隔夜取出凍存管直接放液氮凍存。或直接采用程序性降溫盒更為方便。作者：非**研究僧鏈接：zhuanlan./p/來(lái)源：知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。1、細(xì)胞活力及濃度細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好、致密度約為80-90％、數(shù)目...

每孔加入100μl養(yǎng)24h后，Luciferin使其終濃度為150μg/ml，PBS，再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測(cè)，分析發(fā)光強(qiáng)度與細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性。4)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線繪制MCF7-luc細(xì)胞和作為對(duì)照取表達(dá)熒光素酶的MCF-7細(xì)胞，接種于24孔板，...

熒光素鈉[1]，橙紅色粉末，無(wú)氣味，有吸濕性；易溶于水，溶液呈黃紅色，并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光，酸化后消失，中和或堿化后又出現(xiàn)，微溶于乙醇；比較大吸收波長(zhǎng)(水)?；拘畔⑺幤访Q熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIU...

就可以用高敏感度的CCD相機(jī)對(duì)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行***觀察而不會(huì)傷害到動(dòng)物本身。在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出熒光，而發(fā)出的光子可以被光敏感元件，如螢光探測(cè)器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測(cè)到。這就使得對(duì)包括***在內(nèi)的多種生命活動(dòng)進(jìn)程進(jìn)行觀察成為可能。...

總RNA（含microRNA)提取試劑盒:各種類(lèi)型RNA提取不再愁發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時(shí)間：2018-06-26分享按鈕RNA是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈，主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá)，是遺傳信息向表型...

總RNA（含microRNA)提取試劑盒:各種類(lèi)型RNA提取不再愁發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時(shí)間：2018-06-26分享按鈕RNA是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈，主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá)，是遺傳信息向表型...

總RNA抽提試劑盒系裂總RNA小量提取試劑盒：從5×106真核細(xì)胞或30mg組織中提取100ug總RNAR6834-00TotalRNAKitI（5）135R6834-01TotalRNAKitI（50）900R6834-02TotalRNAKitI（...

200）SP真的菌群DNA中量提取試劑盒：從真的菌群組織或細(xì)胞中提取基因組DNAD5545-00SpFungalDNAMidiKit（2）D5545-01SpFungalDNAMidiKit（10）D5545-02SpFungalDNAMidiKit（...

操作過(guò)程要小心，帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在，但這并不表示RNA不純，需電泳檢測(cè)。使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買(mǎi)特定使用提取試劑盒，如果不是特定使用試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質(zhì)量以及完整性，會(huì)影響...

操作過(guò)程要小心，帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在，但這并不表示RNA不純，需電泳檢測(cè)。使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買(mǎi)特定使用提取試劑盒，如果不是特定使用試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質(zhì)量以及完整性，會(huì)影響...

2014):."Broad-spectrumtherapeuticsuppressionofmetastaticmelanomathroughnuclearhormonereceptoractivation."Cell5(2014):."Pyrimid

[5]功能編輯播報(bào)mRNAmRNA含A、U、G、C四種核苷酸，每三個(gè)相聯(lián)而成一個(gè)三聯(lián)體，即密碼，**一個(gè)氨基酸的信息，故按數(shù)學(xué)中排列組合法則計(jì)算，可形成43=64個(gè)不同的密碼。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，推得64個(gè)密碼與氨基酸的對(duì)應(yīng)關(guān)系如下表。[6]mRNA密碼...

可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時(shí)的“輝光型”信號(hào)在大量檢測(cè)板之間提供一致的信號(hào)與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑（Renillareniformis）分離的36kDa蛋白。與螢火蟲(chóng)熒光素酶相比，海腎...

去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);4.離心1000rpm，5min;5.去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的**終密度為5×1...

產(chǎn)品描述無(wú)血清細(xì)胞凍存液【無(wú)血清細(xì)胞凍存液用途與描述】1、無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。2、細(xì)胞保藏中心，無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存。3、科研高校，無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株凍存。4、無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫(kù)細(xì)胞樣本保存。...

如果想要達(dá)到這樣的目的，那么就需要細(xì)胞冷卻液，這種東西怎樣配置呢?下面就來(lái)具體的了解一下，細(xì)胞凍存液的配方是什么？(一)細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。3.去...

本發(fā)明的目的在于提供一種細(xì)胞凍存液，使凍存培養(yǎng)后的細(xì)胞具有成活率高的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)滿足凍存液成分簡(jiǎn)單、成本低等要求。本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)上述目的。***方面，本發(fā)明提供了一種細(xì)胞凍存液，所述細(xì)胞凍存液的成分如下：將上述組分加入到工業(yè)用水中，用于...

在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凍存是**關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞***、細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對(duì)細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降...

因此只有在活細(xì)胞內(nèi)才會(huì)產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象，并且發(fā)光光強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目線性相關(guān)。結(jié)構(gòu)與性能熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，并產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的，...

重復(fù)2～3次，以去除細(xì)胞懸液中的細(xì)胞碎片；e.加少許pbs液，將沉淀細(xì)胞輕輕吹打均勻；加固定液或低溫保存待用。3)根據(jù)細(xì)胞懸液的體積，按一定比例以穩(wěn)定速率加入細(xì)胞凍存液并充分混勻；4)凍存：將步驟3)中充分混勻的細(xì)胞溶液分裝至凍存管中，并轉(zhuǎn)移至液氮中，...

按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號(hào)達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，從而確定更高信號(hào)檢測(cè)...

非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。注意事項(xiàng)：錯(cuò)誤的時(shí)機(jī)：細(xì)胞狀態(tài)不好（長(zhǎng)的太過(guò)了，培養(yǎng)液已經(jīng)很黃；細(xì)胞可疑污染；細(xì)胞已經(jīng)開(kāi)始凋亡或崩解；連續(xù)培養(yǎng)超過(guò)二個(gè)月，細(xì)胞性狀已有改變改變）。解決：**佳時(shí)機(jī)：細(xì)胞增殖旺盛，情況穩(wěn)定，試驗(yàn)效果良好，復(fù)蘇后兩周內(nèi)。2.細(xì)胞太少：...

不同細(xì)胞系請(qǐng)參照附表。細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1-3x106cells/mL雜交瘤細(xì)胞1-3x106cells/mL某些hybridoma會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24小時(shí)后死去。貼壁腫瘤細(xì)胞5-7x106cells/mLHela除外,1～3×...

GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSa...

這一過(guò)程需要在15min之內(nèi)完成，同時(shí)需要不斷進(jìn)行混合，使得細(xì)胞凍存液能夠在細(xì)胞懸液中均勻分布。隨后，將充分混勻的細(xì)胞溶液分裝至，進(jìn)行程序性降溫至-80℃后轉(zhuǎn)至液氮中儲(chǔ)存。從液氮系統(tǒng)中取出凍存的充質(zhì)干細(xì)胞樣品，等待1～2min使殘余液氮揮發(fā)之后，迅速放...

包括熒光素酶和ATP水平分析；報(bào)告基因分析；高通量測(cè)序和各種污染檢測(cè)。目前有三種產(chǎn)品形式：D-熒光素（游離酸），D-熒光素鹽（鈉鹽和鉀鹽）。主要差別在于溶解特性：前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱，除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液?？扇苡诩?..

luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：，在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示，并產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象。但是該底物熒光素以前大多依賴進(jìn)口，產(chǎn)品價(jià)格昂貴。而且由于該產(chǎn)品容易降解、受潮影...

并上下振蕩數(shù)次混勻。備注：為了盡量減少污染，未使用完的細(xì)胞凍存液**好凍回-20℃，反復(fù)凍融不影響使用效果。2.用細(xì)胞消化液將生長(zhǎng)良好的細(xì)胞消化成單細(xì)胞，并用細(xì)胞計(jì)數(shù)器或血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度。備注：懸浮細(xì)胞不需要消化但仍需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，不易消化成單細(xì)胞...

并實(shí)現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報(bào)告基因檢測(cè)。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測(cè)方法。ATP是細(xì)胞健康的重要指標(biāo)，這使得CellTiter-Glo?能有效測(cè)定細(xì)胞活力，尤其是在高通量應(yīng)用中。該檢測(cè)原理還...

進(jìn)行瓶口消毒，棄去細(xì)胞原來(lái)的培養(yǎng)基。按每25cm2/ml胰酶/EDTA消化液比例加入消化液，放入顯微鏡下觀察，待所有細(xì)胞變圓后立即拿入超凈臺(tái)內(nèi)，加入2ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基以立即終止消化。采用無(wú)菌***頭輕輕吹打細(xì)胞表面，注意吹打全部培養(yǎng)表面，可以按照先左...