HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,通過(guò)它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷。一、染色目的 病理學(xué)的所有切片,都必須通過(guò)一種以上的染料,通過(guò)各種不同的方法,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,將其顯示出來(lái),使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),方能提高。專業(yè)的HE染色服務(wù)平臺(tái),南京英瀚斯生物。海南推薦的HE染色檢測(cè)
HE染色法的話,不能準(zhǔn)確說(shuō)出細(xì)胞器的顏色,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說(shuō)染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色。或者詳細(xì)說(shuō)明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。山西專業(yè)的HE染色服務(wù)HE染色過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題以及應(yīng)對(duì)方法。
HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學(xué)染色法,其主要依靠蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實(shí)驗(yàn)過(guò)程:1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來(lái)水洗。2、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來(lái)水洗,分化液分化,自來(lái)水洗,返藍(lán)液返藍(lán),流水沖洗。3、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片:切片依次放入無(wú)水乙醇I5min-無(wú)水乙醇II5min-無(wú)水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹(shù)膠封片。5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。結(jié)果判讀:細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色
HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點(diǎn),促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合,其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高,很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí),可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過(guò)2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時(shí)間,同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度?,F(xiàn)在有商用的HE染色液賣,但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶,這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。HE染色,即是蘇木精-伊紅染色法,是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法。
HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。比較常見(jiàn)的病理染色HE染色?性價(jià)比高的HE染色檢測(cè)
HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項(xiàng) 。海南推薦的HE染色檢測(cè)
HE染色細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí),胞漿對(duì)外不顯電性,此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí),大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時(shí)胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽(yáng)離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽(yáng)離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比。海南推薦的HE染色檢測(cè)