文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作,在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣,分別檢測dsDNA濃度及功能性LV病毒滴度。經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn),——1.dsDNA去除主要發(fā)生在澄清環(huán)節(jié),能去除dsDNA的80%-90%;2. M-SAN HQ中鹽核酸酶比Benz...
ArcticZymes Technologies提供獨特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,SANs)系列產(chǎn)品,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶。這兩款酶都是非特異核酸內(nèi)切酶,跟Benzonase一樣能高效...
ArcticZymes廠家對鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,包括SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),如microbes...
三種AAV載體的生產(chǎn)體系(三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系以及包裝細(xì)胞體系) 中都會出現(xiàn)三種衣殼:完整衣殼(full capsid)、部分衣殼(partial capsid),和空衣殼(empty capsid)。其中完整衣殼包含正確的DNA序列,是人們所...
ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?);立足北極海洋區(qū),致力于從海洋生物中識別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、體外診斷和藥物領(lǐng)域。以其產(chǎn)品的獨特性質(zhì)及超過30年的生產(chǎn)經(jīng)驗積淀,Arct...
ArcticZymes廠家對鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,包括SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),如microbes...
ArcticZymes產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于藥物生產(chǎn)、分子研究、體外診斷等領(lǐng)域。例如,在藥物生產(chǎn)領(lǐng)域,鹽活性核酸酶(SANs)系列產(chǎn)品用于細(xì)胞基因藥物及Vaccine的virus載體生產(chǎn)過程。在分子研究領(lǐng)域,蝦堿酶(SAP)、DNA酶(Dnase)、蛋白酶(AZ Pr...
ArcticZymes Technologies有兩條產(chǎn)品線,分別針對分子診斷和生物藥物生產(chǎn)兩個領(lǐng)域。在分子診斷領(lǐng)域,產(chǎn)品有蝦堿酶(SAP)、UNG酶、等溫擴(kuò)增酶(IsoPol)、連接酶、蛋白酶、內(nèi)切核酸酶及外切核酸酶等,涉及核酸抽提、擴(kuò)增及測序等應(yīng)用。在生物...
桿狀病毒表達(dá)載體體系Baculovirus/Sf9(Baculovirusexpression vector,BEV),是應(yīng)用桿狀病毒表達(dá)載體(BEV)系統(tǒng)infect昆蟲細(xì)胞Sf9,是一種替代哺乳動物包裝細(xì)胞系的生產(chǎn)方案。整個系統(tǒng)包含兩種BEV,其中一個BE...
三種AAV載體的生產(chǎn)體系(三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系以及包裝細(xì)胞體系) 中都會出現(xiàn)三種衣殼:完整衣殼(full capsid)、部分衣殼(partial capsid),和空衣殼(empty capsid)。其中完整衣殼包含正確的DNA序列,是人們所...
綜合腺相關(guān)病毒AAV制備的三個工藝階段介紹,可以看出下游處理可以占病毒生產(chǎn)總成本的很大一部分,而且難度也是非常大,尤其是純化過程。原因之一是由于有超過100種不同血清型的變體AAV衣殼,不同血清型的AAV蛋白存在差異。因此,各種血清型的表面特性增加AAV純化難...
上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士,于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材,遵守相關(guān)法規(guī)要求,如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等,致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測研發(fā)等...
ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶,2021年推出對應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量...
文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作,在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣,分別檢測dsDNA濃度及功能性LV病毒滴度。經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn),——1.dsDNA去除主要發(fā)生在澄清環(huán)節(jié),能去除dsDNA的80%-90%;2. M-SAN HQ中鹽核酸酶比Benz...
跟其他類型的核酸酶一樣,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆滅活及不可逆滅活。金屬離子螯合劑如EDTA會可逆抑制兩者的活性,加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性;后續(xù)補加過量的Mg2+即可...
一般來說,生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊商標(biāo))為主,能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的...
在生物工藝中,核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA(HCD),并將其分解成足夠小的片段,以便在下游純化過程中去除。雖然大多數(shù)核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段,比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸...
基因藥物是指將外源基因引入靶細(xì)胞,糾正或補償基因缺陷或異常引起的疾病的。這種策略對許多疾病的康復(fù)有很大的潛力,包括ai癥、神經(jīng)退行性疾病和心血管疾病。目前已經(jīng)進(jìn)行了2000多項基因藥物臨床試驗,大多數(shù)載體已被證明是有效和安全的。目前的研究表明,大約64%的基因...
從細(xì)胞中釋放AAV載體的基本機械技術(shù)是反復(fù)冷凍/解凍,然后是低速離心步驟然而,但是這種技術(shù)很難放大生產(chǎn)。機械均質(zhì),如法式壓濾,是另一種裂解方法,在這種方法中,細(xì)胞膜在高壓剪切力作用下發(fā)生破裂。雖然這種方法是可放大的,但是由于剪切應(yīng)力引起的聚集和沉淀,往往會導(dǎo)致...
文章作者對酶法去除dsDNA進(jìn)行了優(yōu)化研究,兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml,Mg2+濃度為5mM,通過PicoGreen檢測dsDNA含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml...
文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作,在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣,分別檢測dsDNA濃度及功能性LV病毒滴度。經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn),——1.dsDNA去除主要發(fā)生在澄清環(huán)節(jié),能去除dsDNA的80%-90%;2. M-SAN HQ中鹽核酸酶比Benz...
離子交換層析 (IEC) 是一種簡單、通用且經(jīng)濟(jì)高效的技術(shù),已成為許多載體純化的關(guān)鍵步驟。IEC分為陰離子/陽離子交換柱,其中AEC(Anion-exchange chromatography)適用于AAV純化,是大規(guī)模AAV生產(chǎn)中去除空衣殼的主要手段。AAV...
大規(guī)模生產(chǎn)階段,AAV/LV載體生產(chǎn)流程跟抗體、疫苗類藥物的生產(chǎn)類似,主要包含上游培養(yǎng)、下游純化及制劑部分。上游培養(yǎng)分為質(zhì)粒開發(fā)、細(xì)胞擴(kuò)增、三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染及病毒載體生產(chǎn)等步驟。下游純化分為細(xì)胞裂解釋放AAV病毒顆粒(可以通過去污劑、機械作用、高滲或凍融操作等)o...
ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來源于深海microbes中,具有一些共同的特性。1. 熱不穩(wěn)定性,使酶產(chǎn)品相對容易失活,簡化工作流程,方便自動化過程;2. 低溫活性,即在低溫或常溫下具有更高活性,縮短酶與底物的孵育時間,提高反應(yīng)速度及...
SANHQ(生物工藝級)是用Pichiapastoris表達(dá)的重組非特異性內(nèi)切核酸酶,廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中,有效去除核酸污染。該酶在高鹽濃度下具有良好的活性,應(yīng)用在生產(chǎn)工藝流程中提高去除效率和目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。在生物制品生產(chǎn),如AAV載體及腺病毒載體疫苗生產(chǎn)中...
經(jīng)典的慢病毒載體(LV)的生產(chǎn)工藝如下,——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染24小時后LV由轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中;收獲上清培養(yǎng)液后,加入核酸酶去除HCD污染,通過澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì);下游純化步驟分離LV載體,純化方法包括切...
基因療法制造商面臨的挑戰(zhàn)與抗體療法剛出現(xiàn)時單克隆抗體制造商面臨的挑戰(zhàn)相似。例如,在生產(chǎn)、儲存和處理過程中,單克隆抗體也會受到低滴度、產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)和降解的挑戰(zhàn)。盡管與重組單克隆抗體相比,單劑量AAV產(chǎn)品與工藝相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險可能更低(取決于雜質(zhì)的類型、劑...
在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域,倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 1...
殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì),其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險。相關(guān)研究表明,基因的大小普遍在200bp以上,因此大于200bp有可能會有一定的致病性,而且殘留DNA片段越大,生物制品的風(fēng)險等級越高。因此,各國監(jiān)管機構(gòu)對其提出了嚴(yán)格要求。美國食...
經(jīng)典的慢病毒載體(LV)的生產(chǎn)工藝如下,——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染24小時后LV由轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中;收獲上清培養(yǎng)液后,加入核酸酶去除HCD污染,通過澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì);下游純化步驟分離LV載體,純化方法包括切...