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來源: 發(fā)布時間:2021-10-18

    PCR基因擴增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質(zhì)。苯西酮尿癥(PKU)是一種常染色體隱性遺傳病,患者因苯丙酸羥化酶轉(zhuǎn)化為酷氨酸,使苯氨酸及其代謝物在體內(nèi)大量蓄積,出現(xiàn)腦組損傷及不可逆性智力發(fā)育障礙。PKU患者出生時正常,新生兒一經(jīng)確診為PKU停止母乳喂養(yǎng)采用低苯丙氨酸欽食療法8—10年,可使患者智力水平發(fā)展維持正常。由于低苯丙氨酸欽食非常昂貴,一般家庭難以承受,因此,施行產(chǎn)前診斷,防止患兒出生是比較好的選擇。PAH只在肝細(xì)胞中表達,不能用血細(xì)胞,成纖維細(xì)胞、羊水、絨毛細(xì)胞進行酶活性分析,只能進行基因診斷。PKU的基因變化并非全部PAH基因的缺失,而是以點突變?yōu)橹饕憩F(xiàn)形式,而且其突變位點很多。必須使用PCR擴增結(jié)合,ASO,SSCP或使用擴增片段長度多態(tài)性分析(AmpFLA)進行檢測,這些技術(shù)都較復(fù)雜,檢驗人員須經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)。 PCR的三個反應(yīng)(變性-退火-延伸)0步驟反復(fù)進行,使DNA擴增量呈指數(shù)上升。上海高校科研PCR儀廠家供應(yīng)

    微滴),包含一個或多個拷貝的核酸分子(也就是說我們所說的DNA模板),這是與PCR或qPCR反應(yīng)的區(qū)別,PCR或qPCR只在一個反應(yīng)體系中進行,而數(shù)字PCR在每個反應(yīng)單元(微滴)中都會對目標(biāo)分子進行擴增,擴增結(jié)束后統(tǒng)計熒光信號并分析。數(shù)字PCR檢測其實離我們越來越近,下面我們以幾個臨床案例研究來舉例,展示數(shù)字PCR巨大的臨床應(yīng)用前景。1).個體化診療通過檢測T790M位點突變情況,可以更好地評估一代TKI藥物的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平臺ARMS檢測技術(shù)的靈敏度有限,沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技術(shù)展現(xiàn)出了無與倫比的檢測精度,此外,dPCR定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了,可以監(jiān)控突變含量變化,做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。2.)基因表達分析伊馬替尼(Imatinib)可以有效幫助很多慢性髓細(xì)胞白血?。–ML)患者延長生存期,但是臨床上發(fā)現(xiàn),伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行測定,結(jié)果檢測下限可以達到,顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢[2]。 上海梯度PCR儀哪個牌子好PCR技術(shù)不僅可用于基礎(chǔ)研究,還適用于日常的臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究。

    基因擴增實驗又稱PCR實驗,其特點是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,例如:特定基因的檢測和診斷,DNA指紋、個體識別、親子鑒定及法醫(yī)物證,動、植物檢疫,動物及其衍生產(chǎn)品檢測,動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測,轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。PCR實驗室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設(shè)有走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔的,各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū),擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動。實驗室的氣流也應(yīng)從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應(yīng)安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。

力康生物醫(yī)療集研發(fā)、制造、銷售、服務(wù)為一體,專注于為您提供完善可靠的數(shù)字化醫(yī)療及實驗室解決方案??偛吭O(shè)于香港,員工千余人,產(chǎn)品遍布全球百多個地區(qū)。集團擁有多家專業(yè)設(shè)備研發(fā)生產(chǎn)工廠,青浦工業(yè)園區(qū)是集團研發(fā)制造基地,力新儀器(上海)有限公司是集團下屬銷售運營中心。投身醫(yī)療領(lǐng)域三十年,力康已是中國頗具規(guī)模的醫(yī)療器械制造商和供應(yīng)商。多領(lǐng)域數(shù)字化解決方案、多樣化智能操作系統(tǒng)、準(zhǔn)確的檢測結(jié)果、貼心的用戶體驗,使 “力康 Heal Force” 品牌享譽國內(nèi)外。在醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)中,pcr儀對傳染疾病的診斷意義尤為重要。

    PCR實驗室又叫基因擴增實驗,是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA的片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握生物體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達納米級別。PCR實驗室運行的條件1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實驗室實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出,由于該技術(shù)不實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應(yīng)用。2、檢測設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實驗室設(shè)置要求熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件,構(gòu)成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統(tǒng)。3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認(rèn)證;4、檢測人員必須通過國家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓(xùn)并取得合格證書。PCR實驗室內(nèi)工作人員必須參加由國家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗中心舉辦的臨床基因擴增培訓(xùn)班,并持證上崗。PCR實驗室通過驗收,實驗室至少必須應(yīng)有兩個以上持有“臨床基因檢測上崗證”。PCR實驗室必須建立嚴(yán)格的實驗室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)、建立系列質(zhì)量管理文件等。確保實驗室日常運行符合國家衛(wèi)生部的要求,確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確、確保實驗室衛(wèi)生安全。PCR實驗室在儀器設(shè)備等硬件上要滿足開展臨床檢驗的條件,包括生物安全柜和PCR儀。上海力康基因擴增PCR儀規(guī)格有哪些

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種用于放大擴增特定DNA的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制.上海高??蒲蠵CR儀廠家供應(yīng)

    實驗室基礎(chǔ)設(shè)施設(shè)計:包括實驗室基礎(chǔ)裝修、實驗室凈化工程、實驗室供排水工程、實驗室電路系統(tǒng)。1)實驗室基礎(chǔ)裝修需要潔凈天花、地板、隔斷,合理設(shè)置緩存間及配置凈化門、觀察窗、傳遞窗等。2)實驗室凈化工程實驗室應(yīng)配備單獨送排風(fēng)設(shè)施,試劑配置區(qū)、核酸提取區(qū)和擴增分析區(qū)應(yīng)配備凈化系統(tǒng)。3)實驗室供排水工程包括非手動水龍頭、不銹鋼或PP水池和緊急淋浴器及供排水管線管路。4)實驗室電路系統(tǒng):根據(jù)儀器的功率配置合適的功率,特別注意高壓滅菌鍋的功率,注意實驗室用電安全。5)配備適用的應(yīng)急器材,如應(yīng)急照明設(shè)備、消防器材、意外事故處理器材等。實驗室儀器及設(shè)備:1)更衣室儀器及設(shè)備:更衣柜或掛衣架、鞋柜以及消毒器和烘干器。2)配液室儀器及設(shè)備:佰倫超凈工作臺、冰箱、小型離心機、旋渦振蕩器、微量移液器等。3)樣品處理室儀器及設(shè)備:離心機、組織研磨機、Ⅱ級生物安全柜、恒溫水浴鍋、冰柜等、可移動紫外消毒器。4)核酸提取室儀器及設(shè)備:核酸提取儀、Ⅱ級生物安全柜、恒溫水浴鍋、小型離心機、微量移液器、可移動紫外消毒器等。5)擴增分析區(qū)儀器及設(shè)備:熒光定量PCR儀、電腦、打印機、不間斷電源、可移動紫外消毒器等。上海高??蒲蠵CR儀廠家供應(yīng)

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