也減弱了。相反，circPLCE1-411敲低則上調(diào)了全細(xì)胞提取物中p-P65的蛋白水平，增加了細(xì)胞核中P65的積累，增強(qiáng)了細(xì)胞核中P65的DNA結(jié)合活性。綜上所述，circPLCE1-411結(jié)合HSP90α的N端，促進(jìn)RPS3與HSP90α/RPS3復(fù)合物的解離，導(dǎo)致RPS3的泛素依賴性降解，抑制NF-κB信號(hào)。成都牙周病科研專注于生命科學(xué)內(nèi)的前沿研究。
急性腎損傷(Acute kidney injury, AKI)是一種起病急、進(jìn)展快、預(yù)后差的嚴(yán)重臨床急癥。**近的證據(jù)表明，AKI伴隨著***的代謝異常，包括脂質(zhì)代謝的改變。然而，脂質(zhì)在AKI中的具體變化及其作用和調(diào)控機(jī)制目前尚不清楚。***小編給大家?guī)碛?021年3月發(fā)表在影響因子8.579的“Theranostics”的文章“Relieving lipid accumulation through UCP1 suppresses the progression of acute kidney injury by promoting the AMPK/ULK1/autophagy pathway”。本研究***系統(tǒng)分析AKI中脂質(zhì)組成的變化，發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)積累程度與UCP1高度相關(guān)。重要的是，通過上調(diào)UCP1緩解AKI中的脂質(zhì)堆積，可以通過促進(jìn)AMPK/ULK1/自噬通路，***抑制AKI的進(jìn)展。
2、在體內(nèi)，慢性暴露于27HC可選擇更具致瘤性和轉(zhuǎn)移性的細(xì)胞目前已建立的聯(lián)系是膽固醇升高和**進(jìn)展相關(guān)，作者認(rèn)為，雖然這些臨床觀察與27HC抑制細(xì)胞增殖的結(jié)果不一致，這可能與本研究中通過使細(xì)胞/**發(fā)生膽固醇/27HC急性升高而建立的高膽固醇血癥模型有關(guān)。為了探索這種可能性，構(gòu)建27HC抗性版本的4T1、Py230、BPD6、HCC1954、MDAMB436和B16F10細(xì)胞，在5μM27HC持續(xù)存在的2D培養(yǎng)中傳代14個(gè)月，直到菌落出現(xiàn)。4T1、Py230和BPD6的27HC敏感和等基因抗性細(xì)胞在2D培養(yǎng)下的時(shí)間/劑量-響應(yīng)生長(zhǎng)曲線如所示。盡管27HC的敏感性存在***差異，但在不含27HC的情況下，敏感細(xì)胞（27HCS）和耐藥細(xì)胞（27HCR）的總體增殖能力相似。然而，當(dāng)作為異種移植物在小鼠體內(nèi)傳播時(shí)，所有這三種細(xì)胞模型的27HC抵抗衍生物都顯示出比27HC敏感的衍生物更具有致瘤性。尾靜脈注射模型評(píng)估敏感和耐藥細(xì)胞的肺轉(zhuǎn)移能力，結(jié)果顯示，在三種模型(4T1,Py230和BPD6)中，對(duì)27HC的抗性與***增加的轉(zhuǎn)移潛能相關(guān)。綜上所述，細(xì)胞在適應(yīng)27HC水平的增加時(shí)，獲得了使它們更具致瘤性和轉(zhuǎn)移性的活性。這些數(shù)據(jù)表明大黃酸***可以改善DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎。
二、偽時(shí)間軌跡，染色質(zhì)可及性和基因表達(dá)分析揭示Flow-Dependent內(nèi)皮細(xì)胞重新編程
我們的分析明確了3種主要的分化細(xì)胞類型:(1)ec，(2)免疫細(xì)胞(巨噬細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞和T細(xì)胞)，以及(3)SMCs和纖維細(xì)胞(圖3A)。此外，在每一細(xì)胞類型走向的軌跡路徑上，還有許多其他細(xì)胞出現(xiàn)，表明它們響應(yīng)d-flow的過渡性去分化狀態(tài)。為了更好地理解軌跡結(jié)果，我們將分析分為四種實(shí)驗(yàn)條件(圖3B)。在s-flow條件下(2D-R和2W-R)，大部分細(xì)胞分化良好，少數(shù)細(xì)胞處于過渡狀態(tài)。相反，d-flow條件誘導(dǎo)許多ec進(jìn)入過渡狀態(tài)，潛在地向smc和纖維轉(zhuǎn)化分化，表明EndMT。令人驚訝的是，我們還發(fā)現(xiàn)許多ec在急性d-flow條件下(2D-L)向免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)移，在慢性d-flow條件下(2W-L)進(jìn)一步增加。 我們?cè)谌祟愐认?細(xì)胞系中過表達(dá)或敲除METTL14。CAR-T科研省自然科學(xué)基金
N6甲基腺苷（m6A）是一種常見的真核細(xì)胞mRNA修飾。深圳細(xì)胞骨架調(diào)控因子科研
IL-3/IL-4能誘導(dǎo)M2巨噬細(xì)胞極化，預(yù)先用50ng/mLIL-3/IL-4處理THP-1細(xì)胞3天，驗(yàn)證anti-miR-934對(duì)M2巨噬細(xì)胞極化的影響。結(jié)果顯示PTEN過表達(dá)部分減弱了miR-934和HCT-8細(xì)胞來源外泌體對(duì)M2標(biāo)記物(CD206,arginase-1和IL10)表達(dá)的增強(qiáng)作用，而PTEN的沉默則相應(yīng)地逆轉(zhuǎn)了anti-miR-934對(duì)M2標(biāo)記物表達(dá)的衰減效應(yīng)（Fig.5g,i）。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)M2巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD163在PMA處理的THP-1細(xì)胞中的表達(dá)，結(jié)果與上述結(jié)果一致（Fig.5j）?？傊?，研究結(jié)果表明，miR-934增強(qiáng)了CRC細(xì)胞來源的外泌體對(duì)M2巨噬細(xì)胞極化誘導(dǎo)的增強(qiáng)作用，而anti-miR-934減弱了其增強(qiáng)作用。
深圳細(xì)胞骨架調(diào)控因子科研
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開放參觀，客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書申請(qǐng)：提供標(biāo)書課題設(shè)計(jì)、撰寫，標(biāo)書部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測(cè)序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測(cè)，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)