VD以VDR依賴的方式調(diào)控AMPK
由于維生素D通過VDR發(fā)揮其比較大的生物學(xué)作用，我們使用HK-2VDRKO細胞研究VD是否通過VDR***AMPK。結(jié)果表明l，paricalcitol增加了PRKAA1和ULK1的磷酸化，而在高糖條件下則降低了PRKAA1和ULK1的磷酸化。而在HK-2VDRKO細胞中，這種作用完全消失。此外， 二甲雙胍在高糖條件下***了HK-2WT細胞中的PRKAA1和ULK1，但二甲雙胍的這種作用在HK-2VDRKO細胞中仍然可以觀察到。這些結(jié)果表明VD以VDR依賴的方式***AMPK。 英拜的員工福利待遇很好。北京上皮細胞科研
6、外泌體miR-138-5p促進乳腺*肺轉(zhuǎn)移
極化的巨噬細胞在決定**細胞的表型中起著重要的作用。因此，探究M2巨噬細胞外泌體miR-138-5p處理是否有助于乳腺*小鼠異**模型的**轉(zhuǎn)移。使用氯膦酸鈉***小鼠巨噬細胞，然后轉(zhuǎn)移使用過表達miR-138-5p的T47D或T47D細胞來源的外泌體處理的Raw264.7細胞。小鼠模型通過尾靜脈注射4T1-熒光素酶細胞構(gòu)建（圖6A）。結(jié)果顯示，外泌體miR-138-5p處理組***促進小鼠體內(nèi)乳腺*細胞的**體積和肺轉(zhuǎn)移，同時增加了CD206和Arg-1陽性細胞數(shù)（圖6B-E）。這些結(jié)果表明外泌體miR-138-5p誘導(dǎo)的M2巨噬細胞促進乳腺*的肺轉(zhuǎn)移。 配體科研省自然科學(xué)基金血清或尿液中尿酸濃度的升高與痛風(fēng)腎臟和血管疾病密切相關(guān)。
為了驗證tRFs&tiRNA-Seq數(shù)據(jù)，作者檢測了91對PTC組織和*旁組織中tRFs&tiRNA的表達，其中，tiRNA-Gly在人類PTC組織中的表達水平比較高，并***高于*旁組織（圖1F-G）。WB顯示，tiRNA-Gly在PTC**中蛋白表達***高于*旁，但是tRNA-Gly的表達在*和*旁中無***差異（圖1H）?？傊?，tiRNA-Gly可能在PTC的進展中起致*作用。
在小鼠模型中，tiRNA-Gly調(diào)節(jié)PTC細胞的增殖和遷移，并影響**生長
首先檢測了tiRNA-Gly在3株P(guān)TC細胞系中的表達，如圖2A所示，K1細胞系中tiRNA-Gly的表達***低于BCPAP和TPC-1細胞系。因此，對于功能獲得性實驗，合成帶有5’磷酸末端的tiRNA-Gly轉(zhuǎn)染至K1細胞系（圖2B）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，tiRNA-Gly***促進K1細胞的增殖和遷移（圖2C-D）。對于功能缺失實驗，在BCPAP和TPC-1細胞系中轉(zhuǎn)染siRNA干擾tiRNA-Gly的表達，結(jié)果顯示細胞的增殖和遷移都***下降（圖2E-G）。體內(nèi)實驗得出了類似的結(jié)果，干擾tiRNA-Gly表達導(dǎo)致**體積減小，Ki67表達下降?？傊w內(nèi)體外實驗都表明tiRNA-Gly是PTC的惡性因子。
乳腺*細胞外泌體增加TPH-1細胞中miR-138-5p的表達但抑制KDM6B的表達，但這種作用被miR-138-5p抑制劑處理廢除（圖3F-G）。轉(zhuǎn)染miR-138-5pmimic的乳腺*細胞增加了外泌體miR-138-5p的水平（圖3H）。過表達miR-138-5p的乳腺*細胞外泌體增加了miR-138-5p水平，抑制了THP-1細胞中KDM6B的表達（圖3I-J）。總之，這些結(jié)果表明，*細胞分泌的外泌體miR-138-5p被傳遞到巨噬細胞中，并抑制KDM6B。
4、外泌體miR-138-5p通過抑制KDM6B表達調(diào)節(jié)巨噬細胞極化
隨后，作者研究了在不同培養(yǎng)條件下TPH-1的表達譜。首先，和**細胞共培養(yǎng)抑制了M1相關(guān)基因的表達，IL-6，TNF-α，和IL-1β，但是增加了M2相關(guān)基因的表達CD163，Arg-1，IL-10,TGF-β和VEGFA。過表達KDM6B部分抑制了上述表現(xiàn)改變（圖4A-B）。流式檢測顯示乳腺*細胞和TPH-1的共培養(yǎng)增加了CD163陽性細胞數(shù)比例，但是過表達KDM6N可以抑制這種效果（圖6C）。類似的，過表達KDM6B抑制了miR-138-5p誘導(dǎo)的M2極化（圖4D-F）。 大黃酸導(dǎo)致嘌呤代謝正?；湍c道尿酸水平的降低。
2）USP35敲除促進肺*細胞的鐵死亡
我們研究了shUSP35介導(dǎo)的**抑制是否可歸因于細胞死亡的誘導(dǎo)。如圖2A，B所示，用Nec-1，Z-VAD和CQ***以抑制壞死、凋亡和自噬并不影響細胞凋亡，表明可能涉及其他形式的細胞死亡。鐵死亡是一種新的調(diào)節(jié)性細胞死亡，它與包括肺*在內(nèi)的**生長的發(fā)病機制有關(guān)。因此，我們使用兩種鐵死亡抑制劑，F(xiàn)er-1和Lip-1，探索了鐵死亡是否導(dǎo)致USP35沉默后的肺細胞死亡。如圖2A，B所示，鐵死亡抑制阻斷了H460和H1299細胞中shUSP35介導(dǎo)的細胞死亡。在shUSP35***的細胞中，集落形成被抑制，但被Fer-1和Lip1破壞(圖2C)。 上海英拜生物提供可靠可信可參觀的實驗平臺。配體科研省自然科學(xué)基金
大黃酸能緩解D。SS誘導(dǎo)的小鼠慢性結(jié)腸炎。北京上皮細胞科研
與HuR的RRM3結(jié)合，中斷HuR-β-actinmRNA相互作用，抑制β-actin表達，抑制OPC遷移
為闡明lnc-PMIF如何與HuR相互作用調(diào)節(jié)β-actin表達和OPC遷移，首先通過生物信息學(xué)分析預(yù)測了lnc-PMIF的二級結(jié)構(gòu)，并合成生物素化的全長lnc-PMIF（WT）和截短的lnc-PMIF突變體，分別為突變體A1（無5’莖環(huán)的正義）、突變體A2（有中心莖環(huán)和3’莖環(huán)的正義）和突變體A3（*有3’莖環(huán)的正義1100-1455bp），轉(zhuǎn)染MC3T3-E1細胞，并進行標(biāo)記RNA鏈霉親和素下拉試驗。蛋白免疫印跡分析顯示，HuR存在于轉(zhuǎn)染W(wǎng)Tlnc-PMIF、截短lnc-PMIF突變體A1或截短lnc-PMIF突變體A2的細胞的下拉部分中，但在轉(zhuǎn)染截短lnc-PMIF突變體A3的細胞的下拉部分中不存在。這些數(shù)據(jù)表明，lnc-PMIF的中心莖環(huán)足以實現(xiàn)lnc-PMIF和HuR之間的相互作用。 北京上皮細胞科研
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