6）NOX4誘導(dǎo)的線粒體代謝損傷通過(guò)抑制人類(lèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞抗氧化過(guò)程而誘導(dǎo)氧化應(yīng)激
我們研究了NOX4誘導(dǎo)的線粒體代謝損傷是否可以通過(guò)抑制人體星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞抗氧化過(guò)程來(lái)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激。與對(duì)照組相比，NOX4的升高***降低了谷胱甘肽(GSH)水平和谷胱甘肽/氧化谷胱甘肽(GSSG)的比值(圖6A和B)。NOX4的升高也增加了GSSG的水平(圖6C)。由于NOX4導(dǎo)致GSH減少以及GSH/GSSG比值降低，我們接下來(lái)研究NOX4是否可以影響人類(lèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞中NRF2信號(hào)通路，這是細(xì)胞抗氧化反應(yīng)的關(guān)鍵調(diào)控因子。與對(duì)照組相比，NOX4的升高抑制了NRF2在細(xì)胞質(zhì)中的核易位(圖6D)。此外，NRF2靶基因HO-1和GCL的水平和活性在人星形膠質(zhì)細(xì)胞中被NOX4過(guò)表達(dá)***抑制(圖6E和F)。這些結(jié)果表明，NOX4誘導(dǎo)的線粒體代謝損傷通過(guò)抑制人星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞抗氧化過(guò)程而誘導(dǎo)氧化應(yīng)激。 課題CRO服務(wù)找上海英拜。炎癥課題服務(wù)價(jià)格
此外，Ago2 RIP 分析表明 miR-1252-5p、circ_0072083、ALKBH5 和 NANOG 可以在同一復(fù)合物上富集。此外，在U251/TR和U87/TR 細(xì)胞中，通過(guò)circ_0072083 沉默，miR-1252-5p 水平明顯增強(qiáng)。miR-1252-5p 過(guò)表達(dá)顯著降低了 U251/TR 和 U87/TR 細(xì)胞中的 ALKBH5 和 NANOG 水平。此外，在用 sh-NC + anti-NC、sh-circ_0072083 + anti-NC 或 sh-circ_0072083 + anti-miR-1252-轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中研究了 circ_0072083/miR-1252-5p 軸對(duì) ALKBH5 和 NANOG 水平的影響。ALKBH5和NANOG 水平通過(guò)circ_0072083沉默顯著降低，這通過(guò)miR-1252-5p 敲低恢復(fù)。此外，miR-1252-5p 敲低逆轉(zhuǎn)了 circ_0072083沉默介導(dǎo)的 TMZ IC50 降低、細(xì)胞增殖、遷移和侵襲以及促進(jìn) U251/TR 和 U87/TR 細(xì)胞凋亡。這些結(jié)果表明 circ_0072083 可以調(diào)節(jié) miR-1252-5p/ALKBH5/NANOG 軸以控制膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的 TMZ 抗性。醫(yī)學(xué)相關(guān)課題分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供整體課題外包實(shí)驗(yàn)構(gòu)思。
2）阿爾茨海默病患者皮質(zhì)區(qū)受損星形膠質(zhì)細(xì)胞中氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化水平升高
由于NOX4蛋白水平在AD患者受損星形膠質(zhì)細(xì)胞中升高，我們研究NOX4在AD患者受損星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化應(yīng)激中的作用。我們用免疫熒光染色法檢測(cè)了AD患者或非AD供者大腦顳葉皮質(zhì)組織中GFAP陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞中4-HNE的蛋白水平(圖2A)。免疫熒光染色顯示，AD患者(AD)皮質(zhì)區(qū)分子層GFAP陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞中4-HNE陽(yáng)性染色強(qiáng)度相對(duì)于非AD供者增加(圖2A、B)。此外，AD患者皮質(zhì)區(qū)ML中受損的GFAP陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞4-HNE陽(yáng)性染色強(qiáng)度高于非AD供者(圖2A和B)。AD患者中4-HNE與GFAP亞細(xì)胞共定位陽(yáng)性的受損星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量***增加(圖2C)。此外，相對(duì)于非AD供體，4-HNE在AD患者的NOX4陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞***定位(圖2D)。AD患者的NOX4和4-HNE陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量相對(duì)于非AD供者***增加(圖2E)。這些結(jié)果提示AD患者受損星形膠質(zhì)細(xì)胞中氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化水平升高。
瀏覽工具將PROTAC-DB中的數(shù)據(jù)歸納為兩類(lèi)：“目標(biāo)瀏覽”和“化合物瀏覽”。目標(biāo)瀏覽將在“PROTAC”、“彈頭”、“E3配體”和“Linker”類(lèi)別選項(xiàng)卡下顯示目標(biāo)蛋白質(zhì)的名稱(chēng)列表，點(diǎn)擊列表中選定的蛋白質(zhì)將跳轉(zhuǎn)到與該蛋白質(zhì)相對(duì)應(yīng)的所有化合物的列表?；衔餅g覽主要用于可視化“PROTAC”、“彈頭”、“E3配體”和“Linker”類(lèi)標(biāo)簽下所有化合物的二維結(jié)構(gòu)。此外，在“PROTAC”、“彈頭”和“E3配體”類(lèi)標(biāo)簽下還將展示生物活性。
可視化和過(guò)濾數(shù)據(jù)表中的結(jié)果查詢或?yàn)g覽結(jié)果顯示為數(shù)據(jù)表，包含2D結(jié)構(gòu)和其他信息，如化合物ID、目標(biāo)蛋白質(zhì)和生物活性(圖2)。 TIMEOR用于推斷基因調(diào)控事件之間的關(guān)系。
4、CDK4/6預(yù)處理增強(qiáng)功能性記憶CD8+T細(xì)胞的持久性
長(zhǎng)期生存能力是T細(xì)胞記憶的基本特征。為了確定CDK4/6i處理的細(xì)胞在體內(nèi)是否表現(xiàn)出優(yōu)越的存活率，將未處理和CDK4/6i預(yù)處理的體外活化CD45.1OT-iT細(xì)胞轉(zhuǎn)移至同源CD45.2小鼠中，并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)評(píng)價(jià)其隨時(shí)間的持續(xù)性和表型（Fig.4A）。在30天內(nèi)，在血液和脾臟中檢測(cè)到的預(yù)處理OT-I-T細(xì)胞的頻率明顯更高（Fig.4B）。30天后，未處理和預(yù)處理的OT-I-T細(xì)胞在血液和脾臟中的表型持久性相似，都具有記憶前體的特征(MPECs;KLRG1-CD127+)(Fig.4C)。為了評(píng)價(jià)CDK4/6i處理細(xì)胞的記憶能力，將未處理或體外活化的CD45.1OT-iT細(xì)胞中預(yù)處理的細(xì)胞再次轉(zhuǎn)移至同源CD45.2宿主中。30d后，分離出OT-ⅠT細(xì)胞，等量重新轉(zhuǎn)移到同時(shí)***李斯特菌-OVA(LM-OVA)的新宿主中（Fig.4D)。未處理和預(yù)處理的OT-IT細(xì)胞在LM-OVA***后擴(kuò)增和分化，迅速獲得功能性、產(chǎn)生細(xì)胞因子的SLEC表型(KLRG1+CD127-)（Fig.4E-F）。這些表明CDK4/6抑制驅(qū)動(dòng)T細(xì)胞記憶的表型和功能獲得。 caspase-3抗體是一種***用于檢測(cè)凋亡細(xì)胞的標(biāo)志物。泌尿課題實(shí)驗(yàn)外包
產(chǎn)生關(guān)于環(huán)境影響疾病的病因和分子機(jī)制的可測(cè)試的假設(shè)。炎癥課題服務(wù)價(jià)格
5）上調(diào)UCP1緩解AKI期間的脂質(zhì)積累，***抑制疾病進(jìn)展
為了在體內(nèi)驗(yàn)證脂質(zhì)對(duì)AKI功能的影響，我們通過(guò)在腎臟多點(diǎn)注射過(guò)表達(dá)UCP1腺病毒，構(gòu)建過(guò)表達(dá)UCP1動(dòng)物模型，以消除脂質(zhì)在AKI中的堆積。在UCP1過(guò)表達(dá)動(dòng)物模型中，腎損傷指標(biāo)NGAL明顯降低(圖5A)。HE和PAS染色顯示腎臟形態(tài)有很大改善，腎小管損傷評(píng)分顯示，在UCP1介導(dǎo)的脂質(zhì)消耗增加后，腎小管損傷程度明顯降低(圖5B-C)。順鉑刺激后腎小管呈空泡變性，細(xì)胞扁平，管腔擴(kuò)張，而UCP1過(guò)表達(dá)明顯改善了病理改變。血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)這兩項(xiàng)腎臟損傷指標(biāo)也出現(xiàn)了類(lèi)似的***下降(圖5D-E)。利用UCP1激動(dòng)劑CL316243在AKI動(dòng)物模型中緩解脂堆積，進(jìn)一步驗(yàn)證了上述結(jié)果。***后NGAL***降低(圖5F)，腎臟形態(tài)、腎小管損傷評(píng)分、SCr、BUN均***改善(圖5G-J)。因此，在體內(nèi)，上調(diào)UCP1以緩解AKI脂質(zhì)積累可以抑制AKI進(jìn)展。 炎癥課題服務(wù)價(jià)格
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過(guò)英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫(xiě)SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開(kāi)發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開(kāi)放參觀，客戶可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專(zhuān)題，外泌體研究專(zhuān)題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書(shū)奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書(shū)申請(qǐng)：提供標(biāo)書(shū)課題設(shè)計(jì)、撰寫(xiě)，標(biāo)書(shū)部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書(shū)均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測(cè)序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過(guò)表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測(cè)，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)