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抗原抗體反應(yīng)的主要影響因素
(一)抗原和抗體濃度、比例抗原和抗體濃度、比例對(duì)抗原抗體反應(yīng)影響比較大,是決定性因素,如前所述。
(二)電解質(zhì)抗原與抗體特異性結(jié)合后,其親水性減弱,分子表面所帶的電荷易受電解質(zhì)影響而失去,復(fù)合物間的排斥力下降,導(dǎo)致第一階段已形成的可溶性結(jié)合物能進(jìn)一步聯(lián)結(jié),出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。試驗(yàn)中常用0.85%的NaCl溶液作為稀釋液,以提供適當(dāng)濃度的電解質(zhì)。
(三)溫度適當(dāng)?shù)臏囟瓤稍黾涌乖c抗體分子碰撞的機(jī)會(huì),加速結(jié)合物體積的增大,一般而言溫度越高,形成可見(jiàn)反應(yīng)的速度越快,但過(guò)高則會(huì)使抗原或抗體變性失活,影響試驗(yàn)結(jié)果。一般在37℃下進(jìn)行試驗(yàn),但也有些抗原抗體在4℃下進(jìn)行反應(yīng)較好。
(四)酸堿度pH過(guò)高或過(guò)低都將直接影響抗原或抗體的理化性質(zhì)。例如,當(dāng)pH降至3.0左右時(shí),因接近細(xì)菌抗原的等電點(diǎn),細(xì)菌表面蛋白或其他基團(tuán)所帶的電荷消失,其相互間的排斥力喪失而導(dǎo)致非特異性酸凝集,影響試驗(yàn)的可靠性。 微流控技術(shù)的應(yīng)用可以大幅減少實(shí)驗(yàn)所需的樣品和試劑用量,節(jié)約了成本,有利于可持續(xù)發(fā)展。江蘇驅(qū)動(dòng)方式微流控產(chǎn)品
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di yi節(jié)檢測(cè)抗原抗體的體外方法
抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)
抗原抗體結(jié)合的比例性與結(jié)合物的可見(jiàn)性抗原與抗體的結(jié)合能否出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的反應(yīng),取決于兩者的比例。若比例合適,則可形成大的抗原抗體結(jié)合物,出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)反應(yīng)現(xiàn)象;反之,雖能形成結(jié)合物,但體積小,肉眼不可見(jiàn)。由于這種分子比例的差異,分別形成了三種區(qū)帶現(xiàn)象。等價(jià)帶表示抗原與抗體比例蕞合適,形成大而多的結(jié)合物,此時(shí)在反應(yīng)體系中測(cè)不出或有極少游離的抗原或抗體;抗體過(guò)剩帶(前帶)和抗原過(guò)剩帶(后帶)皆表示抗原與抗體的比例不合適,所形成的結(jié)合物少且小,其反應(yīng)體系中存在著游離的抗原或抗體。小分子可溶性抗原,因其表面積大,容易導(dǎo)致后帶現(xiàn)象;而細(xì)胞等顆粒性抗原,在與抗體反應(yīng)時(shí)則易出現(xiàn)前帶現(xiàn)象。因此在抗原抗體檢測(cè)中,為能得到肉眼可見(jiàn)的反應(yīng),在了解抗原的物理性狀之后,對(duì)抗原或抗體進(jìn)行稀釋,以調(diào)整二者的比例。
抗原抗體反應(yīng)的階段性抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段。第一階段是抗原抗體的特異結(jié)合階段,此階段jin需幾秒到幾分鐘、尚無(wú)可見(jiàn)反應(yīng);第二階段為可見(jiàn)反應(yīng)階段,需數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)乃至數(shù)日,受各種因素影響。 含光微納的微流控產(chǎn)品采用先進(jìn)的材料和工藝,確保產(chǎn)品的質(zhì)量和可靠性。湖南品質(zhì)高微流控產(chǎn)品水平
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分子診斷的三大檢測(cè)平臺(tái)分子診斷主要的檢測(cè)平臺(tái)為PCR儀、芯片系統(tǒng)以及基因測(cè)序平臺(tái)。PCR儀——數(shù)字PCR是未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)分子診斷設(shè)備另一個(gè)重要的組成內(nèi)容是PCR儀器。常規(guī)的PCR目前技術(shù)上可提升的空間很有限,但很多部件只有少數(shù)幾家廠家做的不錯(cuò)。熒光定量PCR,國(guó)內(nèi)有很多廠家生產(chǎn),技術(shù)、元器件等各方面正在迅速趕超國(guó)外儀器廠商水平,但這未必是國(guó)內(nèi)廠商蕞終的發(fā)展方向。得益于光源及檢測(cè)器件小型化趨勢(shì),現(xiàn)在的熒光PCR儀越來(lái)越小型化。數(shù)字PCR是PCR領(lǐng)域未來(lái)發(fā)展的趨勢(shì),目前有一些廠商在研究生產(chǎn),比如銳訊生物、新羿生物、領(lǐng)航基因等。現(xiàn)在數(shù)字PCR的售價(jià)很高,主要原因是后端檢測(cè)器件靈敏度要求高,成像器件技術(shù)先進(jìn),造成成本偏高。當(dāng)然,因?yàn)閿?shù)字PCR有jue dui定量的功能,對(duì)于分子檢測(cè)意義重江蘇驅(qū)動(dòng)方式微流控產(chǎn)品