4）SsD通過(guò)直接抑制FTOm6A去甲基化活性來(lái)誘導(dǎo)m6A修飾
為了檢測(cè)m6A在RNA上的變化，我們?cè)赟sD處理的白血病細(xì)胞中進(jìn)行了m6A點(diǎn)印跡實(shí)驗(yàn)。如圖4A所示，SsD***增加了m6A在轉(zhuǎn)錄組中的豐度。此外，HPLC-MS/MS定量證實(shí)了SsD處理的NB4和Kas-1細(xì)胞mRNA中細(xì)胞m6A的增加(圖4B)。接下來(lái)，我們檢測(cè)了FTO的兩個(gè)直接靶點(diǎn)MYC和RARA在SsD處理的細(xì)胞中的表達(dá)。SsD在mRNA和蛋白水平***下調(diào)了NB4和Kas-1細(xì)胞的MYC，而上調(diào)了RARA(圖4C-D)。有趣的是，SsD依賴的MYC和RARA的減少是由于FTO過(guò)表達(dá)細(xì)胞中mRNA和蛋白穩(wěn)定性的降低(圖4E-4H)。綜上所述，這些結(jié)果證明了FTO及其下游靶點(diǎn)(如MYC,RARA)是FTO過(guò)表達(dá)白血病細(xì)胞中SsD的主要效應(yīng)因子。 評(píng)估了成對(duì)*組織和鄰近組織樣本中**重要的m6A調(diào)節(jié)因子（METTL3、METTL14和WTAP）的表達(dá)。自噬醫(yī)學(xué)相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)可參觀
近日，美國(guó)圣路易斯華盛頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院Yoshiharu Muto教授等在Nature communications發(fā)布了Single cell transcriptional and chromatin accessibility profiling redefine cellular heterogeneity in the adult human kidney的研究論文。文中，作者采用單細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄組snRNA-seq和單細(xì)胞核染色質(zhì)可及性snATAC-seq技術(shù)，對(duì)5個(gè)健康成人（50歲到62歲，男性(n = 3)和女性(n = 2)）腎臟樣本進(jìn)行檢測(cè)。此文揭示腎臟內(nèi)獨(dú)特的細(xì)胞狀態(tài)，并重新定義近端小管和粗升肢的細(xì)胞異質(zhì)性。上?？蒲匈?zèng)送提供技術(shù)路線我們?cè)谌祟?lèi)胰腺*細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)或敲除METTL14。
根據(jù)以往的研究，DDX5可以結(jié)合p50，并協(xié)助IκB釋放p50。本研究還揭示了293T和MDA-MB231中DDX5與p50的結(jié)合(圖6E)。此外，有報(bào)道稱DRD2可在神經(jīng)系統(tǒng)中與EGFR結(jié)合。在BrCa細(xì)胞中，293T和MDA-MB231中也證實(shí)了DRD2和EGFR的結(jié)合(圖6E)。DRD2的表達(dá)下調(diào)ERBB1 (EGFR)和ERBB2 (HER2)的表達(dá)(圖6F)。在異位表達(dá)DRD2的BrCa細(xì)胞中，DDX5可以促進(jìn)p-IκBα的磷酸化，增加磷酸化p65的蛋白水平(圖6G)。eEF1A2可直接***上調(diào)p-p65的表達(dá)，而不影響IKKα/β或IκBα，甚至在沒(méi)有LPS的情況下，eEF1A2可上調(diào)表達(dá)DRD2的MDA-MB231的p-p65蛋白水平(圖6G)。以上結(jié)果表明，DDX5和eEF1A2對(duì)NF-κB信號(hào)通路的促進(jìn)作用受DRD2異位表達(dá)的抑制。
結(jié)論：這項(xiàng)研究新發(fā)現(xiàn)了一種**抑制基因-DRD2，可以提高BrCa患者的生存率和PTX***反應(yīng)。DRD2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和壞死，并在Mφ向M1重編程過(guò)程中進(jìn)一步觸發(fā)焦亡。DRD2通過(guò)與β-arrestin2結(jié)合，下調(diào)DDX5和eEF1A2，從而限制NF-κB信號(hào)通路的***。DRD2是一種潛在的預(yù)測(cè)預(yù)后的生物標(biāo)志物，并且DRD2是BrCa中一個(gè)很有前途的***靶點(diǎn)。
5、MAO-A阻斷**免疫***-小鼠**模型研究
MAO-A作為T(mén)AM免疫抑制極化的關(guān)鍵調(diào)控因子的鑒定使得MAO-A成為**免疫***的一個(gè)有前途的藥物靶點(diǎn)。由于已知的MAO-A在大腦中的功能，小分子MAOIs已經(jīng)被開(kāi)發(fā)和臨床用于***各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病，使其成為一種高度可行和有吸引力的方法來(lái)重新利用這些已建立的MAOI藥物用于**免疫***。在體外IL-4/IL-13誘導(dǎo)WTBMDM極化培養(yǎng)中（圖5a），添加多種MAOIs可以有效降低BMDM中的ROS水平，抑制它們的免疫抑制極化和基因（圖5b-e）。值得注意的是，圖5a測(cè)試的MAOIs包括苯乙肼、克勞吉林、莫氯比胺和吡吲哚，涵蓋了已建立的MAOIs的主要類(lèi)別，這些類(lèi)別是基于它們對(duì)MAO-A是非選擇性的還是選擇性的，以及它們的作用是否可逆。 大黃酸改變嘌呤代謝降低尿酸水平。
為了研究ESCRT-III在ferroptosis中的功能作用，作者評(píng)估了抑制CHMP4B對(duì)NIH-3T3細(xì)胞死亡的影響(圖5A, B)。與對(duì)照組相比，CHMP4B敲除細(xì)胞的死亡發(fā)生率更高、更快，特別是在早期時(shí)間點(diǎn)(1-3 h)，這表明CHMP4B的缺失導(dǎo)致細(xì)胞對(duì)ferroptosis的敏感性更高。另外，作者使用蛋白質(zhì)組譜儀XL細(xì)胞因子陣列試劑盒(圖5C)，確定ferroptosis是否可以直接調(diào)節(jié)不同細(xì)胞系和不同處理下的細(xì)胞因子分泌。在誘導(dǎo)ferroptosis時(shí)，作者檢測(cè)到細(xì)胞因子亞群水平的變化，這些變化與細(xì)胞系和***有關(guān)。此外，敲除CHMP4B改變了RSL3處理后獲得的細(xì)胞因子譜(圖5C, D)。這些結(jié)果表明，盡管具體的細(xì)胞因子改變依賴于***，但ESCRT-III通常影響ferroptotic細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌。另外，RSL3處理的沉默CHMP4B細(xì)胞的上清能夠增加小鼠巨噬細(xì)胞的CD14表面表達(dá)(圖5E)。這些結(jié)果表明，與壞死和焦亡相似，ESCRT-III也調(diào)節(jié)ferroptotic細(xì)胞的免疫輸出。
結(jié)論：ESCRT-III在ferroptosis微環(huán)境中調(diào)節(jié)細(xì)胞因子水平，揭示了這一機(jī)制在調(diào)控ferroptosis炎癥的作用。這些發(fā)現(xiàn)支持了一個(gè)普遍的模型，在這個(gè)模型中，質(zhì)膜孔的形成和膜修復(fù)是控制不同類(lèi)型的壞死及其炎癥特征的中心和相反的調(diào)控機(jī)制。 為了闡明胰腺*中m6A水平升高的分子機(jī)制。單細(xì)胞相關(guān)課題科研地區(qū)科學(xué)基金
上海英拜生物設(shè)有專業(yè)的武漢技術(shù)中心。自噬醫(yī)學(xué)相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)可參觀
此外，Ago2 RIP 分析表明 miR-1252-5p、circ_0072083、ALKBH5 和 NANOG 可以在同一復(fù)合物上富集。此外，在U251/TR和U87/TR 細(xì)胞中，通過(guò)circ_0072083 沉默，miR-1252-5p 水平明顯增強(qiáng)。miR-1252-5p 過(guò)表達(dá)顯著降低了 U251/TR 和 U87/TR 細(xì)胞中的 ALKBH5 和 NANOG 水平。此外，在用 sh-NC + anti-NC、sh-circ_0072083 + anti-NC 或 sh-circ_0072083 + anti-miR-1252-轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中研究了 circ_0072083/miR-1252-5p 軸對(duì) ALKBH5 和 NANOG 水平的影響。ALKBH5和NANOG 水平通過(guò)circ_0072083沉默顯著降低，這通過(guò)miR-1252-5p 敲低恢復(fù)。此外，miR-1252-5p 敲低逆轉(zhuǎn)了 circ_0072083沉默介導(dǎo)的 TMZ IC50 降低、細(xì)胞增殖、遷移和侵襲以及促進(jìn) U251/TR 和 U87/TR 細(xì)胞凋亡。這些結(jié)果表明 circ_0072083 可以調(diào)節(jié) miR-1252-5p/ALKBH5/NANOG 軸以控制膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的 TMZ 抗性。自噬醫(yī)學(xué)相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)可參觀
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