Humancelldesign開(kāi)發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細(xì)胞系生產(chǎn)方法。首先,將每個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)的人類胎兒胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的腎被膜下,因?yàn)樵摬课皇侨祟愐认侔l(fā)育的允許部位。在6到8個(gè)月內(nèi),所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤,這導(dǎo)致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離,用在大鼠胰島素啟動(dòng)子控制下表達(dá)hTERT的慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo),并移植到其他SCID小鼠中。這些小鼠在2至3個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)低血糖,胰島素陽(yáng)性細(xì)胞大量擴(kuò)增。這種體內(nèi)擴(kuò)增有助于維持大量增殖的胰島素細(xì)胞,并允許定義允許的培養(yǎng)條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細(xì)胞系。曼聯(lián)是Human cell design在中國(guó)區(qū)的官方代理。湖南糖尿病細(xì)胞模型糖尿病研究新靶點(diǎn)
根據(jù)嚙齒動(dòng)物β細(xì)胞獲得的數(shù)據(jù),葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC2A2頭次被認(rèn)為是葡萄糖傳感器蛋白。SLC2A2在人胰島細(xì)胞中的表達(dá)水平極低,表明葡萄糖在大鼠β細(xì)胞中通過(guò)SLC2A2轉(zhuǎn)運(yùn),而在人β細(xì)胞中主要通過(guò)SLC2A1和/或SLC2A3轉(zhuǎn)運(yùn)。研究表明SLC2A2mRNA在EndoC-βH1細(xì)胞中表達(dá),因此,EndoC-βH1細(xì)胞應(yīng)該是一個(gè)有用的模型,用于解剖不同葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體在人β細(xì)胞中的特定作用。Humancelldesign構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型.胰島制劑糖尿病細(xì)胞模型600+文獻(xiàn)驗(yàn)證HLA-A2同種異體反應(yīng)性T細(xì)胞與EndoC-BH5細(xì)胞共培養(yǎng)顯示出強(qiáng)烈的HLA-A2特異性反應(yīng),通過(guò)IFNg/IL1b刺激而放大.
Human Cell Design 的科學(xué)家們通過(guò)不斷的實(shí)驗(yàn)和優(yōu)化,成功開(kāi)發(fā)出了一系列高效的人源胰島β細(xì)胞模型。這些模型不僅在胰島素分泌方面表現(xiàn)出色,還能夠在不同的實(shí)驗(yàn)條件下穩(wěn)定生長(zhǎng),為研究人員提供了可靠的實(shí)驗(yàn)工具。HCD 的細(xì)胞模型已經(jīng)在全球多個(gè)實(shí)驗(yàn)室中被廣泛應(yīng)用,為糖尿病研究和治療帶來(lái)了新的可能。HumanCellDesign的EndoC-BH5細(xì)胞系通過(guò)先進(jìn)的基因編輯技術(shù),成功模擬了天然胰島細(xì)胞的功能和結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞不僅能夠在高葡萄糖環(huán)境下表現(xiàn)出胰島素分泌反應(yīng),還能夠響應(yīng)不同的胰島素刺激劑,模擬人體胰島細(xì)胞的生理狀態(tài)。這些細(xì)胞模型為科學(xué)家們提供了寶貴的研究資源,推動(dòng)了糖尿病研究的進(jìn)展。
HumanCellDesign以其技術(shù)和創(chuàng)新能力,在人源細(xì)胞模型領(lǐng)域樹(shù)立了榜樣。其開(kāi)發(fā)的人源胰島β細(xì)胞模型不僅為糖尿病研究提供了強(qiáng)有力的支持,還為藥物開(kāi)發(fā)和細(xì)胞治療帶來(lái)了新的希望。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和應(yīng)用的不斷擴(kuò)展,HCD將繼續(xù)致力于推動(dòng)人源細(xì)胞模型的前沿研究,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。HumanCellDesign的EndoC-BH5細(xì)胞系通過(guò)先進(jìn)的基因編輯技術(shù),成功模擬了天然胰島細(xì)胞的功能和結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞不僅能夠在高葡萄糖環(huán)境下表現(xiàn)出明顯的胰島素分泌反應(yīng),還能夠響應(yīng)不同的胰島素刺激劑,模擬人體胰島細(xì)胞的生理狀態(tài)。這些細(xì)胞模型為科學(xué)家們提供了寶貴的研究資源,推動(dòng)了糖尿病研究的進(jìn)展。更多關(guān)于HumanCellDesign的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢AlibioBuy。糖尿病細(xì)胞模型如何進(jìn)行病毒載體構(gòu)建?
在胰島細(xì)胞刺激中,基礎(chǔ)和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過(guò)應(yīng)用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導(dǎo)的鉀通道開(kāi)放劑二氮嗪(100mM),驗(yàn)證了胰島素分泌對(duì)D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加,從0mMD-葡萄糖時(shí)的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時(shí)的679.2±39.5ng/h/106細(xì)胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖,分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細(xì)胞。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過(guò)多輪次優(yōu)化改良,獲得的功能胰腺B細(xì)胞,無(wú)限接近天然人源胰島B細(xì)胞,其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似,基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上(左圖),在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)(右圖),對(duì)GLP-1R激動(dòng)劑, Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋, 且可實(shí)現(xiàn)批量化生成,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。
更多產(chǎn)品信息,歡迎咨詢AlibioBuy。全球200+學(xué)術(shù)與制藥實(shí)驗(yàn)室測(cè)試和批準(zhǔn)了Huamn cell design(HCD)的糖尿病細(xì)胞模型。Human cell design(HCD)糖尿病細(xì)胞模型操作指南
糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞以 1e2 105 細(xì)胞/孔接種到 BCoat包被的8 孔 IBIDI 室載玻片上。湖南糖尿病細(xì)胞模型糖尿病研究新靶點(diǎn)
EndoC-βH1使用慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移從人類胎兒胰腺中產(chǎn)生功能性β細(xì)胞,這些胰腺處于發(fā)育的早期階段,即9至11周,這段時(shí)間與β細(xì)胞分化的開(kāi)始相吻合(33)。整合的轉(zhuǎn)基因SV40LT受大鼠胰島素啟動(dòng)子控制,在胰島素陽(yáng)性細(xì)胞中特異性表達(dá)。通過(guò)使用這種靶向方法,SV40LT在新形成的β細(xì)胞中表達(dá),同時(shí)這些細(xì)胞頭次產(chǎn)生胰島素。因此,我們成功地模仿了用于產(chǎn)生功能性嚙齒動(dòng)物β細(xì)胞系的轉(zhuǎn)基因方法(7,8,34),用于從人胎兒胰腺中開(kāi)發(fā)功能性人β細(xì)胞系。湖南糖尿病細(xì)胞模型糖尿病研究新靶點(diǎn)