染色質(zhì)由組蛋白和DNA組成，——147個(gè)堿基對(duì)的DNA纏繞在8個(gè)組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周?chē)?，形成基本的染色質(zhì)單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。DNA帶負(fù)電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且...

ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品（Salt Active Nucleases，SANs）的生產(chǎn)及質(zhì)控，包括SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上，增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，如microbes...

ArcticZymes產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于藥物生產(chǎn)、分子研究、體外診斷等領(lǐng)域。例如，在藥物生產(chǎn)領(lǐng)域，鹽活性核酸酶（SANs）系列產(chǎn)品用于細(xì)胞基因藥物及Vaccine的virus載體生產(chǎn)過(guò)程。在分子研究領(lǐng)域，蝦堿酶（SAP）、DNA酶（Dnase）、蛋白酶（AZ Pr...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求。美國(guó)食...

經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線，分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中，細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級(jí)MSC/P...

在生物工藝中，核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA（HCD），并將其分解成足夠小的片段，以便在下游純化過(guò)程中去除。雖然大多數(shù)核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段，比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸...

綜合腺相關(guān)病毒AAV制備的三個(gè)工藝階段介紹，可以看出下游處理可以占病毒生產(chǎn)總成本的很大一部分，而且難度也是非常大，尤其是純化過(guò)程。原因之一是由于有超過(guò)100種不同血清型的變體AAV衣殼，不同血清型的AAV蛋白存在差異。因此，各種血清型的表面特性增加AAV純化難...

AAV病毒滴度通常分為物理滴度和infection滴度。物理滴度一般是指基因組滴度或者衣殼滴度。在測(cè)定AAV的含量時(shí)，通常采用基因組滴度或者衣殼滴度作為單位，其中基因組滴度為攜帶基因組的AAV的濃度，衣殼滴度為AAV物理顆粒的濃度。基因組滴度一般采用qPCR、...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求。美國(guó)食...

跟其他類型的核酸酶一樣，SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多，分為可逆滅活及不可逆滅活。金屬離子螯合劑如EDTA會(huì)可逆抑制兩者的活性，加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性；后續(xù)補(bǔ)加過(guò)量的Mg2+即可...

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶，2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量...

一般來(lái)說(shuō)，生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo)）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀）的DNA和RNA。該酶來(lái)自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過(guò)E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的...

在生物工藝中，核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA（HCD），并將其分解成足夠小的片段，以便在下游純化過(guò)程中去除。雖然大多數(shù)核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段，比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸...

基因藥物是指將外源基因引入靶細(xì)胞，糾正或補(bǔ)償基因缺陷或異常引起的疾病的。這種策略對(duì)許多疾病的康復(fù)有很大的潛力，包括ai癥、神經(jīng)退行性疾病和心血管疾病。目前已經(jīng)進(jìn)行了2000多項(xiàng)基因藥物臨床試驗(yàn)，大多數(shù)載體已被證明是有效和安全的。目前的研究表明，大約64%的基因...

從細(xì)胞中釋放AAV載體的基本機(jī)械技術(shù)是反復(fù)冷凍/解凍，然后是低速離心步驟然而，但是這種技術(shù)很難放大生產(chǎn)。機(jī)械均質(zhì)，如法式壓濾，是另一種裂解方法，在這種方法中，細(xì)胞膜在高壓剪切力作用下發(fā)生破裂。雖然這種方法是可放大的，但是由于剪切應(yīng)力引起的聚集和沉淀，往往會(huì)導(dǎo)致...

文章作者對(duì)酶法去除dsDNA進(jìn)行了優(yōu)化研究，兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml，Mg2+濃度為5mM，通過(guò)PicoGreen檢測(cè)dsDNA含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對(duì)dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml...

文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作，在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣，分別檢測(cè)dsDNA濃度及功能性LV病毒滴度。經(jīng)過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，——1.dsDNA去除主要發(fā)生在澄清環(huán)節(jié)，能去除dsDNA的80%-90%；2. M-SAN HQ中鹽核酸酶比Benz...

離子交換層析 (IEC) 是一種簡(jiǎn)單、通用且經(jīng)濟(jì)高效的技術(shù)，已成為許多載體純化的關(guān)鍵步驟。IEC分為陰離子/陽(yáng)離子交換柱，其中AEC（Anion-exchange chromatography）適用于AAV純化，是大規(guī)模AAV生產(chǎn)中去除空衣殼的主要手段。AAV...

大規(guī)模生產(chǎn)階段，AAV/LV載體生產(chǎn)流程跟抗體、疫苗類藥物的生產(chǎn)類似，主要包含上游培養(yǎng)、下游純化及制劑部分。上游培養(yǎng)分為質(zhì)粒開(kāi)發(fā)、細(xì)胞擴(kuò)增、三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染及病毒載體生產(chǎn)等步驟。下游純化分為細(xì)胞裂解釋放AAV病毒顆粒（可以通過(guò)去污劑、機(jī)械作用、高滲或凍融操作等）o...

ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來(lái)源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 熱不穩(wěn)定性，使酶產(chǎn)品相對(duì)容易失活，簡(jiǎn)化工作流程，方便自動(dòng)化過(guò)程；2. 低溫活性，即在低溫或常溫下具有更高活性，縮短酶與底物的孵育時(shí)間，提高反應(yīng)速度及...

SANHQ(生物工藝級(jí))是用Pichiapastoris表達(dá)的重組非特異性內(nèi)切核酸酶，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中，有效去除核酸污染。該酶在高鹽濃度下具有良好的活性，應(yīng)用在生產(chǎn)工藝流程中提高去除效率和目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。在生物制品生產(chǎn)，如AAV載體及腺病毒載體疫苗生產(chǎn)中...

經(jīng)典的慢病毒載體（LV）的生產(chǎn)工藝如下，——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系，轉(zhuǎn)染24小時(shí)后LV由轉(zhuǎn)染陽(yáng)性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中；收獲上清培養(yǎng)液后，加入核酸酶去除HCD污染，通過(guò)澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì)；下游純化步驟分離LV載體，純化方法包括切...

基因療法制造商面臨的挑戰(zhàn)與抗體療法剛出現(xiàn)時(shí)單克隆抗體制造商面臨的挑戰(zhàn)相似。例如，在生產(chǎn)、儲(chǔ)存和處理過(guò)程中，單克隆抗體也會(huì)受到低滴度、產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)和降解的挑戰(zhàn)。盡管與重組單克隆抗體相比，單劑量AAV產(chǎn)品與工藝相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)可能更低（取決于雜質(zhì)的類型、劑...

在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動(dòng)物造模用陽(yáng)性及陰性抗體、泊洛沙姆P 1...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求。美國(guó)食...

經(jīng)典的慢病毒載體（LV）的生產(chǎn)工藝如下，——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系，轉(zhuǎn)染24小時(shí)后LV由轉(zhuǎn)染陽(yáng)性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中；收獲上清培養(yǎng)液后，加入核酸酶去除HCD污染，通過(guò)澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì)；下游純化步驟分離LV載體，純化方法包括切...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求。美國(guó)食...

ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來(lái)源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 熱不穩(wěn)定性，使酶產(chǎn)品相對(duì)容易失活，簡(jiǎn)化工作流程，方便自動(dòng)化過(guò)程；2. 低溫活性，即在低溫或常溫下具有更高活性，縮短酶與底物的孵育時(shí)間，提高反應(yīng)速度及...

在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下，AAV病毒顆粒表面會(huì)通過(guò)電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會(huì)被破壞，AAV病毒顆粒會(huì)逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求。美國(guó)食...