HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu)。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,小葉分隔不明顯,但動(dòng)物如豬或小鼠,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu)。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周?chē)派錉钆帕?,稱(chēng)為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞。20倍物鏡下,肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核,細(xì)胞核大而圓,居中,異染色質(zhì)少而著色淺,能清晰看到核仁。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富,多成嗜酸性,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時(shí),胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì)。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),等等,但是在光鏡下是無(wú)法看到的,需要在電鏡下才能觀察到。當(dāng)然,肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞,還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài),但是在HE染色時(shí)并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整、胞核有無(wú)增大、肝小葉形態(tài)是否完整,以檢測(cè)藥物等刺激因素對(duì)肝臟的損傷作用。心臟組織HE染色如何觀察。內(nèi)蒙古專(zhuān)業(yè)的HE染色哪家好
HE染色常見(jiàn)問(wèn)題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過(guò)度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?;蛟诹鲃?dòng)自來(lái)水(一般自來(lái)水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過(guò)久。對(duì)策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。內(nèi)蒙古專(zhuān)業(yè)的HE染色哪家好HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。
HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,通過(guò)它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷。一、染色目的 病理學(xué)的所有切片,都必須通過(guò)一種以上的染料,通過(guò)各種不同的方法,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,將其顯示出來(lái),使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),方能提高。
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡(jiǎn)稱(chēng)HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中**基本、使用*****的技術(shù)方法。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來(lái)。石蠟組織切片的HE染色。
HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學(xué)染色法,其主要依靠蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實(shí)驗(yàn)過(guò)程:1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來(lái)水洗。2、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來(lái)水洗,分化液分化,自來(lái)水洗,返藍(lán)液返藍(lán),流水沖洗。3、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片:切片依次放入無(wú)水乙醇I5min-無(wú)水乙醇II5min-無(wú)水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹(shù)膠封片。5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。結(jié)果判讀:細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色常用HE染色試劑配制方法。浙江推薦的HE染色公司
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HE染色反藍(lán)的原理:蘇木素染液,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化:蘇木素染色之后,用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,但是在細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,把這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使色素與組織解離,分化不可過(guò)度。藍(lán)化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),而呈藍(lán)色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色,稱(chēng)藍(lán)化作用,一般多用自來(lái)水浸洗即可變藍(lán),也可用溫水(50度溫水比較好)變藍(lán)。內(nèi)蒙古專(zhuān)業(yè)的HE染色哪家好