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外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標志物時發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào)，進一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵。外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。成都外泌體提取試劑廠家直銷

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來，高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究，這為我們揭示了更多具有生物標志物價值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達情況，發(fā)現(xiàn)CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達不光能區(qū)分一些病癥與正常組織，同時也能區(qū)分各種肺病的組織亞型。此外，聯(lián)合應(yīng)用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達到0.74。Clark等采用納升液聯(lián)用技術(shù)（nano-ESI-LC-MS/MS）分析了來自正常支氣管上皮細胞系和兩個攜帶NSCLC細胞系的外泌體的蛋白表達譜，從中篩選出如細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達的蛋白，同時檢測分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性。由于國內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏，我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進口提取試劑盒。成都外泌體提取試劑廠家直銷近年來，隨著人們對外泌體的研究和認識加深。

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外泌體在肺病進程中的作用：肺病細胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進一些病癥血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用。

1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細胞的免疫細胞也會分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle），所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細胞的抗一些病癥反應(yīng)。2007年HValadi等進一步發(fā)現(xiàn)細胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細胞分化、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中。目前的主流觀點認為，外泌體的產(chǎn)生過程為：細胞膜內(nèi)陷，形成內(nèi)體（endosome），再形成多泡體（multivesicularbodies，MVB），較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體較早見于1981年，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，并命名為exosome。對于外泌體的作用，當時推測為細胞排泄廢物的一種方式。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。深圳正規(guī)外泌體提取試劑

超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不高的問題。成都外泌體提取試劑廠家直銷

所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。1983年，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。成都外泌體提取試劑廠家直銷