預(yù)處理除膠原蛋白外,動物骨中還含有油脂、多種礦物質(zhì)和其他雜質(zhì),因此在被用于提取膠原蛋白之前必須進(jìn)行預(yù)處理。先剔除動物骨上殘留的肉質(zhì)和肌腱等雜物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油?,F(xiàn)在除去骨中無機(jī)物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質(zhì)可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍質(zhì)量的,用正乙烷脫脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值,37℃條件下處理120min,然后在固液比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,提取率可達(dá)18%;還有人用EDTA溶液()浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石。[87-89]膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。一般來說,高壓輔助和熱水抽提針對明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對膠原的提取,但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。膠原蛋白肽是膠原或明膠經(jīng)蛋白酶降解處理后制成的,具有較高的消化吸收性。四川牡蠣膠原蛋白肽口服液
酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法。多酶水解法又分為混合酶水解法(比如牛胰蛋白酶,鏈霉菌蛋白酶,芽孢桿菌蛋白酶混合)和分步酶水解法,酶法提取皮膠原具體實(shí)驗(yàn)工藝及條件的選取通常應(yīng)考慮要開發(fā)的產(chǎn)品對分子量的要求,要得到分子量較小的膠原多肽一般采用多酶水解法。影響酶解效果的因素主要有:酶的種類、加酶量、酶解溫度、酶解時(shí)間、pH值及料水比。采用酶法提取骨料中的膠原蛋白,既能有效縮短提取時(shí)間,又能獲得具有良好生物活性的膠原蛋白,而且對環(huán)境的污染也較小。膠原蛋白不易被普通蛋白酶水解,但能被動物膠原酶斷裂,斷裂的碎片自動變性后可被普通蛋白酶水解。胃蛋白酶水解膠原蛋白的適宜條件為~、溫度37℃。骨膠原蛋白哪個(gè)牌子好魚膠原蛋白的原材料,一般來源于魚類。
水解膠原蛋白和膠原多肽也并不相同,可以近似認(rèn)為是宏觀和微觀的關(guān)系。膠原蛋白分子經(jīng)水解后主要形成相對分子量較小的膠原多肽,由于膠原蛋白獨(dú)特的三股超螺旋結(jié)構(gòu),性質(zhì)十分穩(wěn)定,一般的加工溫度及短時(shí)間加熱都不能使其分解,從而造成其消化吸收較困難,不易被人體充分利用。水解后其吸收利用率可以提高很多,且可以促進(jìn)食品中的其它蛋白質(zhì)的吸收。膠原多肽除了肽鏈的兩端含有未縮合的末端羧基和氨基外,在側(cè)鏈上還含有Lys的ε-NH2以及Asp和Glu的-COOH。膠原多肽可完全溶解于水(冷水亦可溶解),水溶液低粘度,在60%的高濃度下也有流動性,耐酸堿性能好,在酸、堿存在的情況下均無沉淀;耐高溫性能好,200℃加熱亦無沉淀,同時(shí)它還具有良好的吸油性、起泡性和吸水性等。
作為生物高分子,膠原的強(qiáng)度不大,有研究表明膠原蛋白的凝膠強(qiáng)度與其濃度的平方幾乎成正比關(guān)系,強(qiáng)度測定可用凝膠強(qiáng)度計(jì)。特別提示:明膠、膠原蛋白和水解膠原蛋白并不相同。明膠是膠原在高溫作用下的變性產(chǎn)物,其組成復(fù)雜,相對分子質(zhì)量分布寬,由于高溫造成膠原蛋白變性,膠原分子的3股螺旋結(jié)構(gòu)被破壞,但可能有部分α鏈的螺旋鏈還存在,因此一定濃度的明膠溶液能成凝膠狀。在食品工業(yè)、攝影和制藥業(yè)中被廣泛應(yīng)用。據(jù)報(bào)道,全世界每年生產(chǎn)的明膠產(chǎn)品中,有65%用于食品工業(yè),20%用于照相工業(yè),10%用于制藥工業(yè)。水解膠原蛋白是在較高溫度下用蛋白酶水解膠原或明膠得到的,受溫度和酶的雙重作用,使水解膠原蛋白的相對分子質(zhì)量比明膠更小,由于在較高溫度條件下,蛋白酶對膠原肽鍵的水解是隨機(jī)的,使水解得到的蛋白液組成也很復(fù)雜,是相對分子質(zhì)量從幾千到幾萬的蛋白多肽的混合物。由于分子量小,水解膠原蛋白容易降解,所以在營養(yǎng)保健品和日用化學(xué)品開發(fā)方面擁有一定的市場。水解膠原蛋白可用于生物發(fā)酵培養(yǎng)基,也可以作為一種高蛋白飼料營養(yǎng)添加劑替代進(jìn)口魚粉用于混、配合飼料生產(chǎn)。膠原、明膠和水解膠原蛋白這3種物質(zhì)雖具有同源性,但在結(jié)構(gòu)和性能上卻有很大的區(qū)別。而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白。
天然高分子材料中相當(dāng)有代表性的是天然蛋白質(zhì)和天然多糖,多糖主要有軟骨素、HA(透明質(zhì)酸)、殼聚糖、肝素等,多糖復(fù)合材料比較集中于可吸收性外科縫線、藥物釋放的載體、皮膚替代物、透析膜、止血劑、醫(yī)用引導(dǎo)組織再生材料、骨替代材料、組織培養(yǎng)系統(tǒng)的支架。膠原作為醫(yī)用生物材料,較重要的特點(diǎn)在于其低免疫原性,與其它具有免疫原性的蛋白質(zhì)相比,膠原蛋白的免疫原性非常低。人們甚至曾認(rèn)為膠原不具有抗原性,研究表明:膠原具有低免疫原性,不含端肽時(shí)免疫原性尤其低。?膠原是大分子,不易被皮膚吸收。河南骨膠原蛋白固體飲料
膠原蛋白保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性,改善皮膚細(xì)胞生存環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝。四川牡蠣膠原蛋白肽口服液
由于膠原蛋白廣布于人體各組織中,系各組織中的重要成分并構(gòu)成組織細(xì)胞外基質(zhì)(Extracelluarmatrix,ECM),其性質(zhì)是一種天然的組織支架材料。從臨床應(yīng)用的角度,人們用膠原蛋白制成各種各樣的組織工程支架,如皮膚、骨組織、氣管和血管支架等。然而以膠原本身而言就有兩大類,即純膠原制備的支架和與其它成分復(fù)合而成的復(fù)合物支架。純膠原蛋白組織工程支架具有生物相容性好、易加工、可塑性并能促進(jìn)細(xì)胞黏附、增殖等優(yōu)點(diǎn),但也有膠原蛋白的力學(xué)性能差,在含水時(shí)難以塑形,無法支撐組織重建等不足。其次在修復(fù)處的新生組織會產(chǎn)生各種各樣的酶,將膠原蛋白水解,導(dǎo)致支架崩解,而采用交聯(lián)或復(fù)合的方式能改善與提高?,F(xiàn)已成功地將膠原蛋白基生物材料用于人工皮膚、人工骨、軟骨移植和神經(jīng)導(dǎo)管等組織工程產(chǎn)品。有人用嵌入軟骨細(xì)胞的膠原蛋白凝膠來修復(fù)軟骨缺陷并嘗試用上皮、內(nèi)皮和角膜細(xì)胞附在膠原蛋白海綿以適應(yīng)角膜組織。還有人混合自體同源的間葉細(xì)胞中的莖狀細(xì)胞和膠原蛋白凝膠制作肌腱用于腱后修復(fù)。四川牡蠣膠原蛋白肽口服液
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