在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增、突變檢測(cè)、基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。而一款PCR Master Mix則是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)憑借其性能和獨(dú)特的產(chǎn)品特點(diǎn),為科研工作者提供了高效、可靠的實(shí)驗(yàn)解決方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,這是一種具有高保真性的熱穩(wěn)定酶。它能夠以極高的準(zhǔn)確性復(fù)制DNA模板,錯(cuò)誤率極低,為普通Taq酶的1/500,這使得它在擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA或?qū)π蛄袦?zhǔn)確性要求極高的實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色。例如,在進(jìn)行基因克隆或構(gòu)建基因文庫(kù)時(shí),Phusion酶能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的序列與原始模板高度一致,從而提高了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功率。二、快速擴(kuò)增能力盡管Phusion酶具有高保真性,但其擴(kuò)增速度并未受到影響。它能夠在短時(shí)間內(nèi)完成長(zhǎng)片段DNA的擴(kuò)增,提高了實(shí)驗(yàn)效率。對(duì)于長(zhǎng)度在5kb以內(nèi)的DNA片段,Phusion Master Mix可以在幾分鐘內(nèi)完成擴(kuò)增,這對(duì)于需要快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果的研究人員來(lái)說是一個(gè)巨大的優(yōu)勢(shì)。例如,在進(jìn)行高通量基因篩查或大規(guī)模樣本分析時(shí),Phusion Master Mix能夠縮短實(shí)驗(yàn)周期,提高工作效率。在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或編輯工具的克隆,減少克隆過程中的非目標(biāo)突變。Recombinant Human CD37 Protein,hFc Tag
SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的實(shí)時(shí)定量PCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的2×預(yù)混液,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技術(shù),能夠有效防止PCR產(chǎn)物污染,提高檢測(cè)的特異性和準(zhǔn)確性。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測(cè)靈敏度。防污染設(shè)計(jì):預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止交叉污染。通用性:含有ROX被動(dòng)參考染料,適用于所有qPCR儀器,無(wú)需根據(jù)儀器調(diào)整ROX濃度。可視化示蹤:部分產(chǎn)品含有藍(lán)色示蹤染料,加入模板后顏色變化可防止加樣錯(cuò)誤。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)基因表達(dá)水平。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。多重檢測(cè):可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點(diǎn),成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測(cè)中的重要工具,尤其適用于需要高靈敏度和防污染的qPCR實(shí)驗(yàn)。Recombinant Human ITCH Protein牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I是TOPO克隆技術(shù)的關(guān)鍵組分,該技術(shù)允許快速、簡(jiǎn)便地將PCR產(chǎn)物克隆到質(zhì)粒載體中。
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來(lái),科學(xué)家們通過對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。
Phusion DNA Polymerase 是一種高性能的熱穩(wěn)定DNA聚合酶,以其保真度、快速擴(kuò)增能力和強(qiáng)大的反應(yīng)穩(wěn)定性而聞名,被廣應(yīng)用于分子生物學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。Phusion DNA Polymerase 的重要優(yōu)點(diǎn)在于其高保真性。其錯(cuò)誤率比Taq DNA聚合酶低50倍以上,比Pfu DNA聚合酶低6倍。這種高保真性使其成為克隆、測(cè)序模板制備、突變分析以及長(zhǎng)片段或高GC含量模板擴(kuò)增等應(yīng)用的理想選擇。此外,Phusion酶的獨(dú)特結(jié)構(gòu)融合了類似Pyrococcus來(lái)源的酶和增強(qiáng)持續(xù)合成能力的結(jié)構(gòu)域,使其在擴(kuò)增速度和穩(wěn)定性方面表現(xiàn)出色。Phusion DNA Polymerase 的另一個(gè)特點(diǎn)是其快速擴(kuò)增能力。其延伸速度可達(dá)15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍。這種高速擴(kuò)增能力不僅提高了實(shí)驗(yàn)效率,還減少了因長(zhǎng)時(shí)間反應(yīng)導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。Phusion DNA Polymerase 還具有強(qiáng)大的反應(yīng)穩(wěn)定性和多功能性。它能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)20 kb的DNA片段,并且對(duì)復(fù)雜的高GC含量模板表現(xiàn)出色。此外,Phusion酶還提供熱啟動(dòng)版本,進(jìn)一步減少了非特異性擴(kuò)增,適合高通量PCR和自動(dòng)化應(yīng)用。Phusion DNA Polymerase 的應(yīng)用范圍廣,包括常規(guī)PCR、長(zhǎng)片段擴(kuò)增、高通量PCR、克隆和測(cè)序模板制備等。其配套的優(yōu)化緩沖液和GC增強(qiáng)劑使其能夠適應(yīng)各種復(fù)雜的模板和反應(yīng)條件。泛素連接酶E3識(shí)別特定的靶蛋白,并促進(jìn)E2上的泛素轉(zhuǎn)移到靶蛋白的賴氨酸殘基上,形成靶蛋白-泛素復(fù)合物。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)已成為基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、基因拷貝數(shù)變異研究等領(lǐng)域的工具。而One Step RT-qPCR Probe Kit憑借其產(chǎn)品特點(diǎn)和性能,為科研工作者提供了一種高效、可靠的解決方案,極大地推動(dòng)了相關(guān)研究的進(jìn)展。一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)一步法操作One Step RT-qPCR Probe Kit采用獨(dú)特的一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在一個(gè)反應(yīng)體系中。這種設(shè)計(jì)極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,減少了人為操作誤差和樣本污染的風(fēng)險(xiǎn)。相比傳統(tǒng)的兩步法,一步法節(jié)省了時(shí)間和人力成本,還提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性,尤其適合高通量樣本的檢測(cè)。(二)高靈敏度與特異性該試劑盒采用了先進(jìn)的探針技術(shù),結(jié)合優(yōu)化的酶體系和反應(yīng)緩沖液,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)低豐度靶標(biāo)基因的高靈敏度檢測(cè)。其特異性探針設(shè)計(jì)確保了與目標(biāo)序列結(jié)合,避免了非特異性擴(kuò)增的干擾,從而為定量分析提供了準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)支持。無(wú)論是對(duì)微量樣本中的基因表達(dá)進(jìn)行定量,還是對(duì)低濃度病原體進(jìn)行檢測(cè),One Step RT-qPCR Probe Kit都能表現(xiàn)出性能。Phusion DNA Polymerase的反應(yīng)條件穩(wěn)健,幾乎無(wú)需優(yōu)化,即使在存在PCR抑制劑的情況下也能表現(xiàn)出色。Recombinant Human CD37 Protein,hFc Tag
Probe qPCR Mix (2×)通常含有熱啟動(dòng)DNA聚合酶,這種聚合酶在高溫下激發(fā),可以減少非特異性擴(kuò)增 。Recombinant Human CD37 Protein,hFc Tag
高靈敏度與特異性該產(chǎn)品采用優(yōu)化的SYBRGreenI染料配方,能夠與雙鏈DNA特異性結(jié)合,即使在低拷貝數(shù)的目標(biāo)序列中也能實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測(cè)。其優(yōu)化的反應(yīng)體系確保了高效的擴(kuò)增效率,同時(shí)減少了非特異性產(chǎn)物的生成。低ROX參考染料產(chǎn)品中預(yù)混了低濃度的ROX參考染料,適用于多種qPCR儀器平臺(tái),無(wú)需額外添加或調(diào)整ROX濃度,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,同時(shí)保證了熒光信號(hào)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。UDG防污染系統(tǒng)為了防止qPCR實(shí)驗(yàn)中的氣溶膠污染,該產(chǎn)品引入了dUTP/UDG防污染體系。UDG酶能夠降解含有dUTP的殘留DNA,從而有效避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn),確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性??焖俜磻?yīng)與模板兼容性SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX,UDGPlus)采用了高性能的熱啟動(dòng)TaqDNA聚合酶,能夠在短時(shí)間內(nèi)完成反應(yīng),同時(shí)兼容高GC或高AT含量的DNA模板,展現(xiàn)出優(yōu)異的擴(kuò)增性能。便捷的2×預(yù)混液設(shè)計(jì)該產(chǎn)品為2×濃度的預(yù)混液,包含qPCR所需的所有關(guān)鍵組分,如TaqDNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等,需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng),簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。Recombinant Human CD37 Protein,hFc Tag