1.PC細(xì)胞衍生的linc-ROR相關(guān)外泌體的特性和作用為了研究外泌體對(duì)PC細(xì)胞釋放的脂肪細(xì)胞的影響，從培養(yǎng)基的上清(無外泌體血清)中分離出外泌體，并通過透射電子顯微鏡(TEM)和納米顆粒**分析(NTA)進(jìn)行定量。透射電鏡顯示直徑為30~150nm的清晰圓形顆粒，NTA顯示出類似大小的外泌體分布(圖1B和1C;)來源于PANC-1和BxPC-3細(xì)胞。在建立的PC細(xì)胞系(PANC-1,AsPC-1,MIA-PACA-2,CFPAC-1和BxPC-3)中觀察到linc-ROR的表達(dá)高于永生的正常胰腺細(xì)胞系(CCCHPE-2)。此外，外泌體linc-ROR的差異表達(dá)與細(xì)胞內(nèi)linc-ROR一致。Westernblot分析從CC-HPE-2、PAN-1和BXPC-3細(xì)胞上清分離的外泌體中提取的蛋白，顯示了外泌體蛋白CD9和TSG101的存在。接下來，研究外泌體linc-ROR的穩(wěn)定性。從PANC-1上清液中分離出的外泌體作為參考，用RNaseA(10mg/mL)培養(yǎng)0、30、60和90min，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)測量外泌體linc-ROR表達(dá)。此外共聚焦顯微鏡證實(shí)了脂肪細(xì)胞攝取PC細(xì)胞外泌體的能力。脂肪細(xì)胞作為受體細(xì)胞，對(duì)PC細(xì)胞的外泌體具有吸收效率，表明外泌體linc-ROR可傳遞給脂肪細(xì)胞，在PC細(xì)胞和脂肪細(xì)胞之間的生物學(xué)功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。英拜注重客戶的隱私。細(xì)胞間相互作用科研整體服務(wù)
2）Pex增強(qiáng)肝衛(wèi)星細(xì)胞(HSCs)的活性
為了證實(shí)Pex的生物學(xué)功能，將原代小鼠肝細(xì)胞與Pex孵育，Pex被受體細(xì)胞吸收。然后使用免疫熒光染色對(duì)原發(fā)性肝細(xì)胞的類型進(jìn)行表征，結(jié)果顯示，desmin+HSCs和F4/80+Kupffer細(xì)胞吸收了Pex(圖2A)。我們接下來研究了Pex對(duì)HSCs生物學(xué)行為的影響，發(fā)現(xiàn)Pex***增強(qiáng)了HSCs的增殖和遷移能力(圖2B和C)。Pex與Npex處理的HSCs的凋亡沒有***差異(圖2D)。westernblot和免疫熒光檢測結(jié)果顯示，Pex***上調(diào)α-SMA的表達(dá)，說明Pex能促進(jìn)HSC的活化(圖2E和F)。我們觀察到Pex可以通過下調(diào)vitronectin和tenascinC的表達(dá)，上調(diào)collagenI和fibronectin的表達(dá)來調(diào)節(jié)HSCs中的ECM分泌(圖2G)。 浙江纖維化芯片科研FOXO3A誘導(dǎo)的LINC00926限制乳腺瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移。
5）下調(diào)STK39可抑制乳腺*細(xì)胞EMT、遷移和侵襲為了進(jìn)一步研究STK39在乳腺*中的作用，我們在MDA-MB-231和MDA-MB-157細(xì)胞中建立了STK39敲低的克隆。我們使用兩個(gè)**的shRNA實(shí)現(xiàn)了內(nèi)源性STK3980-90%的敲除效率。在這兩個(gè)克隆中，STK39敲低增加了CDH1的水平，下調(diào)了N-cadherin的表達(dá)。STK39的缺失***增加了上皮標(biāo)記物的mRNA表達(dá)水平。免疫熒光分析也提示CDH1上調(diào)，N-cadherin下調(diào)。STK39基因敲除極大地抑制了這些細(xì)胞的遷移和侵襲能力)。STK39敲除的克隆中SNAI1的表達(dá)在很大程度上恢復(fù)了STK39消融誘導(dǎo)的效應(yīng)。此外，TGF-β1處理誘導(dǎo)MCF10A細(xì)胞EMT并***SNAI1表達(dá)。STK39缺失***抑制EMT和SNAI1的表達(dá)。綜上所述，STK39在很大程度上以SNAI1依賴的方式增強(qiáng)乳腺*轉(zhuǎn)移。
生物發(fā)光成像結(jié)果顯示，在circACTN4過表達(dá)組中檢測到更強(qiáng)和更多的生物發(fā)光信號(hào)，而circACTN4沉默組中的小鼠與對(duì)照組相比顯示出更少的生物發(fā)光轉(zhuǎn)移數(shù)量。與對(duì)照組相比，circACTN4 過表達(dá)組的小鼠總體存活率較低，肝轉(zhuǎn)移范圍更廣。***，我們通過 IHC 確定了 circACTN4 對(duì)其靶蛋白 MYC、下游細(xì)胞周期相關(guān)蛋白 CDK4 和 CCND2 以及細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白 Ki67 的影響。結(jié)果表明，circACTN4的上調(diào)可以增加**組織中MYC、CDK4、CCND2和Ki67的表達(dá)，而circACTN4的沉默降低了這些蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。綜上所述，上述結(jié)果進(jìn)一步證明了circACTN4在乳腺*中的致*作用，提示circACTN4可以通過***原*基因MYC促進(jìn)乳腺*的發(fā)生和轉(zhuǎn)移。促進(jìn)胰腺*的生長和轉(zhuǎn)移。
7、CFL1/PLD1軸介導(dǎo)低氧誘導(dǎo)的HCC細(xì)胞中AKT途徑的***之前的一項(xiàng)研究表明，PLD1***AKT及其下游mTOR通路促進(jìn)HCC細(xì)胞增殖、侵襲。與此一致，作者觀察到CFL1敲除降低了p-AKT水平，在HCCLM3細(xì)胞中通過PLD1恢復(fù)增強(qiáng)了p-AKT水平（圖7A，C）。此外，PLD1沉默逆轉(zhuǎn)了CFL1誘導(dǎo)的Hep3B細(xì)胞中AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化（圖7B，D）。值得注意的是，CFL1或PLD1敲除抑制了肝*細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)的AKT通路***和EMT過程（圖7E，F(xiàn)）。之后，進(jìn)行拯救實(shí)驗(yàn)探討HIF-1α-CFL1-PLD1軸中PLD1的功能。在HCCLM3細(xì)胞中過表達(dá)的PLD1可以逆轉(zhuǎn)低氧條件下CFL1-shRNA引起的對(duì)AKT磷酸化或EMT過程的抑制（圖7G，H）?？偟膩碚f，證實(shí)CFL1/PLD1軸在缺氧誘導(dǎo)的HCC進(jìn)展中起重要作用。
總之，該研究表明HCC中過表達(dá)CFL1與較差的臨床病理學(xué)參數(shù)呈正相關(guān)。體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)CFL1是HCC**生長和轉(zhuǎn)移的驅(qū)動(dòng)因素。PDL1/AKT通路介導(dǎo)CFL1的致*功能。此外，CFL1是一個(gè)缺氧反應(yīng)基因，通過***PLD1/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)參與缺氧誘導(dǎo)的HCC進(jìn)展（圖8）。綜上所述，該研究表明CFL1是低氧微環(huán)境與HCC進(jìn)展之間的一種新的連接體。 外泌體miR-934誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞M2極化促進(jìn)CRC肝轉(zhuǎn)移。代謝組學(xué)科研服務(wù)兩年
降低腸上皮細(xì)胞尿酸的產(chǎn)生。細(xì)胞間相互作用科研整體服務(wù)
顯微圖像補(bǔ)充了流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)，顯示在來IFN-High的SLE的CD8+T細(xì)胞中，線粒體在形態(tài)上與IFN-Neg的SLE患者不同，在IFN-HighCD8+T細(xì)胞中，每個(gè)細(xì)胞的平均線粒體總體積更大(圖2e)。綜上所述，這些數(shù)據(jù)表明，在SLE患者中，長期暴露IFNα可能會(huì)觸發(fā)CD8+細(xì)胞的線粒體變化，但不會(huì)觸發(fā)CD4+和T細(xì)胞的線粒體變化，這可能導(dǎo)致代謝紊亂的細(xì)胞，對(duì)其功能具有潛在的影響。
3、來自IFN-High的SLE患者的CD8+T細(xì)胞的SRC減少
接下來比較了從SLE患者和HC外周血分選的離體CD4+和CD8+T細(xì)胞的線粒體呼吸和有氧糖酵解。使用Seahorse細(xì)胞外通量分析儀，發(fā)現(xiàn)IFN-Neg患者的CD8+T細(xì)胞具有與HC相似的基礎(chǔ)和比較大耗氧量率(OCR)，而IFN-High患者的CD8+T細(xì)胞表現(xiàn)出較少的基礎(chǔ)和比較大OCR（圖3a）。重要的是，在IFN-HighCD8+T細(xì)胞中，備用呼吸能力(SRC)，反映細(xì)胞適應(yīng)能量需求增加的能力，***降低（圖3a）。 細(xì)胞間相互作用科研整體服務(wù)
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