做免疫組化時(shí)如何選擇一抗？ 1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合，就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面，即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，...

免疫組化的特點(diǎn)： 1）特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會出現(xiàn)交叉...

免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些？ （1）抗體濃度過高：一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一。解決辦法是，每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對其工作濃度進(jìn)行測試，使每一抗體個(gè)體化，找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度，既使是即用型的抗體也應(yīng)如此，不能只簡單的按說明書進(jìn)行...

免疫組化在在病理診斷中，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn)，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性，因此，深入研究免疫組化原理和技術(shù)，并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作，才能充...

病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應(yīng)該就是“做個(gè)免疫組化吧”；不管是臨床醫(yī)師，還是患者，他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化？”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進(jìn)行細(xì)胞的識別。這一做法的依據(jù)是特定細(xì)胞和組織中的成分不同、則化學(xué)性質(zhì)不同，通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同...

免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標(biāo)記物必須具有的，但至今所發(fā)現(xiàn)的cancer標(biāo)記物還沒有能完全滿足這些標(biāo)準(zhǔn)。某些正常細(xì)胞也分泌一些cancer標(biāo)記物，因此cancer細(xì)胞學(xué)并不是單獨(dú)產(chǎn)生一種標(biāo)記物，即選用一組抗體比單一抗體更有...

免疫組化原理及實(shí)驗(yàn)步驟——實(shí)驗(yàn)外包。眾所周知，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，制備特異性抗體，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體，...

免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學(xué)來源，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化，要么通過固定過程，要么是單獨(dú)的透化步驟，這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟，這取決于切片的厚度和...

免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹： 英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟： 1、SP三步法 1）石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。 2）0.3%或3%H2O2去離子水（無色液體）孵育10-30分鐘，以滅活內(nèi)源性過氧化物酶活性。 3）蒸餾水沖洗，P...

關(guān)于免疫組化的封閉：用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min，然后甩去封閉用血清，勿洗；注意：封閉時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整；封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清，切記是BSA，不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了。①使用血清好還是...

免疫組化的顯色系統(tǒng) 免疫組化的顯色系統(tǒng)是將抗原-抗體反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可見信號的關(guān)鍵步驟。常用的免疫組化顯色系統(tǒng)有DAB（3,3'-二氨基聯(lián)苯胺）和AEC（3-氨基-9-乙基咔唑）。DAB顯色產(chǎn)生棕色沉淀，適用于光學(xué)顯微鏡觀察。AEC顯色產(chǎn)生紅色沉淀，適用于...

免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù)，抗原修復(fù)的條件是什么？ （1）由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中，發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用，從而失去抗原性。通過抗原修復(fù)，使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露，提高抗原檢測率。 （2）修復(fù)方法...

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些？ 1、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯(cuò)誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果，抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng)，必須摸索比較好濃度。 2、抗原修復(fù)不全，對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位，以利...

免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用？ 定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢。相比于其他蛋白檢測方法，免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高，是定位檢測分析優(yōu)先方法，尤其對于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定...

免疫組化在在病理診斷中，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn)，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性，因此，深入研究免疫組化原理和技術(shù)，并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作，才能充...

肺間質(zhì)纖維化主要特點(diǎn)之一就是肺問質(zhì)膠原沉積，MMPs及其抑制因子在這一過程中發(fā)揮重要作用。肺泡上皮基底膜是一種特殊的ECM形式，Ⅳ型膠原是其重要組成成分。而MMP一2和MMP一9作用底物主要是Ⅳ型膠原，它們在肺纖維化發(fā)病中的作用日益受到重視。Selman等∞研...

免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法，英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來的技術(shù)。基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)...

免疫組化的質(zhì)量控制免疫組化的質(zhì)量控制是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性和重復(fù)性的關(guān)鍵步驟。質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前的抗體驗(yàn)證、實(shí)驗(yàn)中的陽性對照和陰性對照，以及實(shí)驗(yàn)后的結(jié)果評估?？贵w驗(yàn)證是通過Western blot或免疫熒光等方法驗(yàn)證抗體的特異性和靈敏度。陽性對照是使用已知表達(dá)目...

確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位，臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作。對于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤，用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來源，進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽性，而在肺canc...

免疫組化在臨床應(yīng)用中，還能及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶。英瀚斯生物專業(yè)做實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，一站式醫(yī)學(xué)科研平臺。采用常規(guī)病理方法難以檢出的實(shí)體瘤轉(zhuǎn)移稱為微小轉(zhuǎn)移灶。在常規(guī)組織切片中，辨別單個(gè)或幾個(gè)轉(zhuǎn)移性cancer細(xì)胞很難，淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生與某些cancer的早...

免疫組化臨床應(yīng)用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。如分化差的ca...

免疫組化的特點(diǎn)： 1）特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會出現(xiàn)交叉...

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后，從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清，是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的...

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些？ 1、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯(cuò)誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果，抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng)，必須摸索比較好濃度。 2、抗原修復(fù)不全，對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位，以利...

免疫組化的結(jié)果分析： 免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽性對照、陰性對照（或替代對照）（陽性對照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無問題；陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色）。一般情況下，陽性對照顏色的特點(diǎn)為：Ag定位，包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強(qiáng)...

免疫組化臨床應(yīng)用中，可以對傳染性疾病診斷。應(yīng)用抗病毒、細(xì)菌、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進(jìn)行免疫組化染色，可以檢測和診斷許多傳染性疾病病原微生物，如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(...

免疫組化的顯色系統(tǒng) 免疫組化的顯色系統(tǒng)是將抗原-抗體反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可見信號的關(guān)鍵步驟。常用的免疫組化顯色系統(tǒng)有DAB（3,3'-二氨基聯(lián)苯胺）和AEC（3-氨基-9-乙基咔唑）。DAB顯色產(chǎn)生棕色沉淀，適用于光學(xué)顯微鏡觀察。AEC顯色產(chǎn)生紅色沉淀，適用于...

免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標(biāo)記物必須具有的，但至今所發(fā)現(xiàn)的cancer標(biāo)記物還沒有能完全滿足這些標(biāo)準(zhǔn)。某些正常細(xì)胞也分泌一些cancer標(biāo)記物，因此cancer細(xì)胞學(xué)并不是單獨(dú)產(chǎn)生一種標(biāo)記物，即選用一組抗體比單一抗體更有...

免疫組化的特點(diǎn)： 1）特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會出現(xiàn)交叉...

免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹： 英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟： 1、SP三步法 1）石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。 2）0.3%或3%H2O2去離子水（無色液體）孵育10-30分鐘，以滅活內(nèi)源性過氧化物酶活性。 3）蒸餾水沖洗，P...