隨后,引入一種固相載體,如蛋白 A 或蛋白 G 偶聯(lián)的瓊脂糖珠。這些固相載體能夠與抗體的 Fc 段結(jié)合,從而將抗原 - 抗體復合物從溶液中沉淀下來。經(jīng)過多次洗滌步驟,去除未結(jié)合的雜質(zhì),通過適當?shù)姆椒ǎ缂訜峄蛱砑酉疵摼彌_液,將目標分子從復合物中釋放出來,以便后續(xù)的分析檢測。免疫沉淀技術(shù)在多個領(lǐng)域有著廣泛的應用。在基礎(chǔ)科研中,它常被用于研究蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用,通過捕獲與目標蛋白相互結(jié)合的其他蛋白,繪制蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò),有助于揭示細胞內(nèi)復雜的生物學過程。植物學研究用免疫沉淀探究植物蛋白功能,助力培育更優(yōu)農(nóng)作物品種,保障糧食安全。溫州Protein AG免疫沉淀外包公司
我們向裂解液中加入針對某個已知蛋白(誘餌蛋白)的特異性抗體,抗體與誘餌蛋白結(jié)合形成抗原 - 抗體復合物。如同 IP 免疫沉淀一樣,借助 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠等固相載體,將抗原 - 抗體復合物從復雜的裂解液中分離出來。此時,與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白質(zhì)(獵物蛋白)也會隨著誘餌蛋白一起被沉淀下來,從而實現(xiàn)對蛋白質(zhì)復合物的富集和分析,幫助我們了解細胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系。實驗流程上,首先同樣是細胞或組織的裂解。廣州蛋白免疫沉淀實驗原理優(yōu)化免疫沉淀條件,像調(diào)整緩沖液 pH 值,能提升目標分子沉淀效率,提高實驗精度。
在生命科學研究的復雜版圖中,蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)的解析是揭示生命奧秘的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。Co-IP 免疫沉淀(免疫共沉淀)技術(shù)作為研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,為科研人員深入探索細胞內(nèi)分子機制提供了極為有力的工具。Co-IP 免疫沉淀的原理基于蛋白質(zhì)之間的相互結(jié)合以及抗原 - 抗體的特異性識別。在細胞內(nèi),許多蛋白質(zhì)并非孤立存在,而是與其他蛋白質(zhì)形成復合物共同行使生物學功能。當細胞裂解后,這些蛋白質(zhì)復合物依然能夠保持相對的穩(wěn)定。
在研究蛋白質(zhì)功能時,科研人員可以通過 IP 免疫沉淀獲得目標蛋白,進一步研究其在細胞內(nèi)的定位、活性以及與其他分子的相互作用;在分析蛋白質(zhì)翻譯后修飾時,如磷酸化、乙?;龋琁P 免疫沉淀能夠富集修飾后的蛋白質(zhì),便于深入研究修飾對蛋白質(zhì)功能的影響;在疾病機制探索中,通過對疾病相關(guān)蛋白進行 IP 免疫沉淀分析,有助于發(fā)現(xiàn)潛在的疾病標志物和靶點。隨著生命科學的飛速發(fā)展,IP 免疫沉淀技術(shù)也在不斷革新。未來,它將與新興技術(shù)如單細胞蛋白質(zhì)組學、空間蛋白質(zhì)組學等深度融合,為蛋白質(zhì)研究提供更加、精細的信息,助力科研人員在生命科學的探索道路上不斷前行,為解決人類健康問題和推動生物科學發(fā)展做出更大貢獻。免疫沉淀時,合適緩沖液能穩(wěn)定樣本,利于抗原抗體反應,對沉淀效果影響重大。
Co-IP(免疫共沉淀)是一種用于研究蛋白質(zhì)間相互作用的實驗技術(shù),它基于抗原-抗體反應的特異性,通過特定的抗體將目標蛋白質(zhì)及其與之相互作用的蛋白質(zhì)從復雜的生物樣本同沉淀下來。這項技術(shù)自誕生以來,就因其獨特的優(yōu)勢而在蛋白質(zhì)組學、生物化學和分子生物學等領(lǐng)域得到了廣泛應用。Co-IP技術(shù)不僅能夠幫助科學家們揭示蛋白質(zhì)間的相互作用關(guān)系,還能為理解生命活動的復雜性和多樣性提供重要線索。隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展,Co-IP技術(shù)也在不斷完善和創(chuàng)新,為生命科學領(lǐng)域的研究注入了新的活力。細胞裂解液經(jīng)免疫沉淀處理,可有效分離出細胞內(nèi)參與特定信號通路的關(guān)鍵蛋白。南京ChIP免疫沉淀磁珠貨期
憑借 anti DYKDDDDK,免疫沉淀可高效富集含該標簽蛋白,為分析提供高純度樣本。溫州Protein AG免疫沉淀外包公司
在生命活動的微觀舞臺上,蛋白質(zhì)絕非孤立行事,它們相互協(xié)作,構(gòu)成了復雜而精密的蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò),共同調(diào)控著細胞的各項生理功能。Co-IP 免疫沉淀(Co-Immunoprecipitation,免疫共沉淀)技術(shù),正是科研人員用以解析這一神秘網(wǎng)絡(luò)的有力工具,在生命科學研究中占據(jù)著舉足輕重的地位。Co-IP 免疫沉淀的原理基于細胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間天然存在的相互結(jié)合關(guān)系,以及抗原 - 抗體的特異性識別。細胞內(nèi)眾多蛋白質(zhì)通過結(jié)構(gòu)域的相互作用形成復合物,共同執(zhí)行生物學功能。溫州Protein AG免疫沉淀外包公司