探針的標記也可以采用隨機引物法,即向變性的探針溶液加入6個核苷酸的隨機DNA小片段,作為引物,當后者與單鏈DNA互補結(jié)合后,按堿基互補原則不斷在其3’OH端添加同位素標記的單核苷酸,這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針??膳c固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結(jié)合,經(jīng)放射自顯影或其他檢測手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡...
該系統(tǒng)為電子探針分析提供具有足夠高的入射能量,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,作為X射線的激發(fā)源。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線的信號強度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),常用的加速電壓為10-30 KV,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,這是就能觀察到電子束轟擊點的位置,通過樣品移動裝置把它調(diào)到光學顯微鏡目鏡十字線交叉點上,這樣就能保證電子束正好...
DNA探針根據(jù)其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基因序列互補的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DN...
電子探針是運用電子所形成的探測針(細電子束)作為X射線的激發(fā)源來進行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對象是固體物質(zhì)表面細小顆粒或微小區(qū)域,**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12(Mg)至92(U),原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進行測量。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高。此外,后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相、******照相。能兼作透射電鏡、能進行電子衍射、能作電子熒光觀察等。電子探針和掃描電鏡在電子光學系統(tǒng)的構(gòu)造基本相同,它們常常組合成單一的儀器。嘉定...
電子探針是運用電子所形成的探測針(細電子束)作為X射線的激發(fā)源來進行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對象是固體物質(zhì)表面細小顆?;蛭⑿^(qū)域,**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12(Mg)至92(U),原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進行測量。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高。此外,后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相、******照相。能兼作透射電鏡、能進行電子衍射、能作電子熒光觀察等。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素。奉賢區(qū)挑選探針按需定制(1...
(1)電子光學系統(tǒng)。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。被激發(fā)原子發(fā)射特征X射線譜過程如下:圍繞原子核運動的內(nèi)層電子,被電子束的電子轟擊后,其他外層電子為補充轟擊出的電子而發(fā)生躍遷,在躍遷過程中釋放出能量,即發(fā)射出X射線。(2)X射線譜儀。測量各種元素產(chǎn)生的X射線波長和強度,并以此對微小體積中所含元素進行定性和定量分析。特征X射線圖像顯像管的原理是:X射線束入射到一已知晶面間距的晶體上(X射線分光光度計的彎曲晶體上),經(jīng)衍射后各種波長的X射線按不同的布拉格角彼此分開,因此如轉(zhuǎn)動晶體,改變衍射角,同時以兩倍于晶體的轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)動計數(shù)器,就可以依次測量出各種元素所產(chǎn)生的X射線波長和強度,...
(3)X射線強度測量系統(tǒng)。特征X射線,由B系統(tǒng)中的計數(shù)管接收,并轉(zhuǎn)換成電脈沖,通過脈沖高度分析儀、計數(shù)率計、定標器、電子電位計將其強度測量出來。(4)光學顯微鏡目測系統(tǒng)。用以準確選擇需要分析的區(qū)域,并作光學觀察。(5)背散射電子圖像系統(tǒng)。(6)吸收電子圖像系統(tǒng)。(7)特征X射線圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線晶體光學,主要應用兩種方法:1)晶體衍射法(X射線光譜法)。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度,來衍射某種波長的X射線,通過讀出晶體不同的衍射角,求出X射線的波長,從而定出樣品所含的元素。能進行微區(qū)分析。可分析數(shù)個μm3內(nèi)元素的成分。金山區(qū)挑選探針現(xiàn)價2.界面探針(Interface Probe...
DNA探針是**常用的核酸探針,指長度在幾百堿基對以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針?,F(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多,有細菌、病毒、原蟲、***、動物和人類細胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的,如細菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應用。以細菌為例,分子雜交技術(shù)用于細菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準確的多,是細菌分類學的一個發(fā)展方向。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景。探針卡是IC制造中對制造成本影響相當大的重要制程之一。崇明區(qū)特制探針五星服務探針卡...
為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交,有必要對探針加以標記,以便在結(jié)合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優(yōu)點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。**常用的探針標記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當濃度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探針DNA雙鏈上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNa poly merasⅠ)的5’→3’的外切酶活性,切去帶有5’磷酸的核苷酸;同時又利用該酶的5’→3’聚酶活性,使32P標記的互補核...
電子探針分析是指以聚焦的高速電子來激發(fā)出試樣表面組成元素的特征X射線,對微區(qū)成分進行定性或定量分析的一種材料物理試驗,又稱電子探針X射線顯微分析。電子探針分析的原理是:以動能為10~30千電子伏的細聚焦電子束轟擊試樣表面,擊出表面組成元素的原子內(nèi)層電子,使原子電離,此時外層電子迅速填補空位而釋放能量,從而產(chǎn)生特征X射線。電子探針的功能主要是進行微區(qū)成分分析。它是在電子光學和X射線光譜學原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種高效率分析儀器。其原理是用細聚焦電子束入射樣品表面,激發(fā)出樣品元素的特征x射線,分析特征X射線的波長(或特征能量)即可知道樣品中所含元素的種類(定性分析),分析X射線的強度,則可知道樣品...
DNA探針根據(jù)其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基因序列互補的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DN...
2.手機偽隨機mac某些手機品牌對WiFi探針技術(shù)進行了防護,在未連接WiFi的情況下手機廣播的是隨機mac,即使被WiFi探針設(shè)備捕獲也無法關(guān)聯(lián)到用戶正確信息。這種偽隨機mac可避免無任何操作下WiFi探針對當前環(huán)境的被動監(jiān)測,iOS 9.0以上版本也有類似機制。3. WiFi誘導但偽隨機mac機制并不能完全保證用戶網(wǎng)絡(luò)安全,因為WiFi協(xié)議默認當用戶連接過某個WiFi后,再次發(fā)現(xiàn)同名**WiFi即可自動連接。處于WiFi連接狀態(tài)的真實手機mac地址即可被捕獲,設(shè)備廠家則利用協(xié)議機制誘導用戶連接偽造WiFi,從而捕獲到用戶手機mac信息。把電子顯微鏡和電子探針結(jié)合,可把在顯微鏡下觀察到的顯微...
特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣,也容易獲得,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是,將特定的基因片段裝載到質(zhì)?;蚴删w中,經(jīng)過擴增、酶切、純化等復雜的步驟,才能得到一定長度的cDNA探針。這一過程比較復雜,有相應條件的實驗室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,由核酸合成儀來完成,可廉價獲得大量的此類探針。質(zhì)量也相對來說更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基,所以有良好的信號放大作用,但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十數(shù)個至數(shù)十個堿基,滲透性強,但信號放大作用則較差,合成的多相...
DNA探針根據(jù)其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基因序列互補的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DN...
(3)X射線強度測量系統(tǒng)。特征X射線,由B系統(tǒng)中的計數(shù)管接收,并轉(zhuǎn)換成電脈沖,通過脈沖高度分析儀、計數(shù)率計、定標器、電子電位計將其強度測量出來。(4)光學顯微鏡目測系統(tǒng)。用以準確選擇需要分析的區(qū)域,并作光學觀察。(5)背散射電子圖像系統(tǒng)。(6)吸收電子圖像系統(tǒng)。(7)特征X射線圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線晶體光學,主要應用兩種方法:1)晶體衍射法(X射線光譜法)。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度,來衍射某種波長的X射線,通過讀出晶體不同的衍射角,求出X射線的波長,從而定出樣品所含的元素。后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相、照相。青浦區(qū)優(yōu)勢探針按需定制在不損耗試樣的情況下,電子探針通常能分析直...
②隨機引物法。隨機引物是指含有各種可能排列順序的寡聚核苷酸片斷的混合物,因此它可以與任意核苷酸序列雜交,起到聚合酶反應的引物作用。將待標記的DNA探針片斷變性后與隨機引物一起雜交,然后以此雜交的寡聚核苷酸為引物,在大腸桿菌DNA聚合酶I大斷段(KlenowFragment)催化下,合成與探針DNA互補的DNA鏈,當在反應體系中含有a-32P-dNTP時,即形成放射性同位素標記的DNA探針。具有上述優(yōu)點,可代替缺口平移法。此外大小、單雙DNA均可標記,標記均勻,標記率高,但也不能標記環(huán)狀DNA。隨機引物法標記探針一般長400~600bp。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的結(jié)構(gòu)。黃...
體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)不斷完善,已相繼建立了單向和雙向體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。該系統(tǒng)主要基于一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點兩側(cè)分別帶有SP6啟動子和T7啟動子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進行RNA轉(zhuǎn)錄,如果在多克隆位點接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉(zhuǎn)錄生成RNA。這種體外轉(zhuǎn)錄反應效率很高,在1h內(nèi)可合成近10μg的RNA產(chǎn)生,只要在底物中加入適量的放射性或生物素標記的NTP,則所合成的RNA可得到高效標記。該方法能有效地控制探針的長度并可提高標記物的利用率。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素。崇明區(qū)挑選探針推薦貨源DNA探針...
電子探針儀(圖1)主要包括:探針形成系統(tǒng) (電子槍、加速和聚焦部件等)、X射線信號檢測系統(tǒng)和顯示、記錄系統(tǒng)、樣品室、高壓電源和掃描系統(tǒng)以及真空系統(tǒng)。電子探針的**早應用領(lǐng)域是金屬學。對合金中各組成相、夾雜物等可作定性和定量分析,直觀而方便,還能較準確地測定元素的擴散和偏析情況。此外,它還可用于研究金屬材料的氧化和腐蝕問題,測定薄膜、滲層或鍍層的厚度和成分等,是機械構(gòu)件失效分析、生產(chǎn)工藝的選擇、特殊用材的剖析等的重要手段。圖2為鎂合金中稀土氧化物在晶界析出的電子探針分析照片。電子探針可以對試樣中微小區(qū)域(微米級)的化學組成進行定性或定量分析。崇明區(qū)特制探針現(xiàn)價B、在線測試探針:PCB線路板安裝元...
是將探針卡上的探針直接與芯片上的焊墊或凸塊直接接觸,引出芯片訊號,再配合周邊測試儀器與軟件控制達到自動化量測的目的。探針卡應用在IC尚未封裝前,針對裸晶系以探針做功能測試,篩選出不良品、再進行之后的封裝工程。因此,探針卡是IC制造中對制造成本影響相當大的重要制程之一。用戶危害2019年央視3·15晚會曝光了一種WiFi探針盒子,這種盒子能在用戶毫不知情的情況下,獲取用戶手機MAC地址,并將其轉(zhuǎn)換成用戶手機號。將近半年過去了,北京青年報記者調(diào)查發(fā)現(xiàn),仍有一些商家在網(wǎng)絡(luò)商城中售賣此類WiFi探針盒子,并均表示此類盒子可以采集周邊用戶的手機號碼,用于“精細營銷”。 [2]能進行現(xiàn)場分析。無需把分析對...
DNA探針根據(jù)其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基因序列互補的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DN...
電子探針儀鏡筒部分的構(gòu)造大體上和掃描電子顯微鏡相同,只是在檢測器部分使用的是X射線譜儀、專門用來檢測X射線的特征波長或特征能量,以此來對微區(qū)的化學成分進行分析。因此,除專門的電子探針儀外,有相當一部分電子探針儀是作為附件安裝在掃描電鏡或透射電鏡鏡筒上,以滿足微區(qū)組織形貌、晶體結(jié)構(gòu)及化學成分三位一體同位分析的需要 [1]。用波長色散譜儀(或能量色散譜儀)和檢測計數(shù)系統(tǒng),測量特征X射線的波長(或能量)和強度,即可鑒別元素的種類和濃度??梢赃M行點、線掃描(得到層成分分布信息)、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。崇明區(qū)品牌探針五星服務探針DNA克隆的篩選也可采用血清學方法,所不同的是所建DNA文庫為可...
電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀、X射線顯微分析儀。其原理是利用聚焦的高能電子束轟擊固體表面,使被轟擊的元素激發(fā)出特征X射線,按其波長及強度對固體表面微區(qū)進行定性及定量化學分析。主要用來分析固體物質(zhì)表面的細小顆?;蛭⑿^(qū)域,**小范圍直徑為1μm左右。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。***感量可達10-14至10-15g。近年形成了掃描電鏡-顯微分析儀的聯(lián)合裝置,可在觀察微區(qū)形貌的同時逐點分析試樣的化學成分及結(jié)構(gòu)。廣泛應用于地質(zhì)、冶金材料、水泥熟料研究等部門。如圖《電子探針示意圖》所示??梢赃M行點、線掃描(得到層成分分布信息)、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。楊浦區(qū)特制探針五星服務電...
(3)X射線強度測量系統(tǒng)。特征X射線,由B系統(tǒng)中的計數(shù)管接收,并轉(zhuǎn)換成電脈沖,通過脈沖高度分析儀、計數(shù)率計、定標器、電子電位計將其強度測量出來。(4)光學顯微鏡目測系統(tǒng)。用以準確選擇需要分析的區(qū)域,并作光學觀察。(5)背散射電子圖像系統(tǒng)。(6)吸收電子圖像系統(tǒng)。(7)特征X射線圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線晶體光學,主要應用兩種方法:1)晶體衍射法(X射線光譜法)。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度,來衍射某種波長的X射線,通過讀出晶體不同的衍射角,求出X射線的波長,從而定出樣品所含的元素。這種神秘的Wi-Fi探針,實際是“WiFi信道掃描工具”。黃浦區(qū)標準探針現(xiàn)價進行分子突變需要大量的探針拷貝,...
缺口平移法是**常用的探針標記法,反應體系的主要成分有DNA酶I(DNase I)、大腸桿菌DNA聚合酶I(DNA polymerase I)、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標記的核苷酸(如dATP、dTTP、dCTP,”P—dGTP),其原理如圖1。首先用適當濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機切開若干個缺口(不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓?,然后再借助于DNA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性,切去5’末端的核苷酸;同時又利用該酶的5’→3’聚合酶活性,使32P標記的互補核苷酸補入缺口.DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用,使缺口不斷向3’的方向移動,DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標...
特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣,也容易獲得,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是,將特定的基因片段裝載到質(zhì)?;蚴删w中,經(jīng)過擴增、酶切、純化等復雜的步驟,才能得到一定長度的cDNA探針。這一過程比較復雜,有相應條件的實驗室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,由核酸合成儀來完成,可廉價獲得大量的此類探針。質(zhì)量也相對來說更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基,所以有良好的信號放大作用,但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十數(shù)個至數(shù)十個堿基,滲透性強,但信號放大作用則較差,合成的多相...
該系統(tǒng)為電子探針分析提供具有足夠高的入射能量,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,作為X射線的激發(fā)源。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線的信號強度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),常用的加速電壓為10-30 KV,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,這是就能觀察到電子束轟擊點的位置,通過樣品移動裝置把它調(diào)到光學顯微鏡目鏡十字線交叉點上,這樣就能保證電子束正好...
該系統(tǒng)為電子探針分析提供具有足夠高的入射能量,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,作為X射線的激發(fā)源。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線的信號強度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),常用的加速電壓為10-30 KV,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,這是就能觀察到電子束轟擊點的位置,通過樣品移動裝置把它調(diào)到光學顯微鏡目鏡十字線交叉點上,這樣就能保證電子束正好...
DNA探針是**常用的核酸探針,指長度在幾百堿基對以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針?,F(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多,有細菌、病毒、原蟲、***、動物和人類細胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的,如細菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應用。以細菌為例,分子雜交技術(shù)用于細菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準確的多,是細菌分類學的一個發(fā)展方向。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素。普陀區(qū)挑選探針銷售廠家②隨機引...
③末端標記法(又叫尾標)。利用末端轉(zhuǎn)移酶可進行“尾標”,尾標適用于寡核苷酸探針標記,寡核苷酸探針多用于核酸“點”突變的檢測,該探針可用核酸合成儀人工合成,克隆出的探針一般較長,特異性好,標記量大,雜交的檢出信號強。探針合成的注意事項①合成探針的長短,一般在20~50個核苷酸之間。合成過長成本高,且易出現(xiàn)聚合酶合成錯誤,雜交時間長,合成太短則特異性下降。②堿基組成G-C應含40%~60%,一種堿基連續(xù)重復不超過4個,以免非特異性雜交產(chǎn)生。③探針自身序列內(nèi)應無互補區(qū)域,以免產(chǎn)生“發(fā)夾”結(jié)構(gòu),影響雜交??傊?,一個好的探針**終要在實踐中才能加以確認。應用于地質(zhì)、冶金材料、水泥熟料研究等部門。寶山區(qū)標...
早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉(zhuǎn)錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉(zhuǎn)錄分析(nuclearrunontranscrip-tionassay)時,在體外將細胞核分離出來,然后在α-32P-ATP的存在下進行轉(zhuǎn)錄,所合成mR-NA均摻入同位素而得到標記,此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾...