湖南切片免疫組化注意事項(xiàng)

免疫組化（IHC）利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。

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抗體-抗原的相互作用通過(guò)有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA，但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對(duì)病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義。

IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案，而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑。 有沒(méi)有推薦的免疫組化外包公司？湖南切片免疫組化注意事項(xiàng)

關(guān)于免疫組化的封閉：用和二抗來(lái)源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min，然后甩去封閉用血清，勿洗；注意：封閉時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整；封閉液一般選用5%BSA或與二抗來(lái)源一致的血清，切記是BSA，不是PBS.很多論壇寫(xiě)的是PBS,太坑了。①使用血清好還是BSA好？答：***是待檢樣本會(huì)非特異性的和蛋白結(jié)合，從而導(dǎo)致背景過(guò)高，因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合，從這點(diǎn)看，BSA和血清沒(méi)有明顯區(qū)別。第二是待檢樣本中可能會(huì)有Fc受體，可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合，與抗體特異性無(wú)關(guān)，封閉血清中有抗體，因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合。BSA則無(wú)法封閉Fc受體。山東靠譜免疫組化免疫組化樣本如何處理？

免疫組化的特點(diǎn)：

1）特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。

2）敏感性高。在應(yīng)用免疫組化的起始階段，由于技術(shù)上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù)，那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍；現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn)，使抗體稀釋上千倍、上萬(wàn)倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合，這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng)，使免疫組化方法越來(lái)越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。

3）定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合。該技術(shù)通過(guò)抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng)，可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位，因而可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察，這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究，對(duì)病理學(xué)領(lǐng)域開(kāi)展深入研究是十分有意義的。

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免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的？

實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用、**基本的方法，對(duì)于組織形態(tài)保存好，且能作連續(xù)切片，有利于各種染色對(duì)照觀察；還能長(zhǎng)期存檔，供回顧性研究；石蠟切片制作過(guò)程對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進(jìn)行抗原修復(fù)，是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法。

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免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷，英瀚斯生物為您介紹。對(duì)于反應(yīng)性增生還是cancer性增生，可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測(cè)B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來(lái)區(qū)別。在濾泡反應(yīng)性增生時(shí)，濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞凋亡蛋白(bcl-2)，bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中，由于90%以上cancer性濾泡細(xì)胞有bcl-2的高表達(dá)，bcl-2陽(yáng)性。而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)，周期素(Cycling)，核抗原(Ki-67)通過(guò)對(duì)cancer細(xì)胞增生的程度作出評(píng)價(jià)，從而提示增生細(xì)胞的良惡性。英瀚斯生物為您詳解免疫組化實(shí)驗(yàn)指南！山東靠譜免疫組化

動(dòng)物、細(xì)胞的免疫組化、免疫熒光，就找英瀚斯生物！湖南切片免疫組化注意事項(xiàng)

免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說(shuō)明。除了生物學(xué)來(lái)源，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化，要么通過(guò)固定過(guò)程，要么是單獨(dú)的透化步驟，這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟，這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理，才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒(méi)什么差異了。當(dāng)然，就染色而言，根據(jù)所使用的抗體來(lái)優(yōu)化還是少不了的。湖南切片免疫組化注意事項(xiàng)