NRF2是阻斷鐵死亡的關(guān)鍵介質(zhì)，TYRO3過表達(dá)的293T細(xì)胞中NRF2轉(zhuǎn)錄活性增加。TAM激酶下游的PI3K/AKT信號通路可增加NRF2轉(zhuǎn)錄活性，TYRO3-OE介導(dǎo)的NRF2轉(zhuǎn)錄***被AKT抑制劑MK2206消除。這些結(jié)果表明TYRO3通過AKT/NRF2軸抑制鐵死亡。吞噬細(xì)胞對瀕死細(xì)胞的***依賴于對凋亡細(xì)胞暴露的“吃我信號”的識別。磷脂酰絲氨酸(PS)是一種關(guān)鍵的“吃我”分子，可與橋接分子結(jié)合，如TAM激酶配體蛋白S(Pros1)和Gas6。Pros1在與PS結(jié)合時同時***TYRO3。Pros1處理4T1和PY8119**細(xì)胞可抑制erastin誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化作用，表明凋亡細(xì)胞的Pros1“吃我”信號可以通過TYRO3抑制**細(xì)胞鐵死亡。Pex衍生的CD44v6/C1QBP復(fù)合物介導(dǎo)了Pex對肝纖維化和PDAC肝轉(zhuǎn)移的積極作用。廣西課題免費(fèi)設(shè)計(jì)
3）CircMAPK1在體內(nèi)抑制胃*的發(fā)生和轉(zhuǎn)移
為了進(jìn)一步證實(shí)體外研究結(jié)果，我們在體內(nèi)驗(yàn)證了circMAPK1在影響致瘤性方面的生物學(xué)作用。circMAPK1的沉默可***促進(jìn)**的生長。相比之下，過表達(dá)circMAPK1***抑制了皮下**的生長(圖3a)。接下來，我們通過對增殖細(xì)胞標(biāo)記物Ki67的染色來監(jiān)測異種移植瘤的增殖。穩(wěn)定敲除circMAPK1的**組織表現(xiàn)出更強(qiáng)的Ki67染色，而過表達(dá)circMAPK1的**組織表現(xiàn)出更弱的Ki67染色(圖3b和c)。為了研究circMAPK1在體內(nèi)的轉(zhuǎn)移潛能，我們用熒光素酶質(zhì)粒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染上述細(xì)胞系，然后注射到裸鼠的尾靜脈中。結(jié)果顯示，circMAPK1的敲低有效地增加了肺轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)量和大小。相比之下，生物發(fā)光成像(圖3d和e)和H&E染色(圖3f和g)顯示，過表達(dá)circMAPK1減少了肺轉(zhuǎn)移病變。 河南課題國家自然科學(xué)基金英拜生物致力于分子生物行業(yè)十余年。
通過U251細(xì)胞異種移植模型研究了外泌體circ_0072083對體內(nèi)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長的影響。通過 PBS + TMZ (20 mg/kg)、U251/TR-sh-NC EXO (10 μg) + TMZ (20 mg/kg) 或 U251/TR-sh-circ_0072083 EXO (10 μg) 處理異種移植小鼠+ TMZ（20 mg/kg）。通過添加 U251/TR-sh-NC EXO 顯著增加了**體積和重量，而通過引入 U251/TR-sh-circ_0072083 EXO 可以減輕這種情況。此外，U251/TR-sh-NC EXO+TMZ組**組織中circ_0072083、ALKBH5和NANOG的豐度明顯增加，miR-1252-5p表達(dá)降低，而這些事件在U251/TR-sh中逆轉(zhuǎn)-circ_0072083 EXO + TMZ 組。這些結(jié)果表明外泌體 circ_0072083 增加了敏感細(xì)胞中的 TMZ 抗性。
環(huán)狀RNA（circRNA）是動植物中一類豐富且保守的RNA。**近的研究表明，circRNA可以通過充當(dāng)非編碼RNA或編碼RNA發(fā)揮多種生物學(xué)作用。體外合成的circRNA可以不依賴于帽的方式進(jìn)行翻譯。但鑒定circRNA編碼的蛋白質(zhì)是困難的，主要是因?yàn)閏ircRNA序列及其宿主基因的同源線性mRNA具有較大的重疊。近期NucleicAcidsResearch雜志在線發(fā)表了題名為：TransCirc:aninteractivedatabasefortranslatablecircularRNAsbasedonmulti-omicsevidence的文章，該文章主要講述了circRNA翻譯預(yù)測和分析的數(shù)據(jù)庫——TransCirc。提供***科研設(shè)計(jì)咨詢及輔助實(shí)驗(yàn)。
2、CDK4/6i介導(dǎo)的CD8+T細(xì)胞記憶獲得是細(xì)胞固有的
為了確定在CDK4/6i處理的**中觀察到的T細(xì)胞記憶是否由于CDK4/6在這些細(xì)胞內(nèi)的直接抑制，在體外將活化的小鼠CD8+T細(xì)胞暴露于CDK4/6i中，并監(jiān)測Tcm獲取和分裂數(shù)。***CDK4/6i暴露0、24、72h后，Tcm細(xì)胞平均分裂數(shù)減少，同時細(xì)胞比例增加，且呈劑量依賴性，*在24h內(nèi)發(fā)生(Fig.2A)。這表明CDK4/6i不是簡單地抑制分化，而是直接促進(jìn)記憶形成，表明細(xì)胞周期機(jī)制與分化之間存在方向性關(guān)系。通過3'RNA-seq進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，在CDK4/6i處理后，記憶相關(guān)轉(zhuǎn)錄本增加，GSEA分析證實(shí)了記憶相關(guān)特征的富集，以及細(xì)胞周期相關(guān)特征的減少，包括E2F靶點(diǎn)(Fig.2B-E)。矛盾的是，CDK4/6抑制也誘導(dǎo)了效應(yīng)相關(guān)轉(zhuǎn)錄本，包括Gzma、Gzmc和Pdcd1(Fig.2B-C)，這與之前CDK4/6i促進(jìn)T細(xì)胞活化的報(bào)道一致。 我們接下來研究了Pex對HSCs生物學(xué)行為的影響。河南課題國家自然科學(xué)基金
按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)路線和實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行文章的構(gòu)思與潤色。廣西課題免費(fèi)設(shè)計(jì)
滲透活性劑保護(hù)細(xì)胞防止ferroptosis
氣孔形成是不同類型調(diào)控細(xì)胞死亡的共同特征。質(zhì)膜孔的打開導(dǎo)致水分子的流入，這是由于無法通過膜孔的高濃度細(xì)胞內(nèi)大分子造成的滲透失衡的結(jié)果(圖3A)。這種效果可以通過添加不能夠通過孔進(jìn)入細(xì)胞的適當(dāng)大小的滲透保護(hù)劑peg來阻止，從而平衡細(xì)胞內(nèi)滲透壓、水流入和隨后的細(xì)胞坍塌(圖3B)。加入1.8nm的peg并不能阻止胞質(zhì)Ca2+的增加、細(xì)胞圓化或細(xì)胞死亡(圖3C-F)。相比之下，在peg(2.3nm和2.7nm)的存在下，胞質(zhì)Ca2+水平的增加和細(xì)胞死亡均以尺寸依賴的方式延遲(圖3D,F)。PEG(2.7nm)對ferroptosis的保護(hù)作用在洗滌后恢復(fù)，這表明膜損傷隨時間的推移是穩(wěn)定的(圖3G)。我們還發(fā)現(xiàn)，PEG(2.7nm)并不能阻止RSL3處理的NIH-3T3細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化(圖3H,I)。對于使用的所有PEG大小，NIH-3T3細(xì)胞處理較長時間(24h)后細(xì)胞死亡恢復(fù)(圖3J)。PEG對ferroptosis動力學(xué)的抑制作用也隨著RSL3濃度的增加而降低(圖3K,L)。**終作者以在較低濃度RSL3下能夠起到保護(hù)作用的PEG尺寸作為參考，得出質(zhì)膜穿孔部分的半徑約為2.5nm(圖3L)。 廣西課題免費(fèi)設(shè)計(jì)
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