內(nèi)蒙古免疫組化

做免疫組化時(shí)如何選擇一抗？

1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合，就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面，即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中，一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對(duì)小，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高，但易出現(xiàn)非特異性染色（可以通過(guò)封閉等避免）。

2、應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Westernblotting，或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等；甚至標(biāo)明石蠟切片或冰凍切片。

3、種屬反應(yīng)性的選擇（speciesreactivity）。這一點(diǎn)很重要，表明這種抗體可能存在種屬差別，且這種抗體適合檢測(cè)哪種種屬動(dòng)物體內(nèi)的抗原。

4、種屬來(lái)源，一般兔來(lái)源的多是多克隆抗體；而小鼠來(lái)源的多是單克隆抗體，但也有另外。根據(jù)此來(lái)源來(lái)選擇相應(yīng)的二抗。

5、生產(chǎn)廠家的選擇。

免疫組化相關(guān)知識(shí)匯總。內(nèi)蒙古免疫組化

免疫組化的質(zhì)量控制免疫組化的質(zhì)量控制是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性和重復(fù)性的關(guān)鍵步驟。質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前的抗體驗(yàn)證、實(shí)驗(yàn)中的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，以及實(shí)驗(yàn)后的結(jié)果評(píng)估?？贵w驗(yàn)證是通過(guò)Western blot或免疫熒光等方法驗(yàn)證抗體的特異性和靈敏度。陽(yáng)性對(duì)照是使用已知表達(dá)目標(biāo)蛋白的組織或細(xì)胞，確保實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的有效性。陰性對(duì)照是使用不表達(dá)目標(biāo)蛋白的組織或細(xì)胞，排除非特異性結(jié)合。結(jié)果評(píng)估是通過(guò)圖像分析軟件對(duì)顯色結(jié)果進(jìn)行定量評(píng)估，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。山西免疫組化怎么樣在南京英瀚斯做的免疫組化，效果不錯(cuò)！

免疫組化如何才能充分脫蠟？

 （1）蠟不溶于水，如果脫蠟不干凈，少許蠟存留于切片上，將會(huì)引起染色不均勻、陽(yáng)性物時(shí)隱時(shí)現(xiàn)、真假難辨、背景染色增加等。為了解決上述的問(wèn)題，切片在染色前必須徹底脫蠟，目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯，因它脫蠟力強(qiáng)，脫蠟時(shí)間較短； 

（2）脫蠟的時(shí)間要根據(jù)季節(jié)，室溫和試劑的新鮮謀面是在不同。如果在夏天，室溫較高，脫蠟試劑也新鮮，則脫蠟時(shí)間不需很多，3-5分鐘就已足夠。如果在冬天，室溫較低，脫蠟試劑也較陳舊，則脫蠟時(shí)間需要延長(zhǎng)，10-20分鐘或更長(zhǎng)。

（3）當(dāng)天切的切片，燒烤2小時(shí)后進(jìn)行染色，切片帶有溫度進(jìn)行脫蠟這將可加速脫蠟的過(guò)程，如果預(yù)先切好烤好的切片，在染色前，還必須對(duì)切片進(jìn)行加溫10-20分鐘，然后再行脫蠟，這樣脫蠟速度加快，效果魁偉更好。總之，操作時(shí)應(yīng)根據(jù)不同的季節(jié)，不同的室溫，不同的試劑來(lái)決定，脫蠟的時(shí)間，原則上是要徹底、干凈、完全地脫去切片上的蠟。

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關(guān)于免疫組化，抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性，免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái)，以此作為抗原或半抗原，通過(guò)免疫動(dòng)物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無(wú)色的，因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來(lái)，以其達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性，定位或定量的研究。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計(jì)免疫組化的實(shí)驗(yàn)哦！如果您對(duì)此有希望了解更多，可以與我們聯(lián)系！英瀚斯生物為您詳解免疫組化實(shí)驗(yàn)指南！

免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹：

英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟：

1、SP三步法

1）石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。

2）0.3%或3%H2O2去離子水（無(wú)色液體）孵育10-30分鐘，以滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。

3）蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘

4）候選步驟：采用抗原修復(fù)：微波（建議30分鐘內(nèi)4次中火）、高壓、酶修復(fù)方法。自然冷卻，再用3分鐘×3次.

5）血清封閉：室溫15-30分鐘，盡可能與二抗來(lái)源一致。傾去，勿洗。

6）滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2~3小時(shí)或4℃過(guò)夜（比較好復(fù)溫）。PBS沖洗，3分鐘×5次。

7）滴加生物素標(biāo)記的二抗，室溫或37℃孵育30分鐘-1h。

8）PBS沖洗，3分鐘×5次。

9）滴加SP（鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶），室溫或37℃孵育30分鐘-1h。

10）PBS沖洗，3分鐘×5次。

11）顯色劑顯色（DAB等）。

12）自來(lái)水充分沖洗。

13）可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。

14）選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?臨床樣本檢測(cè)，免疫組化，英瀚斯生物專業(yè)病理。江西病理免疫組化檢測(cè)

免疫組化常見(jiàn)問(wèn)題原因分析！內(nèi)蒙古免疫組化

免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用？

定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢(shì)。相比于其他蛋白檢測(cè)方法，免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高，是定位檢測(cè)分析優(yōu)先方法，尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定性；確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位；對(duì)某類**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型；軟組織**診斷；為臨床提供治療方案的選擇；近年來(lái)，隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí)，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。

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