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膠原蛋白的提取方法:酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。此法處理快速,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,但產(chǎn)品得率低,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜。無(wú)錫正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹
要準(zhǔn)備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,無(wú)齒鑷1把,200ml燒杯1個(gè),培養(yǎng)皿1個(gè),帶蓋廣口瓶1個(gè),離心管、小瓶數(shù)個(gè),滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過(guò)濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,用止血鉗夾住尾巴較高,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,稱尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小時(shí),離心。吸取其上清,分裝至小瓶,4℃保存。上述制備過(guò)程均在無(wú)菌條件下完成。蕪湖南昌鼠尾膠原這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),可以用來(lái)當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。
除了讓細(xì)胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長(zhǎng)環(huán)境,讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長(zhǎng)。當(dāng)然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開(kāi)網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。蘇州君欣生物科技有限公司用無(wú)菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,為鼠尾膠原蛋白、聚乙烯醇、殼聚糖、水制成的凍干止血材料,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?-10%0.2-5%0.2-2%,余量為水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?%2%1%,余量的水。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾膠原蛋白來(lái)源于各品系SFP級(jí)大鼠鼠尾。生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境。深圳正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦
制備鼠尾膠原:手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的,折斷尾骨后拉出尾腱。無(wú)錫正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察。無(wú)錫正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹