冷凍電鏡技術(shù)究竟是什么呢？一直以來(lái)，科學(xué)家們不斷進(jìn)行基礎(chǔ)生命科學(xué)的探究，探究細(xì)胞內(nèi)的生命規(guī)律，為人類健康及其他學(xué)科提供借鑒。而分子是生命體中行使功能的較小單元，生命科學(xué)研究也逐步發(fā)展到了微觀生物分子的結(jié)構(gòu)與功能研究階段，以期逐步加深對(duì)生命過(guò)程的認(rèn)知。充分的基礎(chǔ)...

冷凍電鏡技術(shù)之冷凍掃描電鏡：掃描電鏡工作者都面臨著一個(gè)不能回避的事實(shí)，就是所有生命科學(xué)以及許多材料科學(xué)的樣品都含有液體成分。很多動(dòng)植物組織的含水量達(dá)到98%，這是掃描電鏡工作者比較難對(duì)付的樣品問(wèn)題。冷凍掃描電鏡(Cryo-SEM)技術(shù)是克服樣品含水問(wèn)題的一個(gè)快...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)具有研究對(duì)象普遍、樣品需求量少、更接近生理狀態(tài)等獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，隨著電子顯微鏡的硬件設(shè)備和結(jié)構(gòu)解析的軟件算法等方面不斷取得的重要突破，冷凍電鏡技術(shù)必將在研究對(duì)象、分辨率水平和研究方法等各個(gè)方面取得重大進(jìn)展。當(dāng)然，冷凍電鏡技術(shù)也面臨著許多技術(shù)上的挑戰(zhàn)...

冷凍電鏡技術(shù)揭示生物分子細(xì)節(jié)：科學(xué)家在透射電子顯微鏡之上發(fā)明了冷凍電鏡，實(shí)現(xiàn)了生物分子“近原子級(jí)”的分辨率，讓人類終于可以一窺究竟生物分子是如何執(zhí)行其功能。在過(guò)去幾年里，冷凍電子顯微鏡技術(shù)逐漸成為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的重要研究工具。冷凍電鏡技術(shù)的基本原理是將生物大分子溶...

為了避免血液凝固，通常會(huì)在容器中加入抗凝劑，如肝素或乙二酰胺。采集到的血液需要經(jīng)過(guò)一系列的處理步驟來(lái)制備胎牛血清。首先，將血液進(jìn)行離心，以分離血漿和紅細(xì)胞。離心的速度和時(shí)間需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整，以確保血漿中的細(xì)胞和細(xì)胞碎片被完全去除。接下來(lái)，將血漿進(jìn)行過(guò)濾...

胎牛血清的純度可以通過(guò)生物學(xué)活性測(cè)定來(lái)確定。胎牛血清中的主要活性成分是胎牛血清中的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子等物質(zhì)。通過(guò)測(cè)定這些活性成分的活性水平，可以判斷胎牛血清的純度。生物學(xué)活性測(cè)定具有直觀、快速的優(yōu)點(diǎn)，可以在較短的時(shí)間內(nèi)得到結(jié)果。然而，生物學(xué)活性測(cè)定受到許多因素...

胎牛血清（FetalBovineSerum，F(xiàn)BS）是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基中的重要成分。然而，近年來(lái)有關(guān)胎牛血清是否會(huì)引起免疫反應(yīng)的討論日益增多。這里將探討胎牛血清引起免疫反應(yīng)的可能性，并對(duì)相關(guān)研究進(jìn)行綜述。胎牛血清是從胎牛胎兒提取的血液，在細(xì)胞培養(yǎng)中被普遍應(yīng)...

胎牛血清：胎牛血清(FBS)，胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量...

胎牛血清是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑，普遍應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和生物制藥領(lǐng)域。胎牛血清的用量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著重要的影響。這里將探討胎牛血清用量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，并提出一些建議以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。胎牛血清是從胎牛胎兒的臍靜脈或心臟采集的血液經(jīng)離心、過(guò)濾和滅菌等處理得到的...

胎牛血清中的成分和含量可能因批次而異。胎牛血清中含有多種生物活性物質(zhì)，如生長(zhǎng)因子、激的素和細(xì)胞黏附蛋白等，這些物質(zhì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化起著重要作用。然而，由于胎牛血清的生產(chǎn)過(guò)程中的變異性，不同批次之間這些成分的含量可能存在差異。這可能導(dǎo)致在使用不同批次的胎牛血清...

胎牛血清（FetalBovineSerum，F(xiàn)BS）是一種普遍應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)和生物醫(yī)學(xué)研究中的重要生物制劑。它是從胎牛胎兒的血液中提取的，含有豐富的生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能夠提供細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所需的理想環(huán)境。下面將介紹胎牛血清的制備過(guò)程。首先，胎牛血清...

胎牛血清具有抗體和凝血因子等功能性成分。在細(xì)胞培養(yǎng)中，胎牛血清能夠提供一定的抵菌和抗病毒作用，保護(hù)細(xì)胞免受外界微生物的染上。同時(shí)，胎牛血清中的凝血因子能夠促進(jìn)細(xì)胞的附著和生長(zhǎng)，有助于細(xì)胞在培養(yǎng)基上形成單層或多層的細(xì)胞群。胎牛血清在細(xì)胞研究中的應(yīng)用非常普遍。細(xì)胞...

胎牛血清中的成分和含量可能因批次而異。胎牛血清中含有多種生物活性物質(zhì)，如生長(zhǎng)因子、激的素和細(xì)胞黏附蛋白等，這些物質(zhì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化起著重要作用。然而，由于胎牛血清的生產(chǎn)過(guò)程中的變異性，不同批次之間這些成分的含量可能存在差異。這可能導(dǎo)致在使用不同批次的胎牛血清...

胎牛血清在使用過(guò)程中可能對(duì)環(huán)境產(chǎn)生一定的影響。在生物醫(yī)學(xué)研究和生物制藥工業(yè)中，胎牛血清通常用作培養(yǎng)基的組成部分，用于細(xì)胞培養(yǎng)和病毒繁殖。然而，胎牛血清的使用可能會(huì)導(dǎo)致一些問(wèn)題。首先，胎牛血清的質(zhì)量和成分可能存在一定的差異，這可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生影響。...

將經(jīng)過(guò)病毒滅活處理的血漿進(jìn)行凍干或冷凍保存。凍干是將血漿在低溫下迅速冷凍，并通過(guò)真空脫水的方式將水分去除，得到干燥的血清粉末。冷凍保存則是將血漿在低溫下保存，通常在-20攝氏度或更低的溫度下。在使用胎牛血清之前，需要將其重新溶解并進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。質(zhì)量檢測(cè)通常包括...

冷凍電鏡技術(shù)原理之單顆粒技術(shù)：對(duì)分散分布的生物大分子分別成像，基于分子結(jié)構(gòu)同一性的假設(shè)，對(duì)多個(gè)圖像進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并通過(guò)對(duì)正、加和平均等圖像操作手段提高信噪比，進(jìn)一步確認(rèn)二維圖像之間的空間投影關(guān)系后經(jīng)過(guò)三維重構(gòu)獲得生物大分子的三維結(jié)構(gòu)方法。其適合的樣品分子量范圍...

冷凍電鏡技術(shù)原理之電子斷層掃描成像技術(shù)：通過(guò)在顯微鏡內(nèi)傾轉(zhuǎn)樣品從而收集樣品多角度的電子顯微圖像并對(duì)這些電子顯微圖像根據(jù)傾轉(zhuǎn)幾何關(guān)系進(jìn)行重構(gòu)的方法稱為電子斷層掃描成像技術(shù)。該方法主要應(yīng)用于細(xì)胞及亞細(xì)胞器，以及沒有固定結(jié)構(gòu)的生物大分子復(fù)合物(分子量范圍為800kD...

冷凍電鏡技術(shù)工作流程：做好前面的工作就需要設(shè)定較佳的參數(shù)（比如：欠焦值、放大倍數(shù)和電子劑量等），記錄這些樣品區(qū)域的大量圖像，用手工或半自動(dòng)程序框取那些離散的分子形成的投影圖。然后就是三維結(jié)構(gòu)搭建。由于電子可能對(duì)非常敏感的樣品造成輻射損傷，所以單顆粒冷凍電鏡只能...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類：二維顆粒圖像的分類是獲取三維結(jié)構(gòu)過(guò)程的第一步。對(duì)二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類。匹配的過(guò)程通常會(huì)對(duì)顆粒圖像應(yīng)用一些變換操作，通過(guò)關(guān)聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電子顯微技術(shù)學(xué)解析生物大分子及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的中心是透射電子顯微鏡成像,包括樣品制備、圖像采集、圖像處理及三維重構(gòu)等幾個(gè)基本步驟。三維重構(gòu)：數(shù)據(jù)處理的較終目的是為了獲得生物樣品的三維質(zhì)量密度圖，由二維圖像推知三維結(jié)構(gòu)的方法即三維重構(gòu)。其理論原理是在1968年由D...

冷凍電鏡技術(shù)助力快速、高效的新藥研發(fā)：分子生物學(xué)興起后，基于靶點(diǎn)的藥物發(fā)現(xiàn)逐漸成為主流新藥研發(fā)模式。通常通過(guò)結(jié)構(gòu)生物學(xué)方法獲得靶點(diǎn)及靶點(diǎn)-受體相互作用的結(jié)合位點(diǎn)。將靶點(diǎn)結(jié)構(gòu)和結(jié)合位點(diǎn)作為模型進(jìn)行虛擬篩選，并通過(guò)高通量的方法獲得可能結(jié)合的潛在分子，并進(jìn)一步通過(guò)結(jié)...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)步驟之圖像采集：冷凍的樣品通過(guò)專門的設(shè)備一冷凍輸送器轉(zhuǎn)移到電鏡的樣品室。在照相之前，必須觀察樣品中的水是否處于玻璃態(tài)，如果不是則應(yīng)重新制備樣品。由于生物樣品對(duì)高能電子的輻射敏感，照相時(shí)必須使用較小曝光技術(shù)。經(jīng)過(guò)透射電子顯微鏡中一系列復(fù)雜的過(guò)程...

冷凍電鏡技術(shù)究竟是什么呢？一直以來(lái)，科學(xué)家們不斷進(jìn)行基礎(chǔ)生命科學(xué)的探究，探究細(xì)胞內(nèi)的生命規(guī)律，為人類健康及其他學(xué)科提供借鑒。而分子是生命體中行使功能的較小單元，生命科學(xué)研究也逐步發(fā)展到了微觀生物分子的結(jié)構(gòu)與功能研究階段，以期逐步加深對(duì)生命過(guò)程的認(rèn)知。充分的基礎(chǔ)...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)：生物大分子快速冷凍后，在低溫下利用透射電子顯微鏡對(duì)結(jié)構(gòu)均一、分散的全同樣品顆粒進(jìn)行成像，再經(jīng)圖像處理及重構(gòu)計(jì)算獲得樣品的三維結(jié)構(gòu)。可研究生物大分子在溶液中的結(jié)構(gòu)及構(gòu)象變化、無(wú)需結(jié)晶、所需樣品量相對(duì)較少，適合于蛋白質(zhì)、病毒等生物大分子及其復(fù)合...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類：二維顆粒圖像的分類是獲取三維結(jié)構(gòu)過(guò)程的第一步。對(duì)二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類。匹配的過(guò)程通常會(huì)對(duì)顆粒圖像應(yīng)用一些變換操作，通過(guò)關(guān)聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電鏡技術(shù)未來(lái)之路在何方?除了蛋白等生物大分子外，生物樣品還有很重要的一面是細(xì)胞和組織。即使是目前有很多重要的蛋白結(jié)構(gòu)都得到了埃米級(jí)別的解析，但由于它們都是純化出來(lái)的，已經(jīng)脫離了原來(lái)位置，就如同一片樹葉脫離了大樹，研究的再深刻，目前也只是一葉遮目，不要說(shuō)推測(cè)...

冷凍電鏡技術(shù)，是用于掃描電鏡的很低溫冷凍制樣及傳輸技術(shù)(Cryo-SEM)，可實(shí)現(xiàn)直接觀察液體、半液體及對(duì)電子束敏感的樣品，如生物、高分子材料等。電鏡觀察：樣品經(jīng)過(guò)很低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣（噴金/噴碳）等處理后，通過(guò)冷凍傳輸系統(tǒng)放入電鏡內(nèi)的冷臺(tái)（溫度可至-1...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)中單顆粒重構(gòu)技術(shù)：該技術(shù)也叫做單顆粒分析，主要適用于結(jié)構(gòu)具有全同性的生物大分子的結(jié)構(gòu)解析，蛋白質(zhì)的分子量通常要求在100KD以上，在顆粒數(shù)目足夠多的情況下，理論上其分辨率可以達(dá)到原子水平。該方法的圖像處理和三維重構(gòu)計(jì)算過(guò)程如下:從原始的電鏡照...

冷凍電鏡技術(shù)中的電子斷層掃描技術(shù)與單顆粒分析法的比較：?jiǎn)晤w粒分析法：它的優(yōu)點(diǎn)：解析生物大分子的理論分辨率可達(dá)原子級(jí)；樣品受總輻射值小；對(duì)稱顆粒的解析分辨率更高；分子量越大，結(jié)果越好；電子斷層掃描技術(shù)：優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單直接；對(duì)樣品的要求較低；常用于對(duì)細(xì)胞或者生物組織結(jié)...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)：目前使用的幾種主要的結(jié)構(gòu)解析方法包括:電子晶體學(xué)單顆粒重構(gòu)技術(shù)和電子斷層掃描重構(gòu)技術(shù)等。電子晶體學(xué)：電子晶體學(xué)技術(shù)利用電子顯微鏡的成像和電子衍射的功能，從生物大分子的二維晶體獲取結(jié)構(gòu)信息，解析其三維結(jié)構(gòu)。生物大分子在空間中有序排列，可以形成...