江蘇水體微生物測序分析

來源: 發(fā)布時間:2021-09-01

傳統(tǒng)上人類血液被認為是無菌的,微生物血漿細胞游離DNA(mcfDNA)可能有兩種來源,包括微生物(細菌,病毒或噬菌體)的易位,這是指屬于人類微生物組的微生物細胞或其組成部分通過與外部環(huán)境連通的上皮粘膜進入循環(huán)系統(tǒng)。另外,當組織粘膜被局部傳染(例如口腔,肺和皮膚傳染)或物理損傷(例如侵入性的手術(shù)或意外傷害)破壞時,侵入性的病原體可能會偶然進入血液,在嚴重的情況下引起菌血癥或病毒血癥。一旦進入循環(huán)系統(tǒng),微生物核酸就會通過循環(huán)核酸外切酶被降解,然后形成小的DNA的片段,即微生物血漿細胞游離DNA(mcfDNA)。mcfDNA是一種新興的傳染性疾病診斷生物標志物。盡管絕大多數(shù)cfDNA來自于患者自身的細胞,但在急性傳染期間可從血漿中檢測到微生物病原體的微量物質(zhì)。DNA宏基因組測序的病原檢出率均高于培養(yǎng)等傳統(tǒng)方法,表現(xiàn)出好的診斷性能。江蘇水體微生物測序分析

病毒宏基因組測序注意事項:探普生物對樣本進行宏病毒組測序?qū)嶒灮诙鷾y序技術(shù)。經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學分析這3大基本流程后,樣本轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門針對病毒的核酸純化樣本指南,以提高純度和得率,與此同時探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二,文庫構(gòu)建環(huán)節(jié)。樣本的核酸具備濃度低,總量少的特點。探普生物專門針對這一點開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三,生物信息學分析環(huán)節(jié)。寄生性質(zhì)的生物下機數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點,優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了專門用的的生物信息學分析流程,可處理復雜背景下的目標物種序列。江蘇水體微生物測序分析探普生物的研發(fā)團隊都是來自全國各地病毒學、微生物學專業(yè)高校的。

探普生物的病毒測序:由于探普生物具備處理大量多樣的病毒樣本的經(jīng)驗,熟知各類病毒樣本的特性,因此對于樣本準備有獨特的方法指南,這就為后續(xù)的分析結(jié)果打下了牢固的基礎(chǔ),減少了客戶和公司之間的摩擦,也幾乎沒有售后問題。獨有的實驗和分析流程可兼容高復雜度低濃度的病毒核酸。因此探普生物的病毒測序結(jié)果質(zhì)量有保障外還具備:樣本準備簡單,商務(wù)流程通暢,回復消息及時,反饋處理迅速等優(yōu)點。我國經(jīng)濟進入“新常態(tài)”,總體上推動["病毒測序","病毒全基因組測序","病毒宏基因組測序","未知病原鑒定"]從粗放式增長向注重質(zhì)量、效率方向轉(zhuǎn)變。

宏基因組學或元基因組(metagenomics),其定義為“Thecollectivegenomesofsoilmicroflora”。該學科可追溯到第1次提出環(huán)境基因組學的概念,在對太平洋浮游生物進行系統(tǒng)分類時構(gòu)建了第1個噬菌體文庫,并發(fā)現(xiàn)了15種全新的細菌序列。宏基因組學概念是“土壤中所有微生物基因組的總和”命名為土壤宏基因組,系統(tǒng)給出了宏基因組的概念,提出針對特定環(huán)境樣品中遺傳物質(zhì)總和進行非培養(yǎng)研究。對宏基因組進一步概括為“應(yīng)用現(xiàn)代的分子生物學技術(shù)直接從環(huán)境中獲取的目的微生物群落基因組,叫宏基因組”。通過對樣本進行宏病毒組測序,我們可以了解單個樣本里百度的相對含量是多少,優(yōu)勢物種是什么。

隨著測序技術(shù)的發(fā)展,對微生物群(微生物組)的研究逐漸加深,研究熱點越來越多集中于環(huán)境和生物體相互作用的微生物群。加之測序成本降低,分析技術(shù)不斷提升,都使得宏基因組測序技術(shù)得到普遍應(yīng)用。為什么要做宏基因組:宏基因組相對16S來說其物種分辨率會更高,隨著物種測序完成越來越多,數(shù)據(jù)庫更加完善,在腸道菌群方面基本能實現(xiàn)97%以上的菌都能鑒定到種,90%以上到菌株層面。而且可以同時獲得除RNA病毒外的所有物種的分布。此外包括菌基因組CNV等方法的出現(xiàn),可以直接通過大規(guī)模宏基因組測序不只找到可能的菌,進一步還能鑒定出特定候選基因區(qū)段。基于NGS的宏基因組學檢測技術(shù)在2014年被用于臨床傳染患者的病原學診斷。四川宏基因組分析

宏基因組測序克服了傳統(tǒng)的純培養(yǎng)方法的技術(shù)限制。江蘇水體微生物測序分析

宏基因組測序相關(guān)知識:宏基因組測序是對人體樣本或特定環(huán)境樣品中的總核酸(DNA或RNA)進行高通量測序,通過比對數(shù)據(jù)庫,得到傳染病原體的信息,能夠檢測出新發(fā)和罕見病原體,特別是在未知病原檢測中發(fā)揮了難以替代的作用,當然宏基因組檢測方法也面臨不少挑戰(zhàn),檢測結(jié)果的靈敏度受宿主及其他微生物背景核酸的影響。高通量測序技術(shù)能夠提供準確而科學的基因測序分析結(jié)果,為病情防控提供有力技術(shù)保障??茖W家通過對病毒進行全基因組測序,可以了解病毒不同傳播階段的變異情況,推測病毒對人的傳染力的變化及傳播情況。江蘇水體微生物測序分析