用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：1、選擇血清還是血漿？推薦大多數(shù)研究選擇血漿。血液凝固過(guò)程中血小板會(huì)產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān)，這可能是因?yàn)楦嗡嘏c引物和/或酶有競(jìng)爭(zhēng)作用。除了克制PCR，肝素可以與外泌體結(jié)合，阻止細(xì)胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達(dá)莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體。EDTA可能會(huì)干擾PCR反應(yīng)（盡管其程度小于肝素），但是還是優(yōu)于其他選擇。此外，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進(jìn)外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA、或...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）。超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑；此外，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時(shí)，對(duì)離心時(shí)間極為敏感由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用...

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí)，外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。使用PBS對(duì)膜進(jìn)行洗脫即得到外泌體濃...

外泌體的形成與鑒定：首先，細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個(gè)杯狀結(jié)構(gòu)，包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白，導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes，LSEs)，較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體)。MVBs是通過(guò)endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的，這一過(guò)程導(dǎo)致MVBs含有多個(gè)ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚...

外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)...

外泌體的提取方法，先用含無(wú)外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長(zhǎng)狀態(tài)，不會(huì)被克制生長(zhǎng)增殖，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細(xì)胞及其碎片，用100kd超濾管對(duì)低速差速離心后的離心液進(jìn)行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液，將超濾液經(jīng)過(guò)第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾除菌，過(guò)濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì)，進(jìn)一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液，因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮，這樣過(guò)濾除菌效率得到較大提高，較后...

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切...

外泌體與免疫系統(tǒng)：不同的細(xì)胞來(lái)源的外泌體，包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞)、病細(xì)胞、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞，釋放出帶有載體的外泌體，可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響，刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾?。和饷隗w可以通過(guò)攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過(guò)程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān)；體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用。這些發(fā)現(xiàn)表明不同來(lái)源的外泌體可以通過(guò)傳遞miRNA，蛋白等物質(zhì)改變受體細(xì)胞的代謝...

外泌體(exosomes，Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細(xì)胞的信息通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換，并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性，可以穩(wěn)定存在于血液中，納米級(jí)尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒(méi)有較好的外泌體分離純化和載藥的方法，...

外泌體項(xiàng)目獲批學(xué)科方向：從統(tǒng)計(jì)來(lái)看，與前年相似外泌體立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué)，近年來(lái)外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成，耐藥性，檢測(cè)等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過(guò)TLR7/NFκB/c-My信號(hào)通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的...

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范、統(tǒng)一定量及鑒定等。關(guān)于外泌體的提取有超速離心、試劑盒、超濾法、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣，費(fèi)事費(fèi)力，而且步驟多導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中容易污染，且損耗量大，使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定。而且對(duì)于抽提細(xì)胞上清來(lái)說(shuō)，更是極為不請(qǐng)便，試想用提取300ml的上清需要6個(gè)50ml離心管，無(wú)論是過(guò)濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀，都具有操作極其不便的缺點(diǎn)，總之非常麻煩。而超濾法存在外泌體會(huì)堵塞膜孔，造成濃縮效率低，濃縮管重復(fù)利用差，甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會(huì)粘連成團(tuán)，造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差，對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)也有影響。外...

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切...

由歐洲多國(guó)細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域的學(xué)者發(fā)起并成立的國(guó)際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)（ISEV）于2014年在協(xié)會(huì)會(huì)刊JournalofExtracellularVesicles發(fā)表了一個(gè)指導(dǎo)性意見(jiàn)，也就是我們常說(shuō)的MISEV2014。2018版《指導(dǎo)要求》進(jìn)行了修訂。2018版的《指導(dǎo)要求》首先討論了對(duì)這些細(xì)胞來(lái)源的非細(xì)胞具膜結(jié)構(gòu)如何稱呼。學(xué)者們普遍認(rèn)為應(yīng)當(dāng)使用細(xì)胞外囊泡（extracellularvesicle）來(lái)稱呼這些具膜囊泡，當(dāng)我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時(shí)不推薦使用其他的名稱來(lái)稱呼它們。外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：樣本輸入量多樣。濟(jì)南正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其...

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑；此外，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量。2、密度梯度離心。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時(shí)。外泌體提取：磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形...

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：肺病細(xì)胞來(lái)源外泌體（LCC-exosome）可以通過(guò)刺激一些病癥血管的形成來(lái)促進(jìn)一些病癥的生長(zhǎng)。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進(jìn)一些病癥血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過(guò)啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來(lái)促進(jìn)肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小...

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來(lái)，高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究，這為我們揭示了更多具有生物標(biāo)志物價(jià)值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對(duì)照者血漿外泌體中的蛋白表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達(dá)不光能區(qū)分一些病癥與正常組織，同時(shí)也能區(qū)分各種肺病的組織亞型。此外，聯(lián)合應(yīng)用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達(dá)到0.74。Clark等采用納升液聯(lián)用技術(shù)（nano-ESI-LC-MS/MS）分析了來(lái)自正常支氣管上皮細(xì)胞系和兩個(gè)攜帶NSCLC細(xì)胞系的外泌體的蛋白表達(dá)譜，從中篩選出如細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘...

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時(shí)也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡(jiǎn)述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化，經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻，置于冰上。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過(guò)程，包括除雜、濾膜過(guò)濾、超離等。較后用PBS...

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物，多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測(cè)速度快，檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息。lWesternblot分子標(biāo)志物檢測(cè)：外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；細(xì)胞質(zhì)蛋白，如肌動(dòng)蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。廣州正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家外泌體與免疫系統(tǒng)：不同的細(xì)胞...

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）。超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑；此外，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時(shí)，對(duì)離心時(shí)間極為敏感外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：樣本輸入量多樣。無(wú)...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?，F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時(shí)，不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類，包括外泌體、微泡和凋亡小體。外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。天津外泌體提...

外泌體，是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn)，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而較近幾年，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸，能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體提取：通過(guò)色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，這可能會(huì)改變囊泡的結(jié)構(gòu)。成都外泌體提取試劑...

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過(guò)細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過(guò)程發(fā)揮關(guān)鍵作...

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切...

1983年，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng)，無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)...

外泌體（Exosome）是細(xì)胞主動(dòng)分泌的囊泡樣小體，大小均一，直徑30-200nm，密度1.10-1.18g/ml，來(lái)源普遍，幾乎所有細(xì)胞都可分泌，在血液，尿液，唾液，腦脊液，腹水，乳汁等體液中普遍分布。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中。1996年，研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細(xì)胞依賴的抗一些病癥反應(yīng)，開(kāi)啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)解答了細(xì)胞如何組織其內(nèi)部較重要的運(yùn)輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受?歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定，純度也受到質(zhì)疑。外泌體：形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...

1983年，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng)，無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)...

外泌體項(xiàng)目獲批學(xué)科方向：從統(tǒng)計(jì)來(lái)看，與前年相似外泌體立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué)，近年來(lái)外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成，耐藥性，檢測(cè)等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過(guò)TLR7/NFκB/c-My信號(hào)通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的...

作為一種分子通斷開(kāi)關(guān)的KRAS發(fā)生突變時(shí)會(huì)處于“開(kāi)啟”狀態(tài)。在80%～95%的胰腺導(dǎo)管腺?。≒DAC）當(dāng)中，這個(gè)基因發(fā)生突變，這也是這種一些疾病中較為常見(jiàn)的突變。這些研究人員證實(shí)iExosome能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子，并且比他們的合成對(duì)應(yīng)物脂質(zhì)體（liposome）更加高效。脂質(zhì)體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復(fù)雜性和優(yōu)勢(shì)。德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)助理教授ValerieLeBleu博士說(shuō)，“我們的研究提示著與脂質(zhì)體相比，外泌體表現(xiàn)出運(yùn)送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長(zhǎng)的優(yōu)異能力。我們也證實(shí)外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來(lái)自循環(huán)單核細(xì)胞...