本發(fā)明的目的在于提供一種細胞凍存液,使凍存培養(yǎng)后的細胞具有成活率高的優(yōu)點,同時滿足凍存液成分簡單、成本低等要求。本發(fā)明是通過如下技術方案得以實現(xiàn)上述目的。***方面,本發(fā)明提供了一種細胞凍存液,所述細胞凍存液的成分如下:將上述組分加入到工業(yè)用水中,用于配置得到細胞凍存液。該細胞凍存液采用聯(lián)合滲透性和非滲透性保護液組合方案,細胞凍存液在完全凝固之前,滲透到細胞內(nèi),在細胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度,降低細胞內(nèi)外未結冰溶液中電解質(zhì)的濃度,從而保護細胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷,同時細胞內(nèi)水分也不會過分外滲,避免細胞過分脫水皺縮。第二方面,本發(fā)明提供了一種細胞凍存液的使用方法,所述方法包括如下步驟:1...
**常用的凍存液通常為胎牛血清中添加10%二甲基亞砜(DMSO),二甲基亞砜(DMSO),可以減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性,可以很好地在細胞凍存過程中保護細胞。但近年來,隨著人們對安全無毒的追求,而DMSO對細胞具有一定的毒性,牛血清存在病原菌污染的可能,所以越來越多不含血清、不含DMSO的安全、有效,凍存液被開發(fā)出來。比如CNA公開的凍存液,包括基本培養(yǎng)基、丙三醇、脯氨酸、四氫甲基嘧啶羧酸和右旋糖酐,具體配制比例如下:基本培養(yǎng)基:丙三醇:四氫甲基嘧啶羧酸=100:20-50:15-30;基本培養(yǎng)基:脯氨酸:右旋糖酐=100mL...
細胞凍存是細胞保種非常常用的一種辦法,在細胞凍存中有很多非常關鍵的因素,其中細胞凍存液是細胞凍存**關鍵的要素之一,是細胞凍存所必須的物質(zhì)。細胞凍存的作用不僅*是說只是用來進行細胞的保存,還可以進行售賣、運輸?shù)仁马?,所以說選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。無血清細胞凍存液作為細胞凍存液的一種,那么無血清細胞凍存液的優(yōu)點有哪些呢?很多所使用的傳統(tǒng)的細胞凍存液的成份主要是:新鮮的培養(yǎng)基,其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。凍存的方法:將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘,接著在-20℃的條件下30分鐘,-80℃的條件下保存16-18個小時(或隔夜保存也可以),**后再液氮的環(huán)境中進...
細胞凍存篇凍存原則細胞凍存原則為“慢凍”,即讓細胞在緩慢降溫的條件下逐漸冷凍。如果直接將細胞懸液放在**溫下快速冷凍,細胞會受到冷凍損傷而死亡。在凍存液中添加的保護劑(如DMSO、甘油)和在凍存盒中添加的異丙醇,都起到程序性降溫的作用。DMSO使用注意事項DMSO能夠快速穿透細胞膜進入細胞中,延緩溫度下降速度,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而起到保護細胞的作用。需注意的是,DMSO溶于培養(yǎng)基時,將釋放大量熱量,所以細胞凍存液需提前配制,不能直接將DMSO加入含有細胞的培養(yǎng)基中,避免燙傷細胞。另外,DMSO屬于致*物質(zhì),使用時應戴好手套,規(guī)范操作。程序凍存液配方程序凍存液成分一般由基礎培養(yǎng)基、...
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃...
在不附加任何保護劑下直接凍存細胞時,細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護劑,可使冰點降低。在緩慢的凍結條件下,能使細胞內(nèi)水份在凍結前透出細胞。貯存在﹣130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。細胞凍存時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,待復蘇時重新進入生長分裂周期。實驗開始前,將凍存管、15毫升離心管、移液管、移液槍、***頭等放入無菌超凈工作臺,以紫外線照射30分鐘。采用通風機通風3分鐘。以75%酒精擦拭操作臺和雙手。準備好冰盒。將離心機調(diào)節(jié)至800轉(zhuǎn),5分鐘。水浴箱調(diào)節(jié)至37...
在細胞培養(yǎng)中,細胞凍存是**關鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細胞***、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求,下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分,細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。程序降溫凍存技術要點是慢凍,標準的凍存程序為降溫速率-1~-2/℃min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min。之前,常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。不過,由于步驟較多,間隔時間又長,很容易遺忘。之后,人們也開始使用程序...
在細胞培養(yǎng)中,細胞凍存是**關鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細胞***、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求,下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分,細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。程序降溫凍存技術要點是慢凍,標準的凍存程序為降溫速率-1~-2/℃min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min。之前,常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。不過,由于步驟較多,間隔時間又長,很容易遺忘。之后,人們也開始使用程序...
適用于凍存各種細胞系、原代細胞3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單4.不含血清,**減少細胞污染5.因不含血清,批次間差異小6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程溫馨提示:1.化學組成明確,以DMEM為母液,含有DMSO,不含牛血清或其他蛋白成分。2.獨特的細胞保護配方,在凍存過程中細胞可直接放入-70℃冰箱,無需繁瑣的程序降溫操作。3.不含牛血清或其他蛋白成分,不引入造成細胞種子污染的外源因子,如各種牛源病毒和支原體等。4.不含牛血清或其他蛋白成分,同樣適用于無血清培養(yǎng)的細胞凍存。5.不含牛血清或其他蛋白成分,非常適合...
白蛋白等從而更好地保護細胞。有人親測10%血清凍存細胞,結果證明是可以的,但高血清比例的凍存液更有助于提高細胞活力,此外嬌貴的細胞可以適當提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。細胞凍存和復蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。常用的凍存保護劑為二甲基亞砜(DMSO)和甘油,凍存細胞時加入保護劑,一方面可以提高細胞膜對水的通透性,另一方面使冰點降低,延緩凍結過程。緩慢凍存細胞的過程中,加入保護劑可以使細胞內(nèi)水分滲出到細胞外...
用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;離心,1000rpm,5min;棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。注意事項:取錯細胞:拿錯凍存管。(快快快,匆忙之中,難免出錯,況且-170多度,凍手?。┙鉀Q:(1)核查記錄冊及凍存管上細胞的名稱、時間是否一致。(2)拿細胞時戴手套!2.水浴時間太長:2min還沒融化。(凍存管的壁較厚,隔熱)解決:(1)適當提高水浴溫度(37度-40度)。(2)要是冬天,就選用保溫盒。3.冰盒內(nèi)時間太長:復蘇1h后,還沒有加入新的培養(yǎng)液。(高濃度...
但是顯然已經(jīng)不能適應現(xiàn)今細胞***的應用場景。隨著細胞***以及細胞儲存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,細胞凍存也面臨從科研應用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。凍存要求發(fā)生改變,因為凍存細胞要進行臨床應用,所以凍存液成分由原來血清變?yōu)闊o血清,無動物源成分,凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。隨著細胞凍存數(shù)量增加,凍存流程簡化也成為必然趨勢,因此無血清非程序降溫凍存液應運而生。目前針對細胞***領域,AppliedCell推出一款即用型的無血清細胞凍存液,這款產(chǎn)品是細胞凍存研究的革新,主要具有幾大特點,凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓...
在細胞培養(yǎng)中,細胞凍存是**關鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細胞***、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求,下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分,細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。程序降溫凍存技術要點是慢凍,標準的凍存程序為降溫速率-1~-2/℃min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min。之前,常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。不過,由于步驟較多,間隔時間又長,很容易遺忘。之后,人們也開始使用程序...
不同細胞系請參照附表。細胞系凍存密度備注正常人成纖維細胞1-3x106cells/mL雜交瘤細胞1-3x106cells/mL某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。貼壁腫瘤細胞5-7x106cells/mLHela除外,1~3×106cells/ml即可其他懸浮細胞5-10x106cells/mL人淋巴細胞高密度凍存效果好干細胞類1-2x107cells/mL支持高密度凍存MSC細胞,為常規(guī)血清凍存液的10倍。2、細胞凍存過程a)將要凍存的細胞懸液,進行細胞計數(shù),計數(shù)后離心,800轉(zhuǎn),3min即可。b)棄去上清,將4度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中...
隔夜取出凍存管直接放液氮凍存?;蛑苯硬捎贸绦蛐越禍睾懈鼮榉奖恪W髡撸悍?*研究僧鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權,非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。1、細胞活力及濃度細胞應在生長良好、致密度約為80-90%、數(shù)目一般為106-107/ml,活力達90%以上的狀態(tài)下凍存。細胞活力差的細胞在凍存后的成活率很小,因此,一定要在細胞旺盛分裂時期凍存。2、注意冷凍保護劑之品質(zhì)DMSO應為試劑級等級,無菌且無色,可以用微米濾膜過濾,或者直接購買無菌產(chǎn)品。以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。使用DMSO前,不需要進行高壓滅菌,它本身就有滅菌的...
其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),后來才移至液氮罐中進行長期的儲存。(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量的死亡。)可見,含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力3.含血清,細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)...
不含血清及動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全成分明確,批次間差異小既適用于一般細胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細胞的凍存無需程序降溫,可直接放置-80℃冰箱長期凍存,操作簡單可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細胞的凍存,省時高效。細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法,其中細胞凍存液,作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,不僅更是說只是用來進行細胞的保存,在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用,因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細胞,細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、...
重復2~3次,以去除細胞懸液中的細胞碎片;e.加少許pbs液,將沉淀細胞輕輕吹打均勻;加固定液或低溫保存待用。3)根據(jù)細胞懸液的體積,按一定比例以穩(wěn)定速率加入細胞凍存液并充分混勻;4)凍存:將步驟3)中充分混勻的細胞溶液分裝至凍存管中,并轉(zhuǎn)移至液氮中,進行程序性降溫至-80℃并轉(zhuǎn)至液氮中儲存;5)細胞復蘇:從液氮系統(tǒng)中取出裝有凍存細胞樣品,等待1~2min使殘余液氮揮發(fā)之后,迅速放入37℃水浴中,待可見冰塊剛好要消失至黃豆大小體積時,取出細胞樣品待用。6)計算細胞存活率推薦地,步驟3)中細胞懸液體積與細胞凍存液體積的比例為2~8:1,**推薦地,細胞懸液體積與細胞凍存液的體積的比例為4...
適用于凍存各種細胞系、原代細胞3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單4.不含血清,**減少細胞污染5.因不含血清,批次間差異小6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程溫馨提示:1.化學組成明確,以DMEM為母液,含有DMSO,不含牛血清或其他蛋白成分。2.獨特的細胞保護配方,在凍存過程中細胞可直接放入-70℃冰箱,無需繁瑣的程序降溫操作。3.不含牛血清或其他蛋白成分,不引入造成細胞種子污染的外源因子,如各種牛源病毒和支原體等。4.不含牛血清或其他蛋白成分,同樣適用于無血清培養(yǎng)的細胞凍存。5.不含牛血清或其他蛋白成分,非常適合...
正確凍存細胞并從液氮中復蘇是細胞培養(yǎng)中**重要的的技術方法之一。防止細胞內(nèi)形成冰晶并**大程度降低細胞壓力,是凍存過程保持細胞活力的關鍵。我們可提供各種各樣的無菌過濾、經(jīng)應用測試的冷凍保護劑,如DMSO和含/不含DMSO的即用型細胞凍存培養(yǎng)基,可**大程度確保凍存和解凍過程中的細胞活力。即用型細胞凍存培養(yǎng)基便捷的細胞凍存培養(yǎng)基試劑無需滴定DMSO濃度,且可提供不含DMSO的制劑版本。CryoStor?細胞凍存培養(yǎng)基提供2%、5%和10%濃度選擇,以及不含DMSO的制劑版本CryoSOFree?。pZerve?是一種同時適合含血清培養(yǎng),或不含二甲基亞砜(DMSO)、胎牛血清或其他動物來源...
白蛋白等從而更好地保護細胞。有人親測10%血清凍存細胞,結果證明是可以的,但高血清比例的凍存液更有助于提高細胞活力,此外嬌貴的細胞可以適當提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。細胞凍存和復蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。常用的凍存保護劑為二甲基亞砜(DMSO)和甘油,凍存細胞時加入保護劑,一方面可以提高細胞膜對水的通透性,另一方面使冰點降低,延緩凍結過程。緩慢凍存細胞的過程中,加入保護劑可以使細胞內(nèi)水分滲出到細胞外...
無蛋白(2)方便:即取即用,無需配制(3)簡潔:無需程序降溫,一步實現(xiàn)細胞凍存。(4)高效:可一步實現(xiàn)細胞凍存,細胞復活率高,活力強。二、組織凍存試劑1.組織保存液產(chǎn)品概述:用于保存、運輸和細胞樣品。所有成分對細胞組織497c364a-6562-42a8-8dcc-ca害作用,不影響保存細胞或組織的生理功能。產(chǎn)品特點:(1)保存時間長:組織和細胞在低溫條件(2-8℃)下可保持形態(tài)結構和功能活性至少72小時,保存和運輸?shù)慕M織細胞可用于單細胞測序。(2)操作簡單:組織或細胞樣品浸沒到溶液中即可。(3)成分明確:無血清,無蛋白,安全性高。(4)使用方便:即用即取,無需配制(5)質(zhì)量穩(wěn)定可靠,...
適用于凍存各種細胞系、原代細胞3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單4.不含血清,**減少細胞污染5.因不含血清,批次間差異小6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程溫馨提示:1.化學組成明確,以DMEM為母液,含有DMSO,不含牛血清或其他蛋白成分。2.獨特的細胞保護配方,在凍存過程中細胞可直接放入-70℃冰箱,無需繁瑣的程序降溫操作。3.不含牛血清或其他蛋白成分,不引入造成細胞種子污染的外源因子,如各種牛源病毒和支原體等。4.不含牛血清或其他蛋白成分,同樣適用于無血清培養(yǎng)的細胞凍存。5.不含牛血清或其他蛋白成分,非常適合...
重復2~3次,以去除細胞懸液中的細胞碎片;e.加少許pbs液,將沉淀細胞輕輕吹打均勻;加固定液或低溫保存待用。3)根據(jù)細胞懸液的體積,按一定比例以穩(wěn)定速率加入細胞凍存液并充分混勻;4)凍存:將步驟3)中充分混勻的細胞溶液分裝至凍存管中,并轉(zhuǎn)移至液氮中,進行程序性降溫至-80℃并轉(zhuǎn)至液氮中儲存;5)細胞復蘇:從液氮系統(tǒng)中取出裝有凍存細胞樣品,等待1~2min使殘余液氮揮發(fā)之后,迅速放入37℃水浴中,待可見冰塊剛好要消失至黃豆大小體積時,取出細胞樣品待用。6)計算細胞存活率推薦地,步驟3)中細胞懸液體積與細胞凍存液體積的比例為2~8:1,**推薦地,細胞懸液體積與細胞凍存液的體積的比例為4...
并上下振蕩數(shù)次混勻。備注:為了盡量減少污染,未使用完的細胞凍存液**好凍回-20℃,反復凍融不影響使用效果。2.用細胞消化液將生長良好的細胞消化成單細胞,并用細胞計數(shù)器或血球計數(shù)板計數(shù)細胞濃度。備注:懸浮細胞不需要消化但仍需要細胞計數(shù),不易消化成單細胞的各種293細胞等**好使用含有EDTA的胰酶進行消化。3.用低速離心沉淀細胞,棄去上清。備注:通常2000~3000rpm離心5~10min即可。4.用適量細胞凍存液重懸細胞。備注:細胞濃度可根據(jù)情況調(diào)整為1~5×106/ml,通常為3×106/ml左右。5.按每管1ml分裝到細胞凍存管中。6.直接放入-70℃冰箱中凍存。備注:無需程序...
產(chǎn)品描述無血清細胞凍存液【無血清細胞凍存液用途與描述】1、無血清細胞凍存液用于免疫細胞及干細胞的存儲。2、細胞保藏中心,無血清細胞凍存液用于細胞株的長期保存。3、科研高校,無血清細胞凍存液用于細胞株凍存。4、無血清細胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細胞樣本保存。支持高密度凍存MSC細胞(1-2x107cells/mL),為常規(guī)血清凍存液的10倍。無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分,一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結合細胞外的水分子,降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進入細胞的數(shù)量。我公司無血清細胞凍存液,為...
并上下振蕩數(shù)次混勻。備注:為了盡量減少污染,未使用完的細胞凍存液**好凍回-20℃,反復凍融不影響使用效果。2.用細胞消化液將生長良好的細胞消化成單細胞,并用細胞計數(shù)器或血球計數(shù)板計數(shù)細胞濃度。備注:懸浮細胞不需要消化但仍需要細胞計數(shù),不易消化成單細胞的各種293細胞等**好使用含有EDTA的胰酶進行消化。3.用低速離心沉淀細胞,棄去上清。備注:通常2000~3000rpm離心5~10min即可。4.用適量細胞凍存液重懸細胞。備注:細胞濃度可根據(jù)情況調(diào)整為1~5×106/ml,通常為3×106/ml左右。5.按每管1ml分裝到細胞凍存管中。6.直接放入-70℃冰箱中凍存。備注:無需程序...
但是顯然已經(jīng)不能適應現(xiàn)今細胞***的應用場景。隨著細胞***以及細胞儲存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,細胞凍存也面臨從科研應用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。凍存要求發(fā)生改變,因為凍存細胞要進行臨床應用,所以凍存液成分由原來血清變?yōu)闊o血清,無動物源成分,凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。隨著細胞凍存數(shù)量增加,凍存流程簡化也成為必然趨勢,因此無血清非程序降溫凍存液應運而生。目前針對細胞***領域,AppliedCell推出一款即用型的無血清細胞凍存液,這款產(chǎn)品是細胞凍存研究的革新,主要具有幾大特點,凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓...
本發(fā)明涉及生物醫(yī)學技術領域:,尤其涉及一種細胞凍存液,具體涉及一種用于干細胞的凍存液。背景技術::臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液,通常是廢棄不用的。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建人體造血和免疫系統(tǒng)的造血干細胞,可用于造血干細胞移植,***80多種疾病。因此,臍帶血已成為造血干細胞的重要來源,特別是無血緣關系造血干細胞的來源。也是一種非常重要的人類生物資源。干細胞***是將具有不斷自我繁殖能力和多向化潛能的干細胞在體外培養(yǎng)后,再將其移植入患者受損或缺損組織中,從而實現(xiàn)對損傷組織的補充和修復。目前干細胞采集后,需要加入保存液進行冷凍保存,細胞凍存液是細...
不同細胞系請參照附表。細胞系凍存密度備注正常人成纖維細胞1-3x106cells/mL雜交瘤細胞1-3x106cells/mL某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。貼壁腫瘤細胞5-7x106cells/mLHela除外,1~3×106cells/ml即可其他懸浮細胞5-10x106cells/mL人淋巴細胞高密度凍存效果好干細胞類1-2x107cells/mL支持高密度凍存MSC細胞,為常規(guī)血清凍存液的10倍。2、細胞凍存過程a)將要凍存的細胞懸液,進行細胞計數(shù),計數(shù)后離心,800轉(zhuǎn),3min即可。b)棄去上清,將4度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中...