miRNA芯片,microRNA-Seq數(shù)據(jù)深度發(fā)掘分析：a)芯片,測序數(shù)據(jù)聚類分析b)microRNA靶基因預(yù)測"TargetScanS*"，“miRanda(miRBase)"。"miRGen"等數(shù)據(jù)庫預(yù)測差異microRNA的所有靶基因。c)靶基因GO分析根據(jù)GeneOntology數(shù)據(jù)庫對靶基因進(jìn)行功能***分析,從而篩選顯菩性功能的靶基因。d)靶基因pathway分析根據(jù)KEGG數(shù)據(jù)庫對靶基因進(jìn)行Pathway分類,并進(jìn)行顯菩性分析從而得到顯菩性的Pathway分類。e)構(gòu)建的MicroRNA與基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)通過構(gòu)建MicroRNA與基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。實(shí)時熒光定量PCR能夠?qū)?-.靈敏、快速、高重復(fù)性地精確定量起始模板濃度。單細(xì)胞相關(guān)課題技術(shù)服務(wù)服務(wù)價格
PCR-LDR技術(shù)分型實(shí)驗流程：1)通過多重PCR(MultiplexPCR)獲得含有待檢測突變位點(diǎn)的基因片斷，2)進(jìn)行多重LDR(MultiplexLDR)進(jìn)行特異性分型檢測。3)***通過測序儀電泳讀取檢測結(jié)果。LDR是利用高溫連接靜實(shí)現(xiàn)對基因多多態(tài)性位點(diǎn)的識別。超存迅連接酶一旦利到DA與互樸的阿吳寺聚核行酸接關(guān)對應(yīng)處存在著基因點(diǎn)突變類型的堿基錯配，則連接反應(yīng)就不能進(jìn)行。2.1標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)流程1)客戶溝通，確認(rèn)實(shí)驗位點(diǎn),并進(jìn)行相關(guān)分析,提示實(shí)驗可行性。2)建立實(shí)驗方案,并在此過程中和客戶保持密切溝通。3)大規(guī)模實(shí)驗,有嚴(yán)格的指控流程保證實(shí)驗結(jié)果可靠。4)補(bǔ)數(shù)據(jù)，盡可能提高樣本的使用率。技術(shù)服務(wù)額外提供技術(shù)路線補(bǔ)數(shù)據(jù)，盡可能提高樣本的使用率。
d)靶基因pathway分析根據(jù)KEGG數(shù)據(jù)庫對靶基因進(jìn)行Pathway分類,并進(jìn)行***性分析從而得到***性的Pathway分類。e)構(gòu)建的MicroRNA與基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)通過構(gòu)建MicroRNA與基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)?？梢詮闹姓页鰄ub基因及hubmicroRNAf)microRNA、靶基因、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)microRNA也會受到轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控造成表達(dá)差異,通過系統(tǒng)研究轉(zhuǎn)錄因子與基因間的調(diào)控關(guān)系,可以為尋找重要轉(zhuǎn)錄因子及重要基因提供線索。g)microRNA啟動子分析及甲基化位點(diǎn)分析當(dāng)microRNA研究日趨火熱,越來越多的研究者開始關(guān)注microRNA本身甲基化變化。MicroRNA基因的甲基化變化也是造成microRNA表達(dá)差異的重要原因。
轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(tRNA)是一種參與解碼mRNA、翻譯蛋白質(zhì)的接頭分子。近年來的研究表明tRNA還能作為小非編碼RNA(sncRNA)的主要來源之一，具有獨(dú)特且多樣的功能1。這些tRNA來源的ncRNA并非隨機(jī)降解的產(chǎn)物,而是通過精確的生物發(fā)生過程產(chǎn)生的(圖.1)。源自tRNA的ncRNA大致分為兩大類:tiRNA(或者tRNAhalves)和tRFs(tRNA衍生片段)，具有其特定的分子大小、核苷酸組成、生理功能以及生物發(fā)生1-3。tRNAhalves(tiRNAs)是由angiogenin(ANG)在多種應(yīng)激條件下在成熟tRNA的反密碼子環(huán)處特異性切割產(chǎn)生的5'-和3'-tRNA半分子,長度約為29-50nt。
特殊設(shè)計的莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物配合實(shí)時定量PCR引物及SYBRGreen染料可精確檢測微量樣品中microRNA表達(dá)水平。
SouthernBlot是檢測基因組樣本中特定DNA序列的一種方法。主要原理是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，具有一定同源性的兩條核酸單鏈在適宜環(huán)境中可雜交形成雙鏈。
通過凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的待檢DNA分子，轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支撐物上，固定后與標(biāo)記好的探針進(jìn)行雜交，利用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。
SouthernBlot實(shí)驗流程基因組提取:基因組要求完整性好,純度高基因組酶切電泳分離酶切好的DNA樣品:20~40ug/泳道,25-30V穩(wěn)壓電泳12-24h。轉(zhuǎn)膜.探針制備.預(yù)雜交.雜交.檢測. 每管細(xì)胞密度超過1x106/ml.細(xì)胞經(jīng)neurofilament.MAP2和-ulinlI的兔疫熒光鑒定。醫(yī)學(xué)科研技術(shù)服務(wù)歡迎咨詢
用光學(xué)方法記錄單個成活神經(jīng)元活動過程的技術(shù),必須按照兩個基本問題來加以考慮,即要記錄什么和如何記錄。單細(xì)胞相關(guān)課題技術(shù)服務(wù)服務(wù)價格
microRNA靶點(diǎn)的預(yù)測利用Targetscan,miRanda,PicTar軟件得到目的microRNA的預(yù)測靶點(diǎn)序列(客戶提供)。獲得microRNA靶點(diǎn)序列根據(jù)提供的靶序列，合成兩條互補(bǔ)的單鏈DNA模板?；蛘?設(shè)計引物PCR打增目的microRNA靶基因3"UTR序列。microRNA靶序列克隆將合成的兩條單鏈退火成雙鏈(具有粘性末端),或?qū)CR產(chǎn)物雙酶切,后連入經(jīng)過同樣雙酶切的miR-reporter載體中,連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a。陽性克隆鑒定。挑選轉(zhuǎn)化的菌落,PCR篩選含有插入片段的陽性克隆,測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
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公司特色是以各式高通量二代測序為基礎(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗平臺，提供課題整體設(shè)計外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗平臺落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗平臺開放參觀，客戶可隨時參觀實(shí)驗并參與實(shí)驗課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計的課題均具有后續(xù)實(shí)驗課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書申請：提供標(biāo)書課題設(shè)計、撰寫，標(biāo)書部分基礎(chǔ)實(shí)驗的開展，設(shè)計的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測序：轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片：信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗：DNA甲基化實(shí)驗（BSP,MSP，焦磷酸測序），RNA甲基化實(shí)驗
7.實(shí)時定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗證實(shí)驗(靶基因驗證，過表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗