HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,在進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此,在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步。返藍(lán)作用:分化之后,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,再用弱堿性水(0.2%氨水)使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時間較長。HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題。江蘇值得信賴的HE染色多少錢
HE染色等常規(guī)染色,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,并且對抗原基本無影響。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,膽固醇染色。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定)。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片。西藏值得信賴的HE染色報告比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。
HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細(xì)胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,伊紅著色由淺變深。
HE染色原理:一、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時,大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對比科研常備實驗操作之HE染色。
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,對組織細(xì)胞的各種成分都可著色,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。經(jīng)過HE染色,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色??梢杂^察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等。首先切片組織是否完整,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕;***細(xì)胞核是否清晰可見,胞核與包漿要對比鮮明。什么是HE染色,HE染色實驗的目的。內(nèi)蒙古結(jié)果客觀的HE染色外包
關(guān)于HE染色,常用的結(jié)果分析原理。江蘇值得信賴的HE染色多少錢
HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞,可直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性。因此,能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,固定狀態(tài)良好后,嚴(yán)格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進(jìn)行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數(shù)字切片,在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況,對切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血、出血、水腫、變性、壞死、增生、纖維化、機(jī)化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述,并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識。江蘇值得信賴的HE染色多少錢