細胞凍存秘籍:程序1.凍存前檢查凍存前,細胞應處于指數(shù)生長期,確保細胞處于健康狀態(tài)。理想情況下,應在收獲細胞前24小時更換培養(yǎng)基。建議對培養(yǎng)物進行微生物污染物,特別是支原體的檢測,并通過適當?shù)姆椒?,如STR分析確定其身份。如果在培養(yǎng)過程中使用物品,那么建議在冷...
無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明確,不含動物來源性蛋白,Chemicalbook不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細...
外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取...
無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明確,不含動物來源性蛋白,Chemicalbook不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細...
細胞凍存液常見問題:1.從繁衍期到產(chǎn)生高密度的單層細胞之前的塑造體細胞都能夠用以凍存,但較好是為多數(shù)成長期體細胞。在凍存前一日較好是換一次細胞培養(yǎng)液;2.將凍存管放進液氮容器或從這當中取下時,要搞好安全防護工作中,以防凍壞;3.凍存和再生較好用新配置的細胞培養(yǎng)...
細胞培養(yǎng)過程中,細胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細胞除外)才能完成生長過程,而有一些細胞卻總是不太給力,自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔起讓細胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層(coating),給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后...
酵母RNA的提取方法:濃鹽法。酵母菌外層是厚達1.2μm的細胞壁,其化學成分是葡聚糖(30-40%)和甘露聚糖(30%),此外,脂類8.5-13.5%,蛋白質(zhì)6-8%,還含有幾丁質(zhì),酵母菌的葡聚糖,分子是為240000道爾頓,是一種分枝聚合物,葡聚糖與甘露糖之...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環(huán)境,使細胞在三維環(huán)境中生長。1,在使用鼠膠原蛋白型包被...
細胞凍存秘籍:程序1.凍存前檢查凍存前,細胞應處于指數(shù)生長期,確保細胞處于健康狀態(tài)。理想情況下,應在收獲細胞前24小時更換培養(yǎng)基。建議對培養(yǎng)物進行微生物污染物,特別是支原體的檢測,并通過適當?shù)姆椒?,如STR分析確定其身份。如果在培養(yǎng)過程中使用物品,那么建議在冷...
實驗應用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,細胞角蛋白18表達陽...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機...
細胞凍存:取出凍存管,注明細胞名稱,代數(shù),日期。離心后,以無菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細胞沉淀。將細胞沉淀與凍存液充分混勻,根據(jù)計數(shù)結(jié)果,將細胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細胞凍存懸液分裝進細胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1...
鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察:果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時呈微白色;礦化2d后,膠體的顏色逐漸加深至乳白色;礦化6d后,隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內(nèi)部,膠體顏色加深至純白色,并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體,予鑷子夾起,其表...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養(yǎng)中的應用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma)...
細胞凍存秘籍:1.在倒置相差顯微鏡上每隔幾分鐘檢查酶處理的進展情況。一旦細胞變圓,輕輕敲擊細胞瓶使其脫離塑料表面。加入5mL含血清的生長培養(yǎng)基滅活胰酶。可能需要劇烈的移液操作來使培養(yǎng)容器底部的剩余細胞脫落,或?qū)⒓毎麍F塊分解成單細胞懸浮液。胰酶的去除或失活對于冷...
細胞凍存,我們應該注意哪些事項:1、凍存細胞是為了留種,所以要選擇高濃度的細胞量進行凍存。正常情況下,當細胞濃度達到1*105/ml時即可凍存,具體是多少量主要根據(jù)個人觀察。2、二甲基亞砜(DMSO)因為穿透細胞的能力較強,因此作為常用的凍存劑,也可以叫做細胞...
細胞凍存時間和操作步驟:1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液,通常細胞凍存液含10%的DMSO,或者是甘油、10-20%的小牛血清;、取對數(shù)生長期細胞,并且還需要用PBS進行清洗,需要注意在這里要丟棄掉舊的細胞凍存液;3.去除PBS,加入適量的胰蛋白酶,以覆蓋住培養(yǎng)皿表...
除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺...
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長,根據(jù)多年來市場反饋不斷進行技術(shù)升級和改良得來。具有操作步驟少,實驗快捷,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿足后續(xù)實驗要求的需要,適用提取樣品普遍等特點。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不...
外泌體的形成與鑒定:首先,細胞膜內(nèi)陷形成一個杯狀結(jié)構(gòu),包括細胞表面蛋白和與細胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白,導致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome,ESE)的從頭形成,或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合;trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)...
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNa...
無血清快速細胞凍存液凍存液成分。無血清細胞,無血清干細胞及MSC凍存液。保存條件:儲存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將100ml產(chǎn)品...
無血清細胞凍存液:采用patent的凍存配方,用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途。用包括DMSO在內(nèi)的復合凍存保護劑替代了單一的DMSO的保護作用。復合保護劑的內(nèi)部保護劑,易于穿透細胞膜,避免在細胞凍存過程中細胞內(nèi)部的水分子形成冰晶損傷細胞;外...
外泌體,是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而較近幾年,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,能作為信號分子傳遞給其他細胞...
外泌體相關(guān)技術(shù)在過去幾年一直在快速發(fā)展,預計市場將大幅增長,因為它們可被應用到液體活檢、精細醫(yī)學和再生醫(yī)學領(lǐng)域。特別是,一些疾病衍生的外泌體通過調(diào)節(jié)血管生成、轉(zhuǎn)移和免疫來影響細胞的侵襲性,使其成為用于一些疾病檢測、診斷和治病選擇的極其有用的生物標志物來源。在風...
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養(yǎng)中的應用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma)...
細胞凍存經(jīng)驗談:選對凍存培養(yǎng)基才是王道:研究人員經(jīng)常需要冷凍細胞并保存,以供后續(xù)實驗或臨床使用?;具^程相當簡單:慢慢冷凍細胞,將凍存管放入液氮中,并在需要時快速解凍。凍存培養(yǎng)基能支持細胞并防止冰晶形成。不過,Malfavon的體驗告訴我們,使用不同的凍存培養(yǎng)...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環(huán)境,使細胞在三維環(huán)境中生長。1,在使用鼠膠原蛋白型包被...
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上...