肝臟是人體“的”代謝，與、、糖尿病等代謝性疾病密切相關(guān)。肝細(xì)胞在肝臟參與的各種代謝過程中發(fā)揮了主要作用。肝細(xì)胞是實(shí)質(zhì)細(xì)胞，在肝臟中的比例多；此外實(shí)質(zhì)細(xì)胞還包括少量的膽管內(nèi)皮細(xì)胞。而非實(shí)質(zhì)細(xì)胞則包括星狀細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，NK細(xì)胞，成纖維細(xì)胞等，只占整個(gè)肝臟細(xì)胞...

雖然各種組織培養(yǎng)要滿足不同的條件，但有許多因素是大多數(shù)原代培養(yǎng)共同需要的：（1）在取材時(shí)需去除脂肪和壞死的組織。（2）為減小對(duì)組織的損傷，需用鋒利的器具。（3）適度離心以去除用于解離的酶。（4）由于原代培養(yǎng)組織細(xì)胞的存活率很低，故用于原代培養(yǎng)的細(xì)胞的密度應(yīng)高于...

幾十年來，人們一直在研究染色體分離，而通過對(duì)單個(gè)細(xì)胞的觀測(cè)先前的研究者認(rèn)為離體細(xì)胞和組織內(nèi)的細(xì)胞均會(huì)以相同的方式進(jìn)行染色體分離。然而，在以前的工作中，Knouse發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)皿中生長(zhǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)染色體非整倍性分離的概率遠(yuǎn)高于在其天然組織中的細(xì)胞。這促使...

生長(zhǎng)因子是指具有刺激細(xì)胞生長(zhǎng)活性的細(xì)胞因子，生長(zhǎng)因子能調(diào)節(jié)細(xì)胞的各類活動(dòng)與功能。生長(zhǎng)因子通常充當(dāng)細(xì)胞間的信號(hào)分子。生長(zhǎng)因子有三種類型，T細(xì)胞生長(zhǎng)因子，EGF表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子。細(xì)胞生長(zhǎng)因子的作用是一種多功能強(qiáng)力細(xì)胞因子，對(duì)促進(jìn)成纖維細(xì)胞的...

為了彌補(bǔ)這一不足，機(jī)體在發(fā)育過程中還保留了一部分未分化的原始細(xì)胞，也就是干細(xì)胞。一旦生理需要，這些干細(xì)胞可以按照發(fā)育途徑通過分裂產(chǎn)生分化細(xì)胞。需要多種類型的細(xì)胞來修復(fù)時(shí)，則需要促活多潛能干細(xì)胞來修復(fù)受傷的組織。多向分化潛能和自我更新是干細(xì)胞的基本特點(diǎn)。具體來講...

培養(yǎng)液的配置方法大致相同，如下：1.取一袋干粉培養(yǎng)基，將干粉培養(yǎng)基溶于欲配制液體總量2/3的三蒸水，沖洗包裝袋2次倒入培養(yǎng)液中，加入磁性攪拌棒并置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?，確保培養(yǎng)基干粉充分溶解。2.按照產(chǎn)品說明的要求和實(shí)驗(yàn)需要補(bǔ)加NaHCO3。3.調(diào)整培養(yǎng)...

原代細(xì)胞體外培養(yǎng)現(xiàn)狀：原代細(xì)胞自然生長(zhǎng)有兩種方式，錨定依賴或非錨定依賴，這主要取決于它們?cè)隗w內(nèi)的組織來源：外周血（非錨定依賴）或固體組織部位（錨定依賴）。原代細(xì)胞一旦分離后，24-48h內(nèi)需要進(jìn)行貼壁或起始，開始培養(yǎng)。廣義地說，所有的哺乳動(dòng)物細(xì)胞，...

1960年代無血清培養(yǎng)基開發(fā)可以分為兩個(gè)研究方向推進(jìn)：一條路線是尋找能替代血清支持細(xì)胞在體外擴(kuò)增的營(yíng)養(yǎng)成分。血清含有上千種不同成分，為細(xì)胞體外培養(yǎng)提供普遍而豐富的營(yíng)養(yǎng)和各種細(xì)胞因子，但動(dòng)物血清的使用存在引進(jìn)外源病毒的風(fēng)險(xiǎn)，因此減少血清濃度甚至完全去除血清對(duì)細(xì)胞...

兩種方法都需要培養(yǎng)數(shù)天，并且需要不斷觀察，找出只有單個(gè)細(xì)胞增殖的，且100%發(fā)熒光的細(xì)胞孔。做好標(biāo)記，定期換液（含有嘌呤霉素）。待細(xì)胞長(zhǎng)滿后進(jìn)行檢測(cè)，篩選出高表達(dá)或干擾效率高的細(xì)胞株，然后進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)凍存或者進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。注意：由于第一種方法細(xì)胞接種量少，所以...

血清凍融問題?1.血清凍融說明?●將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小時(shí)左右使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻?！袂形饘倓倧?20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中,無論室溫的水或者37℃的水,因?yàn)樵?..

PH計(jì)的溫度補(bǔ)償應(yīng)考慮到溫度對(duì)電極系統(tǒng)的影響：在一些稀釋液和培養(yǎng)基中，PH隨溫度的變化而有相當(dāng)大的變化。對(duì)于液體培養(yǎng)基和稀釋液而言，PH通常既可以在25℃下,也可以在其使用時(shí)的溫度下調(diào)整和測(cè)定。瓊脂培養(yǎng)基必須在溶解后進(jìn)行PH的調(diào)整，溶解的溫度在45℃以上：...

單克隆細(xì)胞株的篩選：如何獲得高表達(dá)或者干擾效率高的單克隆細(xì)胞株，是很多科研工作者比較頭疼的事情，往往單克隆細(xì)胞株的過表達(dá)或干擾效率比混合克隆差。在這里，作者想說混合克隆和單克隆各有優(yōu)缺點(diǎn)?；旌峡寺≈苽渲芷诙?，過表達(dá)和干擾效果往往也很好，但隨著傳代次數(shù)的增加，過...

諾和諾德前首席執(zhí)行官在職時(shí)LarsRebienSorensen曾預(yù)測(cè)，諾和諾德的干細(xì)胞療法有望在5年內(nèi)在臨床上治I型糖尿病。展望：根據(jù)國(guó)際市場(chǎng)調(diào)研機(jī)構(gòu)TransparencyMarketResearch的報(bào)告，至2025年全球干細(xì)胞市場(chǎng)預(yù)計(jì)將達(dá)到2705億美元...

注意事項(xiàng)1.取材要求新鮮，無菌，解剖小鼠時(shí)，注意不要損傷脾臟及其周圍的臟器，尤其是腸道等，防止污染脾臟。2.沖洗脾臟時(shí)要盡量洗凈血污，去除無用組織，并要防止組織干燥。3.碾磨后及時(shí)用清水沖洗篩網(wǎng)，防止組織、細(xì)胞阻塞網(wǎng)孔。4.計(jì)數(shù)前，注意吸盡平皿里的...

什么是細(xì)胞株？細(xì)胞株是細(xì)胞在初次危機(jī)（第十代時(shí)）之后活下來的傳到第40到50代仍具有原代細(xì)胞染色體的二陪體的數(shù)量和接觸抑制功能的細(xì)胞。原代培養(yǎng)物經(jīng)初次傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line)， 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳...

LB培養(yǎng)基是一種應(yīng)用普遍和普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱普通培養(yǎng)基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。酵母提取物：酵母經(jīng)破壁后將其中蛋白質(zhì)、核酸、維生素等抽提，再經(jīng)生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、維生素等天然活性成分的淡黃色粉末，其中...

實(shí)驗(yàn)室常用細(xì)胞株：Clone 9 CRL-1439 大鼠 肝臟 上皮細(xì)胞、貼壁 F-12K, 10%FBS；Clone M-3 CCL-53.1 小鼠 黑素瘤 上皮細(xì)胞、貼壁 F-12, 15% HS和2.5% FBS；COS-1 CRL-1650 猴 腎 成...

原代培養(yǎng)物經(jīng)初次傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line)， 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限， 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line)， 如可以連續(xù)培養(yǎng)， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cel...

我們的無分化誘導(dǎo)劑的軟骨分化培養(yǎng)基已經(jīng)被專門開發(fā)并優(yōu)化用于體外間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨形成的研究。間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基（MCDM）是一種無菌液體培養(yǎng)基，含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激su、生長(zhǎng)因子和微量礦物質(zhì)。培養(yǎng)基為HEPES和碳酸氫鹽...

單克隆細(xì)胞株的篩選：如何獲得高表達(dá)或者干擾效率高的單克隆細(xì)胞株，是很多科研工作者比較頭疼的事情，往往單克隆細(xì)胞株的過表達(dá)或干擾效率比混合克隆差。在這里，作者想說混合克隆和單克隆各有優(yōu)缺點(diǎn)?；旌峡寺≈苽渲芷诙?，過表達(dá)和干擾效果往往也很好，但隨著傳代次數(shù)的增加，過...

神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nervegrowthfactor,NGF)在20世紀(jì)50年代被發(fā)現(xiàn)，Levi—Montgalcini和Cohen證明了它重要的生物活性因子，是外周神經(jīng)系統(tǒng)和腦細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育和生存所必需的一種蛋白質(zhì)。自NGF被發(fā)現(xiàn)以來，經(jīng)過眾多的科...

所以如果想獲得效果好的單克隆細(xì)胞株，建議是增加篩選的總量。很多研究者正是因?yàn)楹Y選總量不夠，或者的單克隆細(xì)胞株數(shù)量有限，也就導(dǎo)致了很難篩到效果好的細(xì)胞株。常規(guī)的篩選單克隆細(xì)胞株有兩種方法，原理是一樣的，操作上有些區(qū)別。1.有限稀釋法：將鑒定正確的混合克隆細(xì)胞株進(jìn)...

慢病毒染上目的細(xì)胞：通過上述實(shí)驗(yàn)確定了慢病毒染上目的細(xì)胞的比較好MOI，接下來就可以進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選工作了。將目的細(xì)胞接種24孔板，控制好細(xì)胞密度，貼壁后大約為30%-40%左右的密度；細(xì)胞過夜培養(yǎng)后，按比較好MOI加入病毒，同時(shí)加入終濃度為8μg/mlp...

常見細(xì)胞株：104C1轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞；143TK人胸腺激酶缺陷性細(xì)胞系；1590人乳腺細(xì)胞系；16HBE人支氣管上皮細(xì)胞；208F大鼠成纖維細(xì)胞；22RV1人前列腺細(xì)胞；293人胚腎細(xì)胞；293A人胚腎細(xì)胞系；293AV人胚腎細(xì)胞-用于腺病毒包裝；A278...

肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：上皮細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類肺泡上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的適于其生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基，包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽，在含...

黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基質(zhì)可加快刺激黑素細(xì)胞增殖、分化及黑素形成。包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激su、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(0.5%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽，在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后p...

原代培養(yǎng)物經(jīng)初次傳代成功即稱為細(xì)胞系（CellLine），因此細(xì)胞系可泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊...

什么是基本培養(yǎng)基？基本培養(yǎng)基是只能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基，有時(shí)用符號(hào)“[－]”來表示。野生型菌株是指從自然界分離得到的微生物在其發(fā)生突變前的原始菌株。什么是完全培養(yǎng)基？完全培養(yǎng)基是一種在基本培養(yǎng)基內(nèi)加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類...

傳代培養(yǎng)的細(xì)胞是細(xì)胞系；細(xì)胞株就是從細(xì)胞系篩選出來的有特殊屬性的比如無線增值的。細(xì)胞株(CellStrain)：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(CellStrain)，也就是說，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或...

放線菌培養(yǎng)基淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號(hào)培養(yǎng)基)可溶性淀粉2.0g硝酸鉀0.1g磷酸氫二鉀0.05g氯化鈉0.05g硫酸鎂0.05g硫酸亞鐵0.001g瓊脂2g水100ml先把淀粉放在燒杯里，用5毫升水調(diào)成糊狀后，倒入95毫升水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解...