遼寧推薦的HE染色

HE染色原理：一、細胞核染色原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。二、細胞漿染色原理：細胞漿內主要成分是蛋白質，為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關系，當pH調到蛋白質等電點4.7-5.0時，胞漿對外不顯電性，此時酸或堿性染料不易染色。當pH調到6.7-6.8時，大于蛋白質的等電點pH值，表現酸性電離，而帶負電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現時胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調至胞漿等電點以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽離子），就可被帶負電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料，在水中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質的氨基正電荷（陽離子）結合而使細胞漿染色，細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明的對比石蠟組織切片的HE染色。遼寧推薦的HE染色

HE染色組織樣本水化：將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min，使脫蠟時用的二甲苯可以被洗脫出去，使水可以進入組織中；再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡５min以達到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍：將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗，每次浸泡５min，總共清洗３次。之后用移液***吸取已經預先配制好的蘇木素染色液，每個組織切片滴加100ul，充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進行分化，使細胞核中結合過多的染液和細胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍色，使用弱堿性的促藍液加入組織切片中，讓細胞核染藍色。反藍結束后先用清水進行清洗，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。遼寧性價比高的HE染色多少錢肝臟組織HE染色如何觀察。

HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細胞，胰酶消化，調整細胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應時間后，取出細胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數秒，自來水洗滌。（5）染胞質：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細胞爬片后，中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定，則染色時間相應延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可

HE染色主要是為通細胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細胞的，并不是直接通過顏色來區(qū)分的，HE染色細胞壞死的三種改變：（1）細胞核的改變：這是細胞壞死的主要形態(tài)標志，表現為核濃縮，核碎裂，核溶解。（2）細胞質的改變：由于胞質發(fā)生凝固或溶解，HE染色呈深紅色顆粒狀，如肝細胞壞死出現的嗜酸性小體醫(yī)學|教育網搜集整理。（3）間質的改變：由于各種溶解酶的作用，基質崩解、膠原纖維腫脹、斷裂或液化，與壞死的細胞融合成一片，呈紅染的顆粒狀無結構物質。南京英瀚斯生物南京英瀚斯，專業(yè)的技術提供專業(yè)的HE染色服務。

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法，屬于化學染色法，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。實驗過程：1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。2、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍液返藍，流水沖洗。3、伊紅染色：切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min，入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結果判讀：細胞核呈藍色，細胞質呈紅色HE染色結果如果使用計算機分析軟件分析？上海HE染色價格

HE染色中固定液如何配置。遼寧推薦的HE染色

HE染色觀察細胞凋亡，凋亡檢測中形態(tài)學方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后，在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察，通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備：對于貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞，用藥物誘導細胞凋亡后，離心1000r/min收集細胞，用PBS洗2次，收集調整細胞數為1X105/ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5min；在光學顯微鏡下，貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓，核呈藍色或藍黑色，胞漿呈淡紅色，核固縮、破碎，形成凋亡小體等。懸浮細胞，整個細胞皺縮，核固縮，破碎，形成凋亡小體，染色質顏色加深等。遼寧推薦的HE染色