質(zhì)量好的HE染色

HE染色注意事項：1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應在顯微鏡下控制進行，一般以細胞核染色清楚（晰）而細胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導致染色太淺，應重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應將切片退回無水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前，切片周邊均應擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當，樹脂封固時不能有氣泡。HE染色需要哪些材料及實驗步驟。質(zhì)量好的HE染色

HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內(nèi)的核糖體和細胞質(zhì)染色的方法。H:Hematoxylin，蘇木精E:Eosin，伊紅蘇木精（Hematoxylin,H）是一種堿染料，可將細胞核和細胞內(nèi)核糖體染成藍紫色，被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿。伊紅（，E）是一種酸染料，能將細胞質(zhì)染成紅色或淡紅色，被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸。染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精，***入蒸餾水，就可染色。 很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當其衰老時或發(fā)生退行變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。 膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變時，伊紅著色由淺變深。湖北結(jié)果客觀的HE染色公司腎臟組織HE染色如何觀察。

HE染色細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色，粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細胞的種類有關(guān)，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時，伊紅著色由淺變深。

HE染色常見問題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時組織太厚，固定過久，導致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久，導致脫蠟不徹底。（4）染色液過少，著色不均勻；或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤，這樣會導致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。海馬組織HE染色如何觀察。

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法，屬于化學染色法，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實驗過程：1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。2、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍液返藍，流水沖洗。3、伊紅染色：切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min，入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結(jié)果判讀：細胞核呈藍色，細胞質(zhì)呈紅色比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。遼寧推薦的HE染色

冰凍切片是否可以做HE染色？質(zhì)量好的HE染色

HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項：多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸，使溶液pH降低，從而影響染色。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中，固定完成后用適當?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留，因此后續(xù)實驗結(jié)果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。質(zhì)量好的HE染色