EndoC-bH細(xì)胞家族糖尿病細(xì)胞模型胰腺B細(xì)胞基因特異性表達(dá)

Humancelldesign（HCD）通過將永生化轉(zhuǎn)基因hTERT和SV40大T以及單純皰疹病毒-1胸苷激酶整合基因轉(zhuǎn)移至人胎兒胰腺中，產(chǎn)生EndoC-βH5細(xì)胞。擴(kuò)增后使用CREjihuo去除永生化轉(zhuǎn)基因，并使用更昔洛韋消除剩余的未切除細(xì)胞，所得細(xì)胞作為可立即使用的EndoC-βH5細(xì)胞進(jìn)行分發(fā)。EndoC-βH5已經(jīng)成功進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組、免疫學(xué)和的功能測(cè)定。即用型EndoC-βH5細(xì)胞顯示出高效的葡萄糖依賴性胰島素分泌。歐洲四個(gè)duli實(shí)驗(yàn)室觀察并再現(xiàn)了強(qiáng)勁的10倍胰島素分泌指數(shù)。EndoC-βH5細(xì)胞響應(yīng)葡萄糖以動(dòng)態(tài)方式分泌胰島素。GLP1R和GIPR介導(dǎo)的信號(hào)增強(qiáng)葡萄糖刺激EndoC-βH5細(xì)胞的胰島素分泌.糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞聚集并形成球體，這些球體是大小和形狀均質(zhì)。EndoC-bH細(xì)胞家族糖尿病細(xì)胞模型胰腺B細(xì)胞基因特異性表達(dá)

HumanCellDesign以其技術(shù)和創(chuàng)新能力，在人源細(xì)胞模型領(lǐng)域樹立了榜樣。其開發(fā)的人源胰島β細(xì)胞模型不僅為糖尿病研究提供了強(qiáng)有力的支持，還為藥物開發(fā)和細(xì)胞治療帶來了新的希望。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和應(yīng)用的不斷擴(kuò)展，HCD將繼續(xù)致力于推動(dòng)人源細(xì)胞模型的前沿研究，為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。HumanCellDesign的EndoC-BH5細(xì)胞系通過先進(jìn)的基因編輯技術(shù)，成功模擬了天然胰島細(xì)胞的功能和結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞不僅能夠在高葡萄糖環(huán)境下表現(xiàn)出明顯的胰島素分泌反應(yīng)，還能夠響應(yīng)不同的胰島素刺激劑，模擬人體胰島細(xì)胞的生理狀態(tài)。這些細(xì)胞模型為科學(xué)家們提供了寶貴的研究資源，推動(dòng)了糖尿病研究的進(jìn)展。更多關(guān)于HumanCellDesign的產(chǎn)品信息，歡迎咨詢AlibioBuy。山東糖尿病細(xì)胞模型法國生物醫(yī)學(xué)局批準(zhǔn)糖尿病細(xì)胞模型接近原代成人 B 細(xì)胞，是更好地了解人類 B 細(xì)胞生理學(xué)和開發(fā)糖尿病新療法的重要模型。

Humancelldesign（HCD）開發(fā)了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產(chǎn)生功能的人類β細(xì)胞系。在胰島素啟動(dòng)子的控制下，用表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類胎兒胰腺芽。然后將轉(zhuǎn)導(dǎo)的芽移植到SCID小鼠體內(nèi)，使其發(fā)育成成熟的胰腺組織。分化后，新形成的表達(dá)sv40lt的β細(xì)胞增殖并形成胰島素瘤。然后用人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)轉(zhuǎn)導(dǎo)β細(xì)胞，移植到其他SCID小鼠體內(nèi)，在體外擴(kuò)增生成細(xì)胞系。其中一種細(xì)胞系，EndoC-βH1，表達(dá)了許多β細(xì)胞特異性標(biāo)記，而沒有任何其他胰腺細(xì)胞類型標(biāo)記的實(shí)質(zhì)性表達(dá)。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下，細(xì)胞分泌胰島素，細(xì)胞移植逆轉(zhuǎn)了化學(xué)誘導(dǎo)的小鼠糖尿病。

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在胰島細(xì)胞刺激中，基礎(chǔ)和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過應(yīng)用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導(dǎo)的鉀通道開放劑二氮嗪(100mM)，驗(yàn)證了胰島素分泌對(duì)D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加，從0mMD-葡萄糖時(shí)的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時(shí)的679.2±39.5ng/h/106細(xì)胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖，分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細(xì)胞。Humancelldesign構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺B細(xì)胞，無限接近天然人源胰島B細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上（左圖），在2.8mMand11mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)（右圖），對(duì)GLP-1R激動(dòng)劑，Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋，且可實(shí)現(xiàn)批量化生成，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng).EndoC-BH5 細(xì)胞具有加速糖尿病研究的巨大潛力。EndoC-bH細(xì)胞家族糖尿病細(xì)胞模型胰腺B細(xì)胞基因特異性表達(dá)

流式細(xì)胞術(shù)分析表明所有糖尿病細(xì)胞模型 EndoC-BH5 細(xì)胞均呈胰島素陽性。EndoC-bH細(xì)胞家族糖尿病細(xì)胞模型胰腺B細(xì)胞基因特異性表達(dá)

在EndoC-βH5細(xì)胞中檢測(cè)到所有對(duì)β細(xì)胞身份和功能重要的轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。與成人b細(xì)胞相比，EndoC-βH5細(xì)胞中的表達(dá)水平相似（FOXA2、MNX1、NKX2.2）或更高（HOPX、MAFB、NEUROD1、PAX6、PDX1）。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5細(xì)胞中以較低水平表達(dá)EndoC-βH5細(xì)胞中表達(dá)與胰島素分泌相關(guān)的受體，包括腎上腺素(ADRA2A)、脂肪酸(FFAR1、FFAR3)、GABA(GABRB3)、胰haoxuetang素(GCGR)、生長(zhǎng)抑素(SSTR2)和腸jiangxuetang素受體，例如胰gaoxuetang素樣受體肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR)。重要的是，EndoC-βH5細(xì)胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1細(xì)胞中更豐富.
EndoC-bH細(xì)胞家族糖尿病細(xì)胞模型胰腺B細(xì)胞基因特異性表達(dá)